Syndróm padnutia vajíčok-76 (EDS-76) - Syndróm padnutia vajíčok-76 (EDS-76) - vírusové ochorenie kurčatá, charakterizované znížením produktivity vajec, zmenou tvaru vajec, kvalitou a pigmentáciou škrupiny a porušením štruktúry proteínu.
Historický odkaz, distribúcia, ekonomické škody. V roku 1975 vo viacerých krajinách západná Európa(Holandsko, Anglicko, Severné Írsko a o niečo neskôr v Taliansku, Francúzsku, Švédsku, Dánsku, Maďarsku a ďalších krajinách) sa objavila nová choroba kurčiat, charakterizovaná znížením produkcie vajec, znášaním vajec bez škrupiny alebo vajec s preriedeným depigmentovaná škrupina. Ochorenie sa šíri obzvlášť rýchlo v oblastiach s vysokou koncentráciou chovu hydiny.
Kvôli charakteristickým črtám, ktoré sú tomuto ochoreniu vlastné, sa v literatúre nazýval "syndróm poklesu vajíčok-76" - syndróm poklesu vajca-76 (EDS-76). Prvýkrát ho opísal J. Van Ecke a kol., 1976.
Rýchlo sa šíril a bol zaregistrovaný v Japonsku, Indii, Austrálii, Nigérii, Brazílii, Mexiku, ZSSR a na Taiwane.
Hypotézu výskytu EDS-76 navrhlo množstvo vedcov, ktorí za pôvodcu ochorenia považujú kačací vírus, ktorý u prirodzených „hostiteľov“ nespôsobuje patológiu. Kŕdle kurčiat boli infikované vírusom v dôsledku použitia vakcíny proti Marekovej chorobe z kmeňa Rispens, pripravenej z kultúry kačacích fibroblastových buniek kontaminovaných adenovírusom. Vírus sa rýchlo adaptoval na svojho nového „hostiteľa“ a ukázal svoje patogénne vlastnosti. Pôvod patogénu EDS-76 z kačíc vysvetľujú autori tým, že sa choroba prvýkrát objavila v Holandsku, krajine intenzívneho chovu kačíc.
Podľa štatistík v roku 1993 v Rusku bol EDS-76 prvýkrát diagnostikovaný u kurčiat a boli prijaté terapeutické a preventívne opatrenia v týchto regiónoch: Leningrad, Moskva, Sverdlovsk, Čeľabinsk, Omsk - na populácii kurčiat 2 140 774. Z nich najväčšie percento pacientov tvorili kurčatá Leningradská oblasť(67,1 %), Čeľabinská oblasť (15,9 %), Omská oblasť (12,6 %).
V roku 1994 došlo k ďalšej distribúcii SSYA-76 - v Moskve, Leningrade, Kalinine, Vladimire, Vologde, Tule, Jaroslavli, Sverdlovsku, Čeľabinsku, Nižnom Novgorode, Perme, Omsku, Uljanovsku, Orenburgu, Smolensku, Oryole, Murmansku, vrátane v mnohých autonómnych republikách bolo zaočkovaných iba 18 452 923 kurčiat. Najväčšie percento pacientov a nosičov vírusu tvorili regióny Moskva (21,1 %), Leningrad (17,1 %), Omsk (15,8 %), Uljanovsk (10 %), Nižný Novgorod (8,75 %).
V roku 1995 bola choroba zaregistrovaná vo vyššie uvedených regiónoch, ako aj v regiónoch Bryansk, Pskov, Archangelsk, Ryazan, Kaluga, Volgograd, Kursk, Belgorod, Novosibirsk, územie Krasnojarsk atď. v mnohých autonómnych republikách bolo zaočkovaných 52 270 669 kurčiat. Z nich najväčšie percento bolo v oblasti Krasnojarsk (15,5 %), Moskva (10,9 %), Perm (6,2 %), Uljanovsk (4,2 %), Nižný Novgorod (3,6 %), Novosibirsk (3 %).
Egg Drop Syndrome-76 spôsobuje značné ekonomické škody. Podľa zahraničných výskumníkov škoda spočíva v nedostatku v priemere 15 vajec na jednu nosnicu (v priemere je vyradených do 50 vajec z nosníc), znášaní až 15 % vajec bez škrupiny, až 12 % vajec s nosnicou. krvný krúžok, 7% pokles liahnivosti kurčiat a ich nízka životaschopnosť, čo vedie k zvýšenej až 10% úmrtnosti kurčiat v období do dvoch týždňov veku. Škodu spôsobenú EDS-76 ešte zhoršujú náklady na reštriktívne opatrenia, najmä tie, ktoré sa týkajú chovných fariem.
Patogén. Ochorenie je spôsobené vírusom obsahujúcim DNA z čeľade Adenoviridae.
Vírus ECC-76 bol prvýkrát izolovaný v roku 1976 J. Me. Ferran v Severnom Írsku. V súčasnosti je tento kmeň patogénu známy pod číslom „127“. Takmer súčasne v Anglicku izoloval Bexandale podobný vírus z leukocytov chorých kurčiat, nazývaný "BC-14". Neskôr bol vírus EDS-76 izolovaný v Maďarsku a dostal názov „BB/78“.
Pôvodcom infekcie je kačací adenovírus, ktorý na rozdiel od známych sérotypov vtáčích adenovírusov má schopnosť aglutinovať erytrocyty kurčiat, kačíc, husí, moriek a mexický vírus EDS-76 (kmeň HO-1) má schopnosť aglutinovať ľudské erytrocyty, pávy a holuby.
Morfologicky je virión častica s priemerom približne 80 nm, s vláknitými výbežkami dlhými 25 nm a priemerom 2 nm, ktoré sa končia kyjovitými zhrubnutiami.
Vírus sa dobre reprodukuje v tkanivových kultúrach pečene a obličiek kuracích a kačacích embryí, v kultúre fibroblastov a v alantoickej dutine vyvíjajúcich sa kačacích embryí. Počas rozmnožovania v bunkovej kultúre spôsobuje vírus cytopatický efekt (CPE) a vytvára intranukleárne inklúzie charakteristické pre vtáčie vírusy. Zistilo sa, že kačacie embryá a bunkové kultúry z nich pripravené sú vhodnejším modelom pre vírus ako bunkové kultúry kuracích embryí. Táto vlastnosť sa úspešne využíva na izoláciu vírusov, získavanie materiálu obsahujúceho vírus vo vysokých titroch pri výrobe diagnostických prípravkov a vakcín.
Pôvodca SSYA-76 je relatívne odolný voči éteru, chloroformu a pôsobeniu teplotných faktorov. Keď sa vírus zahreje na 56 °C počas 30 minút, infekčná aktivita
znížená nie o viac ako 50 %. Zahriatie na 70 % spôsobuje stratu infekčnej a hemaglutinačnej aktivity po 10 minútach. Po zmrazení pri -25 °C zostáva vírus životaschopný viac ako 3 roky. Vírus je relatívne stabilný pri pH 6,0-8,0.
Epizootológia. Nosnice všetkých plemien sú náchylné na ochorenie s maximálnym prejavom ochorenia v období najvyššej produkcie vajec (200-240 dní), ale vták môže byť postihnutý v ktoromkoľvek období produkčného cyklu. Choroba sa rýchlo šíri u vonkajšej hydiny. Nosnice vysoko produktívnych krížencov sú náchylnejšie na ochorenie, vrátane Hayssex Brown, Loman Brown, Isa Brown. Verí sa, že vták mäsové plemená náchylnejšie na choroby ako vaječné vtáky. V prirodzených podmienkach je vírus EDS-76 široko rozšírený medzi domáce a divé kačice, zároveň je pre ne apatogénny, bez toho, aby spôsoboval ochorenie; no zároveň môžu byť zdrojom nákazy pre kurčatá. Napriek nízkej nákazlivosti choroby existuje riziko zavlečenia patogénu na územie farmy. voľne žijúcich vtákov: holuby, vrabce.
Podľa niektorých autorov môžu byť brojlery potenciálnym zdrojom nákazy. Hlavnou cestou šírenia patogénu je transovariálny vertikálny prenos. Keď sa objavia prvé klinické príznaky ochorenia, zaznamená sa horizontálne šírenie patogénu.
Vajcia sú obzvlášť intenzívne infikované v období virémie, ktorá sa časovo zhoduje s poklesom vajíčok. V rovnakom období sa vírus vylučuje stolicou, hltanovým a tracheálnym hlienom. Je možné, že bude izolovaný so spermiami kohútov. Vírus sa môže šíriť aj očkovaním proti iným infekciám.
Na experimentálnu reprodukciu infekcie sa používajú perorálne intrakonjunktiválne a intrakloakálne spôsoby podávania, ako aj spoločný chov chorých a zdravých vtákov.
Špecifické predisponujúce faktory pre výskyt infekcie, okrem veku, neboli stanovené. Epizootologickým znakom syndrómu-76 je schopnosť vírusu neprejaviť sa v tele, kým vták nedosiahne pubertu. Dôvodom aktivácie vírusu je stres spôsobený spustením vajíčok. Po 40. týždni života vták nevylučuje vírus, ale v krvi sú obsiahnuté špecifické protilátky.
U kurčiat chovaných z kurčiat vyliahnutých z infikovaných vajec a infikovaných v prvých dňoch života nedochádza k poklesu produkcie vajec, aj keď nemusí dosiahnuť predpokladanú úroveň. Takéto vtáky zostávajú nosičmi vírusu počas celého obdobia chovu. Vírus sa reaktivuje a uvoľňuje až s nástupom kladenia vajíčok vo veku 22-26 týždňov. Pokles produkcie vajec je zaznamenaný len u kurčiat, ktoré sú séronegatívne počas celého obdobia odchovu, to znamená, že čím negatívnejšie sérologicky reagujú kurčatá v infikovanom stáde, tým výraznejší je syndróm poklesu vajec.
Patogenéza. Počas obdobia latentnej infekcie vírus pretrváva v čreve. Virémia je jedným zo štádií adenovírusovej infekcie. Predpokladá sa, že k reaktivácii vírusu dochádza v dôsledku zmeny hormonálneho profilu na začiatku ovipozície, čo sa považuje za stresový faktor. Trvanie periódy perzistencie a izolácie vírusu má inverzný vzťah s ohľadom na vek infekcie kurčiat. Čím skôr sa nakazia, tým dlhšie sú tieto obdobia.
V období virémie sa vírusové častice nachádzajú v epitelových bunkách sliznice vajcovodov a v iných orgánoch. Vírus má zrejme priamy vplyv na žľazový epitel maternice, čo spôsobuje kladenie vajec bez škrupiny alebo vajec s tenkou a krehkou škrupinou.
Existujú dôkazy, že vírus narúša "sodno-draslíkovú pumpu" žľazových buniek sliznice maternice. Takže u sliepok, ktoré znášajú vajcia s rozbitou škrupinou, je koncentrácia sodíka v obsahu maternice výrazne zvýšená a vápnik, draslík a horčík sú znížené v porovnaní s intaktnými alebo infikovanými, ale znášajúcimi vajciami s normálnou škrupinou, sliepkami. Zvýšenie kyslosti môže viesť k rozpusteniu vápnika a narušeniu tvorby škrupín.
Klinické príznaky. Klinický obraz ochorenia je vyjadrený mierne. Neexistujú žiadne typické príznaky. V niektorých prípadoch majú choré kurčatá hnačku, depresiu, rozstrapkané perie, anémiu a znížený príjem krmiva.
Na vrchole ochorenia sa pozoruje oslabené dýchanie, tekutá zelenkavá podstielka po dobu 1-2 týždňov. V neskorších štádiách ochorenia je zaznamenaná cyanóza náušníc a hrebeňa. Najcharakteristickejším typickým príznakom ochorenia je zníženie produktivity vajec a príjem podradného vajíčka. Produktivita vajec klesá v priemere o 15-30% av niektorých nepriaznivých stádach až o 50%. Zároveň pokles produkcie vajec prebieha určitým spôsobom - celé obdobie poklesu je 6-7 týždňov, z ktorých 4-5 týždňov pripadá priamo na pokles a 2-3 nasledujúce týždne - na obdobie zotavenia. . Pri obsahu klietok sa produktivita kurčiat takmer úplne obnoví alebo zostáva o 1 až 3 % nižšia, ako sa plánovalo, a pri obsahu podlahy spravidla nedosahuje pôvodnú hodnotu o 7 až 10 %.
Zmena kvality vajíčka získaného v období choroby sa prejavuje tým, že chorý vták nosí vajíčko bez škrupiny alebo s pruhovanými drsnými útvarmi na povrchu škrupiny počas 6-8 týždňov. Výrazne sa zvyšuje počet „mramorových“ vajec, zvyšuje sa percento bojovných a vrúbkovaných vajec. Zhoršujú sa inkubačné vlastnosti vajec, znižuje sa plodnosť vajec, liahnivosť a životaschopnosť kurčiat.
Zmena kvality škrupiny, takzvané „tučné vajce“, sa najčastejšie pozoruje u mäsovej hydiny a u hnedých nosníc. U kurčiat plemena biely leghorn, „Haysex white“, je bielkovinová časť vajíčka náchylnejšia na zmenu, a nie škrupina. U týchto plemien kurčiat sa proteín stáva vodnatým, zakaleným. Vírus EDS-76 spôsobuje opuch žľazového tkaniva maternicových klkov s následnou degeneráciou epitelu sliznice maternice, čo vedie k nedostatočnej resorpcii vápnika a vedie k acidóze v dôsledku zníženia pH sekrétov maternice. sliznice a vajcovodu. To zase spôsobuje, že uhličitan vápenatý produkovaný škrupinovou žľazou sa neutralizuje, výsledkom čoho sú vajcia bez škrupiny, vajcia s mäkkými, tenkými, depigmentovanými škrupinami.
Úmrtnosť vtákov so syndrómom poklesu vajíčok-76 je zanedbateľná aj na vrchole choroby. Úmrtnosť medzi dospelými nosnicami môže byť 3-5%, najmä v dôsledku žĺtkovej peritonitídy a zvýšeného počtu klkov.
patologické zmeny. Hlavné patomorfologické zmeny v ECD-76 sú lokalizované v orgánoch reprodukčného traktu - vaječník, vajcovod, maternica.
Pri pitve padlých a násilne zabitých dospelý vták postihnutých vírusom EDS-76, vo všetkých prípadoch je zaznamenaný malý počet dozrievajúcich a zrelých folikulov vo vaječníku. Často sa pozoruje atrofia vaječníkov, prítomnosť hľuzovitých, deformovaných a atrofovaných folikulov v nich, naplnených hmotou zrazenej konzistencie šedo-žltej alebo zelenkavej farby. V kapsule spojivového tkaniva sú folikuly s hyperémiou alebo krvácaním. Vajcovod postihnutých nosníc je spravidla skrátený, jeho stena je stenčená, v niektorých prípadoch s ložiskami hyperémie. Berúc do úvahy lokalizáciu procesu a etiológiu ochorenia, niektorí autori navrhujú nazvať to "adenovírusová salpingitída".
V mnohých prípadoch sa pri pitve zaznamená zmena pečene, ktorá sa zväčšuje, je edematózna, má ochabnutú konzistenciu a žltkasto-ílovú farbu. Nastáva zmena v žlčníku, ktorý je zväčšený, naplnený žlčou vodnatej konzistencie, svetlozelenej farby. Hypertrofovaná pečeň a narušenie normálnej funkcie žlčníka vedú k celkovým poruchám trávenia, ktoré sa prejavujú ochabnutosťou a nehybnosťou čreva, naplneného penivou zelenkastou farbou a vodnatou konzistenciou nestráveného jedla.
histologické zmeny. Histologické vyšetrenie orgánov a tkanív postihnutého vtáka odhalí hlavné zmeny, najmä v orgánoch reprodukčného traktu, ako aj v pečeni.
Vo vaječníkoch sa teda zaznamenávajú lymfoidne-histiocytické a mononukleárne proliferácie, hyperémia, dystrofické a v neskorších štádiách ochorenia nekrotické zmeny v epiteliálnej vrstve jednotlivých folikulov. V bielkovinovej časti vajcovodu sa nachádzajú aj ložiská mononukleárnej lymfoidnej infiltrácie, ktorá sa tvorí perivaskulárne v prepážke spojivového tkaniva slizničných záhybov a zasahuje až do jeho žľazového tkaniva. V maternici dochádza k slizničnému edému a fokálnym lymfoidno-hystiocytárnym proliferáciám. V pečeni sa zistí hyperémia, prítomnosť perivaskulárnych proliferácií, dystrofické zmeny v hepatocytoch, častejšie tukovej povahy.
Imunita. Kmene vírusu ECC-76 spôsobujú u infikovaného vtáka tvorbu špecifických protilátok – antihemaglutinačných, precipitačných a vírus neutralizujúcich – na 7. – 14. deň po infekcii.
Diagnostika. Diagnóza ECD-76 je stanovená na základe epidemiologických, klinických, patoanatomických údajov a výsledkov. laboratórny výskum.
Pre stanovenie predbežnej diagnózy je dôležité vyhodnotenie grafov produktivity hydinových vajec. Keďže vírus EDS-76 vyvoláva pokles produkcie vajec o 15-30% u vtákov vo veku 200-240 dní, pokles produktivity u nosníc v iných obdobiach, najmä po 300 dňoch veku, je príčinou iných faktorov. Nemalý význam pri stanovení diagnózy má posúdenie kvality vajec – ich tvaru, farby a kvality škrupiny, kvality bielkovín.
Pri stanovení diagnózy EDS-76 sú rozhodujúce laboratórne metódy.
1. Detekcia špecifických protilátok v krvnom sére chorých a podozrivých nosníc v teste oneskorenia hemaglutinácie (HRGA) a pomocou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay).
Na účely štúdie sa odoberajú párové krvné séra od veku 160-180 dní, v každom prípade je to začiatok poklesu produkcie vajec. V prípade detekcie antihemaglutinačných protilátok v titroch 1:4 a vyššie sa robí záver o perzistencii patogénu ECL-76.
2. Izolácia vírusu z patologického materiálu s jeho následnou identifikáciou v RZGA.
Izoláciu vírusu z patologického materiálu je najvhodnejšie vykonať pri vývoji 10-12 dňových kačacích embryí alebo v kultúre buniek fibroblastov, pečene, obličiek kačacích embryí.
3. Odlišná diagnóza. V diferenciálnej diagnostike EDS-76 je vylúčené zníženie produkcie vajec v dôsledku CELO vírusov, infekčnej bronchitídy, pseudomoru hydiny a porušovania podmienok ustajnenia a kŕmenia.
špecifická profylaxia. Na prevenciu EDS-76 boli vyvinuté monovalentné a súvisiace formy vakcín na báze minerálnych a olejových adjuvans a zavedené do praxe chovu hydiny. Vtáky sa očkujú raz intramuskulárne vo veku 100-110 dní.
Pridružené inaktivované vakcíny proti infekčnej bronchitíde, IBD, pseudomoru hydiny a EDS-76 sú teraz široko používané.
Syndróm padania vajíčok(Edd drapsyndrome-76, EDS-76, egg casting syndrome) je vírusové ochorenie nosníc, charakterizované prudkým znížením nosnosti, zmäknutím alebo absenciou vaječných škrupín a znížením kvality ich inkubácie.
Historický odkaz. Ochorenie patrí medzi málo prebádané adenovírusové infekcie hydiny sprevádzané syndrómom EDS-76 (syndróm znášania vajec-76). V roku 1976 sa zistilo, že kačací adenovírus EDS-76 (kmeň 127) je patogénny pre kurčatá, čo spôsobuje, že majú „syndróm nezrelého znášania vajec“ bez tvrdej škrupiny. Ochorenie je registrované v mnohých krajinách sveta.
V chovoch hydiny, ktoré sú podľa EDS-76 nepriaznivé, dochádza k poklesu úžitkovosti nosníc o 30 % - 60 %, zhoršeniu kvality vajec, zníženiu plodnosti sliepok a životaschopnosti kurčiat.
Pôvodca ochorenia— vírus kačacej genómovej DNA EDS-76 (kmeň 127), patriaci do čeľade Adenoviridae. Virióny sú sférické, s priemerom 75–80 nm. Vírus aglutinuje erytrocyty kurčiat, kačíc a husí. U chorých kurčiat sa objaví vo vajcovodoch, horných dýchacích cestách, hlienoch nosa a hltana a pečeni do 15 dní po objavení sa prvých klinických príznakov ochorenia. Rozmnožuje sa v kačacích a kuracích embryách pri infekcii v alantoickej dutine, čo spôsobuje ich smrť na 7. - 10. deň. Reprodukuje sa v primárnych kultúrach buniek obličiek a pečene kačacích embryí, fibroblastov kačacích embryí, ťažšie v kultúrach buniek pečene kurčiat a kuracích obličiek. Vytvára intranukleárne acidofilné inklúzie v epitelových bunkách svalového žalúdka, spôsobuje degeneráciu hepatocytov a vakuolizáciu cytoplazmy buniek. Vírus EDS-76 je odolný voči chloroformu, éteru, trypsínu, 2% roztoku fenolu, 50% roztoku alkoholu, ale je citlivý na formaldehyd. Zostáva aktívny pri 50 °C 3 hodiny, pri 56 °C 1 hodinu, pri 80 °C 30 minút.
Epizootológia choroby. Nosnice vo veku 25 až 35 týždňov sú choré na syndróm vypadnutia vajec. Ochorenie postihuje najmä chovné vtáky a spúšťa mäsové plemená, ktoré znášajú hnedé vajcia. Zdrojom pôvodcu ochorenia sú choré a choré kurčatá, ktoré sú nositeľmi vírusu po dlhú dobu. Potenciálnymi zdrojmi vírusu EDS-76 môžu byť domáce a divé kačice, husi a iné vodné vtáctvo. Z tela chorých kurčiat sa vírus vylučuje výkalmi, výdychom z ústnej dutiny a nosných otvorov a vajíčkami. Vírus EDS-76 sa prenáša vertikálne cez infikované vajíčka, aj keď sa akceptuje možnosť horizontálneho šírenia patogénu prostredníctvom infikovaného samčieho trusu a spermy.
Faktormi prenosu vírusu môžu byť hydinárne, vaječné škrupiny, krmivo, napájačky, pomôcky na starostlivosť o vtáky, oblečenie a obuv. servisný personál kontaminované sekrétmi z infikovaných kurčiat. V tele zdravých kurčiat môže vírus preniknúť transovariálne, alimentárne, aerogénne, kontaktne. Choroba u infikovaných kurčiat sa vyskytuje v období ovipozície, dovtedy sa nepozorujú žiadne klinické príznaky infekcie.
Patogenéza nebola študovaná. Zistilo sa, že vírus EDS-76 sa množí v epiteliálnych bunkách vajcovodu, čím narušuje ich funkciu tvorby vysokokvalitného obalu.
Klinické príznaky a priebeh ochorenia. Hlavným klinickým príznakom ochorenia je prudký (30 – 60 %) pokles produkcie vajec kurčiat v priebehu 6 – 7 týždňov. Zároveň v prvých 4-5 týždňoch výkon klesá a v ďalších 2-3 týždňoch sa pozoruje jeho postupné zotavenie. Počas prvých 2 – 3 týždňov choroby znášajú sliepky vajcia so slabými, zdeformovanými a depigmentovanými škrupinami, s krúžkami a pruhmi pozdĺž rovníka alebo úplne bez škrupiny. Výrazne sa zhoršuje aj kvalita vajec, ich bielkovina vodnatá a zakaluje. Inkubačné vlastnosti vajec sú výrazne znížené, kurčatá, ktoré sa vyliahnu, nie sú životaschopné, krehké, väčšina z nich uhynie počas prvého dňa. Choré kurčatá sa stávajú krehkými a neaktívnymi, strácajú chuť do jedla, chudnú, narúša sa ich kladenie vajíčok a niekedy sa objaví hnačka. Po 2 - 3 týždňoch sa kurčatá začnú zotavovať, postupne priberajú na váhe a obnovujú produkciu vajec, ale nikdy nedosiahnu počiatočnú úroveň.
patologické zmeny. Väčšinou chýba alebo je slabo vyjadrený. Niekedy sú príznaky katarálnej enteritídy, opuchu a infiltrácie vajcovodov.
Diagnóza stanovené na základe epidemiologických údajov, klinických príznakov ochorenia a najmä výsledkov laboratórnych testov.
Laboratórna diagnostika. Zabezpečuje izoláciu vírusu na 12-13-dňových kačacích embryách ich infekciou v alantoickej dutine, ako aj v primárnych bunkových kultúrach fibroblastov kačacích embryí, indikáciu a identifikáciu izolovaného vírusu na RIF (špecifická luminiscencia kultúr fibroblastových buniek sa pozoruje už 14 hodín po ich infekcii), pre RN (na kačacích embryách a primárnych kultúrach buniek kačacích fibroblastov), pre RGA, ktorý sa považuje za najcitlivejší v porovnaní s inými diagnostickými testami. Retrospektívna diagnostika sa vykonáva s krvnými sérami chorých kurčiat vo veku 160 – 180 dní v 5. – 7. deň choroby a znova po 15 – 21 dňoch. Rast titrov anti-hemaglutinínu v druhej vzorke indikuje cirkuláciu vírusu medzi vtákmi. RZGA sa odporúča na hromadné sérologické prieskumy. Súčasne sa spúšťač považuje za nosič vírusu EDS-76, v krvi ktorého sa protilátky nachádzajú v titroch 1: 4 - 1: 32.
Do laboratória sa posielajú v termoske s ľadom: od klinicky chorých kurčiat (od 1. do 7. dňa choroby) výtery z nosohltanu, výtery zo spojoviek, výkaly (do 10. dňa choroby); z mŕtvych kurčiat - nosná priehradka, pľúca, priedušnica, pečeň, črevá, lymfatické uzliny. Na retrospektívnu diagnostiku sa posielajú párové krvné séra, ktoré sa odoberajú na 5. – 7. deň ochorenia a následne po 15 – 21 dňoch.
Odlišná diagnóza. Zabezpečuje potrebu vylúčenia pseudomoru hydiny, kokcidiózy a otravy. Na tento účel sa vykonávajú vhodné virologické, helmintologické a toxikologické štúdie.
Imunita. U sliepok, ktoré ochoreli na syndróm vypadnutia vajec, sa vytvára dlhodobá imunita. Na špecifickú prevenciu ochorenia boli navrhnuté inaktivované a živé vakcíny založené na adenovíruse EDS-76 z kmeňov 127 a BC-14.
Liečba nebola vyvinutá.
Preventívne a kontrolné opatrenia. Sú založené na prísnom vykonávaní veterinárnych a hygienických pravidiel, aby sa zabránilo zavlečeniu patogénu zvonku. Na inkubáciu sa používajú vajcia len od sliepok starších ako 40 týždňov, ktoré sú predbežne kontrolované RZGA. Opätovné vyšetrenie sa vykoná po 2 - 3 týždňoch. Sérologicky pozitívne kurčatá so stúpajúcimi titrami hemaglutinínu sa zabíjajú. Ich prítomnosť naznačuje cirkuláciu vírusu v ekonomike.
V prípade choroby sú okamžite zavedené karanténne obmedzenia. Celá nepriaznivá skupina vtákov je porazená. Vykonajte mechanické čistenie a dvojitú dezinfekciu priestorov a miest pobytu infikovaných vtákov, preventívnu prestávku v inkubácii vajec po dobu 2 mesiacov. Vykonajte klinické a sérologické vyšetrenie všetkej hydiny dostupnej na farme. Pozitívne reagujúce kurčatá sa zabíjajú na mäso. Dospelé sliepky sú očkované inaktivovanou vakcínou pred ovipozíciou.
Na dezinfekciu sa používa 2% roztok formaldehydu, 3% roztok hydroxidu sodného pri expozícii 1,5 hodiny.
Odkedy bol prvýkrát popísaný v roku 1976, je syndróm poklesu vajíčok (ESD-76) hlavnou príčinou poklesu produkcie vajec na celom svete. Za vznik tohto syndrómu je zodpovedný adenovírus skupiny III. Ku kurčatám sa zrejme dostane vakcínou.
Syndróm padania vajec EDS-76 charakterizované skutočnosťou, že zdravé vtáky znášajú vajcia s tenkou škrupinou alebo vôbec bez škrupiny. Horizontálny prenos vírusu u klietkovej hydiny je pomalý, kým vonku je oveľa rýchlejší. Prvým znakom je strata pigmentácie vajíčka, po ktorej rýchlo nasleduje objavenie sa mäkkých vajíčok.Ak sa chybné vajíčka vyhodia, ostatné sa bez problémov oplodnia a inkubujú. Pokles produkcie vajec môže byť náhly alebo predĺžený. Spravidla trvá 4-10 týždňov a produkcia vajec sa zníži asi o 40%. Okrem neaktívnych vaječníkov a atrofie vajcovodov sa nenašli žiadne iné lézie. Replikácia vírusu v epitelových bunkách vajcovodu vedie k závažným zápalovým a degeneratívnym zmenám na sliznici. Výskyt vajec s porušením kvality a zníženie produkcie vajec naznačuje výskyt vírusu na farme SSYA 76 . Diagnóza je potvrdená sérologickým testom a je potvrdená po izolácii a identifikácii vírusu. V mnohých prípadoch sa špecifické protilátky v infikovaných kŕdľoch nezistia, kým sa produkcia vajec nepriblíži úrovni medzi 50 % a vrcholom produkcie. Ak vírus syndrómu poklesu vajíčok sa objavili na farmách zaoberajúcich sa chov vtákov , to sa najčastejšie prejavuje v neschopnosti dosiahnuť ciele produkcia, zatiaľ čo zmeny vaječných škrupín sú menej zrejmé, aj keď sú prítomné. Odkedy bol syndróm prvýkrát opísaný, ukázalo sa, že sporadické prepuknutia SSYA-76 sa vyskytujú, keď sa vtáky nakazia priamym alebo nepriamym kontaktom s infikovaným voľne žijúcim alebo domácim vodným vtáctvom.
Syndróm kvapky vajca-76 (ESD-76)- vírusové ochorenie charakterizované poškodením reprodukčného systému kurčiat, znížením produktivity vajec a zhoršením kvality vajec.
Škody spôsobené EDS-76 sú spôsobené nedostatkom v priemere až 10-30 vajec na jednu nosnicu (v priemere je vyradených až 50 vajec od chovných sliepok), znáškou vajec bez škrupiny, vajec s krvným krúžkom, zníženie liahnivosti kurčiat a ich nízka životaschopnosť do dvoch týždňov veku.
Etiológia. Pôvodcom ochorenia je vírus z rodu Aviadenovirus, čeľade Adenoviriclae, identifikovaný ako kačací adenovírus niektorými fyzikálno-chemickými a biologickými vlastnosťami. Virión má typ kubickej symetrie, chýba mu superkapsidová škrupina, má priemer 80 nm a na tvári obsahuje 6 kapsomérov. Na vrcholoch ikozaédra možno zistiť kyjovité zhrubnutia. Predpokladá sa, že sú nosičmi povrchového antigénu vírusu - hemaglutinínu. Genóm vírusu je tvorený DNA. Molekulová hmotnosť vírusu je 170-175 megadaltonov, sedimentačná konštanta je 560, plávajúca hustota v gradiente chloridu cézneho je 1,32-1,35 g/cm 3 . Vírus je odolný voči éteru, chloroformu a teplotným faktorom. Keď sa materiál obsahujúci vírus zahreje na 56 °C počas 30 minút, infekčná aktivita sa zníži nie o viac ako 50 %. Zahriatie na 70°C spôsobuje stratu infekčnej a hemaglutinačnej aktivity po 10 minútach. V zmrazenom stave pri -25°C zostáva vírus životaschopný viac ako 3 roky. Vírus je relatívne stabilný pri pH 6,0-9,0. V 50% glycerole pri teplote -30 -50°C zostáva vírus obsiahnutý v patologickom materiáli aktívny niekoľko rokov. Vírus je dobre skladovaný v lyofilizovanom stave. Vedúcim miestom lokalizácie vírusu v tele vtákov sú orgány reprodukčného systému, ale počas obdobia latentnej infekcie môže pretrvávať v črevách a iných orgánoch. Vírus možno izolovať z vajcovodu, leukocytov
krv, horné dýchacie cesty, hlien z nosa a hltana, pečeň, obsah kloaky chorých kurčiat do 3-5 dní od objavenia sa prvých klinických príznakov ochorenia. In vnútorné orgány a tkanivách experimentálne infikovaných vtákov, vírus pretrváva až 5 týždňov. Vo výkaloch sa dá zistiť do 2 týždňov po infekcii. Antigénne varianty a typy vírusu EDS-76 neboli stanovené. U chorých kurčiat sa na 6. – 8. deň po infekcii vytvárajú sérové protilátky, ktoré majú vlastnosti neutralizujúce vírus, antihemaglutináciu a zrážanie. V dynamike tvorby protilátok sú dva vrcholy. Prvý (vrchol JgM) sa zistí 10-11 deň, druhý (vrchol JgG) - 16-18 deň po infekcii. Neutralizačné protilátky sa začínajú vytvárať na šiesty deň po infekcii, s nárastom titra až do 28. dňa. Precipitujúce protilátky sa tvoria tiež od 6. dňa po infekcii, no od 17. dňa ich titer začína klesať. Kurčatá od séropozitívnych rodičov do veku 4 týždňov obsahujú materské protilátky s polčasom rozpadu 3 dni. Nemôžu však neustále chrániť vtáka pred adenovírusmi, ktoré sa prenášajú vertikálne na potomstvo a začínajú sa prejavovať v stresových situáciách, a to aj počas obdobia dosiahnutia vrcholu ovipozície. Vírus EDS-76 nepatrí do žiadneho z 12 v súčasnosti známych sérotypov vtáčích adenovírusov a na rozdiel od nich je schopný aglutinovať erytrocyty kurčiat, kačíc, moriek a husí.
epizootológia. Na ochorenie sú vnímavé nosnice všetkých plemien s maximálnym prejavom ochorenia v období maximálnej produkcie vajec (180-140 dní), ochorenie sa však môže vyskytnúť v ktoromkoľvek období produkčného cyklu. Na chorobu sú náchylnejšie kurčatá vysoko produktívnych mäsových a vajcových krížencov. Vírus EDS-76 je rozšírený medzi domácimi a divými kačicami, ako aj husami, je pre ne apatogénny a nespôsobuje klinické prejavy ochorenia. Pretrvávanie patogénu je zvyčajne spätne potvrdené prítomnosťou špecifických protilátok, ale v mnohých prípadoch je možné vírus izolovať z kačíc a husí. Po experimentálnej infekcii húsat vírusom EDS-76 je možné patogén izolovať z trusu infikovaných vtákov do 3 týždňov, čo dáva dôvod považovať husi za potenciálny zdroj infekcie. Protilátky proti vírusu EDS-76 možno zistiť v krvnom sére divých husí, volaviek, vrabcov, labutí, sov, bocianov, ale neexistujú žiadne informácie o klinickom prejave ochorenia u týchto druhov vtákov. Hlavná cesta šírenia patogénu je transovariálna. Vajcia sú obzvlášť intenzívne infikované v období virémie, ktoré sa časovo zhoduje s poklesom produkcie vajec. Prenos patogénu spermiami kohútov nie je vylúčený. Horizontálne šírenie patogénu je zaznamenané v počiatočnom štádiu ochorenia a je najvýraznejšie, keď je hydina držaná na podlahe. V tomto období sa vírus intenzívne vylučuje stolicou, hltanovým a tracheálnym hlienom, kontaminuje krmivo, životné prostredie, čo prispieva k opätovnej infekcii stáda požieraním infikovaného krmiva a podstielky. Epizootologickým znakom ochorenia u niektorých krížencov kurčiat je podľa EDS-76 nepriaznivý stupeň prejavu infekcie v rôznych hydinárňach farmy. Okrem toho sa vyskytli prípady, keď v tej istej hydinárni spolu s postihnutými vtákmi zostal značný počet nosníc, ktoré si zachovali normálnu produkciu vajec počas celého produktívneho obdobia.
Klinické príznaky. Neexistujú žiadne charakteristické príznaky choroby. Možné sú hnačky, určitý útlak, znížený príjem krmiva. Na vrchole ochorenia - oslabené dýchanie, tekutá zelenkavá podstielka, pozorovaná v priebehu 1-2 týždňov. V neskorších štádiách ochorenia dochádza k cyanóze náušníc a hrebeňa. Úmrtnosť vtákov s EDS-76, dokonca aj na vrchole akútnej formy ochorenia, je zanedbateľná.
V zriedkavých prípadoch medzi dospelými vrstvami môže dosiahnuť 3-5%, najmä v dôsledku žĺtkovej peritonitídy a kloacitídy. Hlavným príznakom choroby je zníženie produktivity vajec o 15-30% av niektorých stádach o 50% alebo viac. Zníženie produkcie vajec prebieha určitým spôsobom: celé obdobie poklesu je 6-7 týždňov, z ktorých 4-5 týždňov pripadá priamo na pokles a 2-3 nasledujúce týždne - na obdobie zotavenia. Pri obsahu klietok sa produktivita kurčiat takmer úplne obnoví alebo zostáva o 1 až 3 % nižšia ako norma a pri obsahu podlahy je spravidla o 7 až 10 % nižšia ako produkcia vajec, ktorá predchádzala poklesu. V procese zotavovania sa z EDS-76 vták nesie vajcia bez škrupiny („odlievanie vajíčok“) alebo depigmentované vajcia s tenkou škrupinou, s prstencovými alebo pruhovanými, drsnými útvarmi na povrchu počas 6-8 týždňov. Výrazne sa zvyšuje počet „mramorových“ vajec, zvyšuje sa percento bojovných a vrúbkovaných vajec. Zhoršujú sa inkubačné vlastnosti vajec, znižuje sa ich plodnosť, liahnivosť a životaschopnosť kurčiat počas prvých dvoch týždňov života. Zmena kvality škrupiny a takzvaného „tučného vajca“ je najčastejšia u vrstiev farebných krížencov a u brojlerov. U bielych krížencov sa bielkovinová časť vajíčka mení najmä vo forme jeho lokálneho skvapalnenia.
Patomorfológia. Patologické a anatomické zmeny vo vnútorných orgánoch vtákov v EDS-76 sú extrémne slabo vyjadrené. O akútna forma v niektorých prípadoch sú vo vaječníku zaznamenané zmeny atrofickej povahy, zníženie počtu a veľkosti folikulov, hyperémia alebo krvácanie v kapsule spojivového tkaniva folikulov, ich deformácia a degenerácia. Existujú oblasti vaječníkov s úplne degenerovanými folikulmi a premenené na nekrotickú hmotu žltohnedej farby. Možno vzhľad cýst. Vajcovod je zvyčajne kratší a tenší ako u zdravých vtákov. Prejavuje sa hyperémia a petechiálne krvácania v sliznici, jej opuch, najvýraznejšie v maternicovej časti vajcovodu, menej často v pošvovej a bielkovinovej časti. V niektorých prípadoch je zaznamenaná žĺtková peritonitída. Pečeň je niekedy zväčšená, má ochabnutú štruktúru a žltkastú farbu. Súčasne dochádza k zvýšeniu žlčníka, jeho pretečeniu vodnatou žlčou, svetlozelenej farby. Informácie o porážke lymfoidných orgánov vtákov vírusom EDS-76 sú rozporuplné.
Diagnostika. Diagnóza sa robí na základe epizootologických, klinických, patoanatomických údajov a laboratórnych výsledkov, ktoré zahŕňajú: izoláciu vírusu v kačacích embryách, kultiváciu buniek fibroblastov kačacieho embrya alebo kultiváciu pečeňového tkaniva kačacích alebo kuracích embryí s následnou identifikáciou patogén v RHA, RZHA, MFA, ELISA, biotest na kurčatách; stanovenie špecifických protilátok v krvnom sére alebo vaječných žĺtkoch nosníc v RZGA alebo ELISA; histologické vyšetrenie orgánov reprodukčného traktu.
Na virologické vyšetrenie sa používajú vzorky vaječníka s folikulmi, vajcovodu, konečníka s obsahom, kloakálne výtery, krv s antikoagulantom (heparín alebo 1% roztok citrátu sodného). Odber patologického materiálu sa vykonáva v prvých 3 – 5 dňoch od prepuknutia choroby a najneskôr do 2 hodín po klinickej smrti alebo porážke vtáka. Kúsky orgánov s veľkosťou 1-1,5 cm sa umiestnia do skúmavky alebo liekovky s 5,0-8,0 ml fyziologického roztoku alebo Hankovho roztoku obsahujúceho 1000 IU penicilínu, 1000 μg streptomycínu a 50 nystatínu na 1 ml. Ako stabilizátor je vhodné do roztoku pridať 0,5 – 1 % hovädzieho sérového albumínu alebo 0,5 % želatíny, aby sa zabránilo inaktivácii vírusu. Plášťové tampóny sa odoberú sterilným vatovým tampónom a ponoria sa do fyziologického roztoku obsahujúceho vyššie uvedené prísady. Krv sa zvyčajne odoberá z brachiálnej (axilárnej) žily, jugulárnej žily alebo punkciou zo srdca. Pre následné štúdie sa frakcia leukocytov izoluje z celej krvi. Zároveň sa každému vtákovi pred kŕmením odoberie 10-15 ml krvi, pridá sa k nej niekoľko kvapiek heparínu alebo citrátu sodného, odstredí sa pri 1000 ot./min. 30 minút a potom sa srsť leukocytov odsaje pipetou. Výsledné leukocyty sa prenesú do sterilného fyziologického roztoku, kde sa pridá 100 IU penicilínu, 100 μg streptomycínu na 1 ml roztoku a podrobia sa niekoľkým cyklom zmrazovania a rozmrazovania, aby sa bunky zničili. Na izoláciu vírusu sa používa suspenzia rozpadnutých leukocytov. Pred začatím postupu izolácie vírusu by sa mal patologický materiál zbaviť konzervačnej látky, čo sa dosiahne opakovaným premytím vzoriek čerstvými dávkami sterilného fyziologického roztoku s obsahom chloridu sodného 0,15 mol/l a pH 7,0-7,2. Potom sa kúsky vajcovodu alebo čreva s obsahom rozdrvia a rozomelú v mažiari so sterilným kremenným sklom alebo v homogenizátore. Z rozdrveného materiálu sa pripraví 10% suspenzia vo fosfátovom pufri a odstredí sa pri 1500-2000 ot./min. do 30 min. Supernatant sa odsaje pipetou, prenesie sa do sterilných fľaštičiek a pridá sa 200 jednotiek penicilínu, 100 ug streptomycínu a 20 jednotiek nystatínu na 1 ml. Expozícia antibiotikami je 45-60 minút pri izbovej teplote. Aby sa kontrolovala sterilita získaného materiálu, výsev sa uskutočňuje na BCH, MPA, Kitt-Tarozziho médium a Sabouraudovo médium, po čom nasleduje inkubácia plodín počas 10 dní pri teplote 37 °C (a Sabouraudovo médium pri pri teplote 20-22°C).
Na sérologické testovanie sa krvné sérum posiela od vtákov vo veku 1-120, 160-180, 220-140, 300 dní a od vtákov, ktoré sú mimo prevádzky podľa veku, ako aj od kurčiat s klinickými príznakmi ochorenia (20- 15 vzoriek z každej skupiny). Vzorky krvi v objeme 3,0-4,0 ml sa odoberú do oddelených skúmaviek, vopred sa navlhčia sterilným fyziologickým roztokom a potom sa umiestnia do termostatu pri teplote 37 °C na 20-30 minút. Výsledná zrazenina sa zakrúžkuje kovovou ihlou alebo sklenenou tyčinkou a uchováva sa v chladničke pri teplote 4-6 °C najmenej 3-4 hodiny. Usadené sérum sa naleje do čistých očíslovaných skúmaviek a utesní sa gumovými zátkami. Pred použitím v práci sa sérum zahrieva vo vodnom kúpeli pri teplote 56°C počas 30 minút. na inaktiváciu termolabilných inhibítorov.
Pri odosielaní vajíčok na výskum od podozrivých vtákov je vhodné vybrať neštandardné vajcia (odvápnené, depigmentované). Na prípravu extraktov odoberte 1,5 ml žĺtka a suspendujte ho v skúmavke so 6,0 ml fyziologického roztoku s pH 7,2-7,4. Potom sa do skúmaviek, uzavretých gumovými zátkami, pridajú 2,0 ml dichlóretylénu (chloroform) a 1,0 ml éteru, zmes sa intenzívne mieša trepaním, zahrieva sa 1 hodinu pri teplote 37 °C, občas sa pretrepe a odstredí sa 15 minút. pri 2000 ot./min. Transparentný, mierne opaleskujúci supernatant získaný v skúmavkách je žĺtkový extrakt v počiatočnom zriedení 1:5, ktorý sa používa ako testovací materiál.
Na izoláciu vírusu sa používajú kačacie embryá s 10-12-dňovou inkubáciou, ktoré neobsahujú protilátky proti vírusu EDS-76. Pred infekciou sa embryá ovoskopujú a vyberú sa vhodné na prácu, mobilné, s dobre vyvinutým cievnym systémom. Na infekciu v škrupine po jej dezinfekcii sa vyrazia dva otvory: jeden v strede pugi, druhý na bočnom povrchu vajíčka 2-3 mm pod okrajom pugi vo vopred označenom avaskulárnom priestore. Bočným otvorom do alantoidnej dutiny sa do každého embrya vstrekne pripravená suspenzia testovaného materiálu v objeme 0,2 ml. Zároveň je s každou vzorkou materiálu infikovaných najmenej 4-5 embryí. Po infekcii sa diera v škrupine vyplní parafínom - spočiatku bočná, potom vrchná. Infikované a kontrolné embryá sa inkubujú pri 37 °C počas 96-120 hodín. V procese inkubácie sa embryá ovoskopujú raz denne po 24 hodinách. Embryá, ktoré odumreli v nasledujúcich obdobiach a zostali nažive šiesty deň po infekcii, sa ochladia na teplotu 4 až 6 °C počas 13 až 18 hodín a otvoria sa. Z každého otvoreného embrya sa odoberie extraembryonálna tekutina, pridajú sa antibiotiká v množstve 200 IU penicilínu, 200 μg streptomycínu a 20 IU nystatínu na 1 ml a po kontakte sa uskutoční druhá pasáž testovaného materiálu. na vyvíjajúcich sa embryách v rovnakom poradí. Potom vykonajte tretí prechod. Extraembryonálna tekutina odobratá z embryí z tretej pasáže sa skúma v RGA a RZGA na indikáciu a identifikáciu hemaglutinujúceho ECC-76 vírusu. Intenzívna akumulácia vírusového hemaglutinínu v orgánoch a tkanivách embryí začína 2-3 dni po infekcii. Do 5-6 dní dosiahne titer vírusu svoje maximálne hodnoty, v niektorých prípadoch 15-16 log HAU/02 ml. V tomto prípade sa smrť embryí v dôsledku pôsobenia vírusu vyskytuje pomerne zriedkavo (1-2%). Vírus možno kultivovať na vyvíjajúcich sa kuracích embryách, ale jeho akumulácia je menej intenzívna, bez ohľadu na počet adaptačných pasáží. Okrem toho je reprodukcia vírusu v infikovaných kačacích embryách počas následných pasáží riadená povahou vyvinutých patologických zmien v orgánoch a tkanivách. Vyskytuje sa zaostávanie embryí v raste a vývoji, hyperémia a opuch kože v oblasti hlavy a krku, petechiálne krvácania na koži a podkoží, zakalenie CAO, mierne zvýšenie pečene a obličiek.
Vírus sa tiež kultivuje na rôznych bunkových kultúrach a suspenziách explantátov orgánov a tkanív vtákov. Častejšie sa používajú kultúry fibroblastov kačacích embryí a kultúry buniek pečene a obličiek kuracích embryí. Použije sa 24-48-hodinová kultúra primárne trypsinizovaných kačacích fibroblastov, pripravená konvenčným spôsobom a pestovaná v sklenených fľaštičkách (matracech) alebo skúmavkách. Testovaný materiál sa dodatočne zriedi fyziologickým roztokom na 10-1 a 10-3 a potom sa 3 fľaštičky s monovrstvou infikujú každým zriedením materiálu v objeme 3 ml. Infikované a kontrolné liekovky sa inkubujú pri 37-38 °C. Aby sa zohľadnil cytopatický účinok, skúmavky sa prezerajú pod mikroskopom s malým zväčšením každých 24 hodín počas 7 dní.
Prvé cytopatické zmeny sa objavujú 36-48 hodín po infekcii kultúr a sú charakterizované zhrubnutím bunkových membrán, zväčšením a zaoblením samotných buniek. 96 hodín po infekcii je monovrstva zničená, v kultivačnom médiu pláva veľa mŕtvych buniek, pričom niektoré z nich sú spojené dlhými procesmi. Keď sú kultúry zafarbené hematoxylínom a eozínom, sú v nich viditeľné veľké granulárne bazofilné intranukleárne inklúzie, ktoré sa spájajú do neformovaných akumulácií bazofilnej hmoty. Nachádza sa veľké množstvo obrovských viacjadrových buniek, ktoré obsahujú 8-10 čiastočne zničených jadier. Posledne menované tvoria vakuoly so zvyškami jadrovej látky. V cytoplazme jednotlivých buniek sa pozoruje tvorba vakuol a eozinofilná zrnitosť. Vírus ECC-76 sa hromadí v kultivačnej tekutine, a preto, aby sa v ňom získala vyššia koncentrácia vírusových častíc, infikované bunkové kultúry sa v posledných štádiách akumulácie vírusu podrobia trom po sebe idúcim zmrazením a rozmrazeniu, pričom sa výsledná suspenzia použije v ďalšie štúdie pri indikovaní hemaglutinačného vírusu ECC-76.
Na indikáciu a identifikáciu vírusu sa najčastejšie používajú RHA, RZGA, ako aj MFA, ELISA a PCR.
Hlavnou metódou na indikovanie vírusu vo vyvíjajúcich sa embryách alebo bunkových kultúrach je detekcia vírusového hemaglutinínu v RHA s 1 % suspenziou kuracích erytrocytov v extraembryonálnej alebo kultivačnej tekutine. Najprv sa na sklo alebo do Petriho misiek umiestni približná RGA s 1 % suspenziou erytrocytov vo fyziologickom roztoku. Na dobre umytý a odmastený sklenený povrch sa nanesie kvapka suspenzie erytrocytov a kvapka materiálu obsahujúceho vírus, premieša sa a pozoruje sa výskyt vločiek aglutinovaných erytrocytov. Pozitívna RGA sa objaví v priebehu 3-5 minút a je charakterizovaná tvorbou vločiek aglutinovaných červených krviniek. Výsledky pozitívneho RGA v predbežnom experimente sú potvrdené nastavením podrobnej (klasickej) reakcie. Súčasne sa do každej skúmavky alebo jamky na platni pridá 0,2 ml sterilného fyziologického roztoku, potom sa do prvej skúmavky alebo jamky pridá 0,2 ml testovanej extraembryonálnej alebo kultivačnej tekutiny, premiešanej pipetou. Preneste 0,2 ml tekutiny do ďalšej skúmavky alebo jamky. Takto sa pripravia postupné dvojnásobné riedenia testovaného materiálu od 1:2 do 1:4096 alebo viac. Z poslednej skúmavky alebo jamky tablety sa odoberie 0,2 ml materiálu do dezinfekčného roztoku. Potom sa do každej skúmavky alebo jamky s riedením pridá 0,2 ml 1 % suspenzie erytrocytov, stojan so skúmavkami alebo platnička sa pretrepe, aby sa zložky rovnomerne premiešali, a nechá sa pri teplote 22-24 °C. Reakcia je sprevádzaná kontrolou erytrocytov na autoaglutináciu. K tomu sa pridá 0,2 ml 1% suspenzie erytrocytov do 0,2 ml fyziologického roztoku (častejšie sa používajú 4 skúmavky alebo doštičkové jamky), premieša sa a nechá sa pri uvedenej teplote. Aglutinácia erytrocytov v tomto prípade by nemala byť. Po 30 minútach vyhodnoťte výsledky RGA bodový systém v krížoch:
Štyri kríže (++++) - aglutinované erytrocyty sa usadzujú na dne jamky vo forme obráteného dáždnika so zubatými zubatými okrajmi.
Tri krížiky (+++) - dáždnik aglutinovaných erytrocytov je menší a v jeho strede je disk z neaglutinovaných erytrocytov.
Dva krížiky (++) - dáždnik je dobre definovaný, ale centrálny disk neaglutinovaných erytrocytov je zväčšený a jasne odlíšiteľný, pri naklonení platničky netečie.
Jeden kríž (+) - mierna aglutinácia erytrocytov pozdĺž okrajov disku, ktorá pri naklonení platničky odteká.
Negatívna reakcia (-) - nedochádza k aglutinácii červených krviniek.
Pre hemaglutinačný titer vírusu alebo jednu hemaglutinačnú jednotku (1 HAU) sa berie najvyššie riedenie vírusu, pri ktorom sa pozoruje aglutinácia erytrocytov pri najmenej dvoch kríženiach. Napríklad: jasne vyjadrená hemaglutinácia sa získala pri zriedení 1:512, t.j. 0,2 ml izolovaného vírusu pri zriedení 1:512 obsahuje 1 HAU. Je prijateľné nastaviť RGA (rovnako ako RZGA) v tabletách na biochemické štúdie so zavedením všetkých zložiek v objeme 0,05 ml.
Reakcia oneskorenia (inhibícia) hemaglutinácie (RHGA) je sérologická metóda na identifikáciu novo izolovaných kmeňov vírusov s hemaglutinačným účinkom a stanovenie ich antigénneho vzťahu s referenčnými kmeňmi. Častejšie sa však používa na retrospektívnu diagnostiku, na stanovenie intenzity postinfekčnej a postvakcinačnej imunity kvantitatívnym stanovením špecifických protilátok v krvnom sére kurčiat a dospelých vtákov. Spôsob zastavenia RGA na účely identifikácie izolovaného vírusu EDS-76 a sérologická diagnostika ochorenia sa mierne líšia. Na identifikáciu patogénu sa používa známe pozitívne sérum obsahujúce antihemaglutiníny na vírus ECC-76 v známom titri. Pri vykonávaní diagnostických štúdií zameraných na identifikáciu špecifických protilátok sa používa štandardný inaktivovaný antigén vírusu ECC-76.
Na identifikáciu izolovaného vírusu sa najprv stanoví titer jeho hemaglutinačnej aktivity v RHA, vyberie sa pracovné riedenie vírusu rovné 4 HAU (metóda je uvedená nižšie), potom sa pridá 0,2 ml ECC pozitívneho na vírus. do 4 HAU vírusu v 0,2 ml fyziologického roztoku 76 séra v riedení, ktoré zjavne neutralizuje množstvo prijatého vírusu. Po kontakte vírusu so sérom počas 30 minút. pri teplote miestnosti sa pridá 0,4 ml 1% suspenzie erytrocytov a po 30 minútach sa vezme do úvahy výsledok. Hemaglutinačné oneskorenie indikuje homológiu typu vírusu a séra, t.j. bude potvrdením, že vírus EDS-76 bol izolovaný. Neprítomnosť oneskorenia hemaglutinácie naznačuje, že bol izolovaný hemaglutinačný patogén, ktorý nie je vírusom ECC-76.
Reakcia oneskorenia hemaglutinácie na sérologickú diagnostiku EDS-76 sa uskutočňuje v dvoch fázach.
V prvej fáze sa štandardný inaktivovaný antigén vírusu ECC-76 titruje hemaglutinačnou aktivitou v RHA, pripraví sa a kontroluje sa jeho pracovné riedenie. V druhej fáze je položený samotný RZGA.
V RZGA sa používa pracovné riedenie antigénu, ktoré sa rovná 4 HAU. Na prípravu pracovného riedenia antigénu sa štandardný inaktivovaný antigén vírusu ECC-76 titruje v RGA. V dôsledku toho sa aktivita antigénu nastaví na 1 GAU, potom sa pripraví pracovné riedenie 4 GAU. Na tento účel sa antigén so známou hemaglutinačnou aktivitou zriedi sterilným fyziologickým roztokom toľkokrát, koľkokrát sa získa vydelením 4 číslami zodpovedajúcimi jeho hemaglutinačnému titru. Takže v našom príklade je hemaglutinačný titer antigénu (1 HAU), stanovený v RHA, 1:512. Aby sa získalo pracovné riedenie antigénu, musí sa zriediť 128-krát - (512:4 = 128). Preto na prípravu pracovného riedenia antigénu s aktivitou v RGA 1:512, obsahujúceho 4 HAU v 0,2 ml, je potrebné odobrať 1 ml pôvodného antigénu a pridať 127 ml fyziologického roztoku.
Pred nastavením hlavnej reakcie sa skontroluje správnosť zvolenej pracovnej dávky antigénu. Za týmto účelom sa do piatich otvorov plexisklovej platne pridá 0,2 ml sterilného fyziologického roztoku, pričom sa začína od druhého. Potom sa do prvej a druhej jamky pridá 0,2 ml antigénu v pracovnom riedení. Z druhej jamky sa pipetou odoberie 0,2 ml tekutiny a prenesie sa do tretej atď., čím sa pripraví dvojnásobné riedenie antigénu. Potom sa do každej jamky pridá 0,2 ml 1 % suspenzie kuracích erytrocytov, premieša sa jemným potrasením doštičky a nechá sa 30 minút pri teplote miestnosti. O správna voľba pracovná dávka antigénu (4 HAU) v 1, 2 a 3 jamkách obsahujúcich 4, 2 a 1 HAU, treba pozorovať intenzívnu aglutináciu erytrocytov. Vo štvrtej a piatej jamke by aglutinácia nemala byť väčšia ako jeden kríž. Ak sú výsledky kontroly odlišné, je potrebné štandardný antigén znovu titrovať a znovu pripraviť jeho pracovné riedenie.
Reakcia oneskorenia hemaglutinácie sa umiestni do platní z plexiskla alebo skúmaviek. Súčasne sa do každej jamky doštičky alebo skúmavky pridá 0,2 ml fyziologického roztoku, potom sa do prvej jamky (skúmavky) každého radu pridá 0,2 ml testovacieho séra a dvojnásobné sériové riedenie od 1:2 do 1:4096 sa pripravia pomocou pipety. Potom sa do všetkých jamiek (skúmavok) pridá 0,2 ml antigénu v pracovnom riedení, doštičky (stojany) sa pretrepávajú, kým sa zložky rovnomerne nepremiešajú a nechajú sa 30 minút pri teplote miestnosti, aby sa antigén dostal do kontaktu so sérovými protilátkami. Po stanovenom čase sa do každej jamky doštičky (skúmavky) pridá 0,4 ml jednopercentnej suspenzie kuracích erytrocytov, zložky sa zmiešajú a nechajú sa 30 minút pri teplote miestnosti. Ak študované krvné séra obsahujú špecifické antihemaglutiníny na vírus ECC-76, potom sa RHA považuje za pozitívnu a prejaví sa absenciou hemaglutinácie v určitých jamkách v závislosti od titra protilátok. Sérový titer je jeho najvyšším riedením, pri ktorom nedochádza k aglutinácii erytrocytov. Nastavenie RZGA by malo byť sprevádzané ovládacími prvkami:
0,2 ml 1% suspenzie kuracích erytrocytov + 0,2 ml fyziologického roztoku (nemalo by dôjsť k aglutinácii erytrocytov);
0,2 ml špecifického krvného séra pozitívneho na vírus EDS-76 + 0,2 ml antigénu v pracovnom riedení + 0,4 ml 1% suspenzie kuracích erytrocytov (hemaglutinácia by nemala byť);
0,2 ml normálneho krvného séra kurčiat negatívneho na vírus EDS-76 + 0,2 ml antigénu v pracovnom riedení + 0,4 ml 1 % suspenzie erytrocytov kurčiat (mala by byť jasne vyjadrená hemaglutinácia);
0,2 ml študovaného krvného séra (vaječný extrakt) + 0,2 ml 10% suspenzie kuracích erytrocytov (hemaglutinácia by nemala byť).
Účtovanie RZGA by malo začať účtovaním kontrol. Len pri uspokojivých výsledkoch kontrolnej reakcie možno brať do úvahy výsledky reakcie s testovanými sérami. Diagnostický pozitívny titer antihemaglutinínov na vírus ECC-76 je titer 1:16 a vyšší. Negatívne výsledky 15-10 vzoriek krvných sér alebo extraktov vaječných žĺtkov odobratých 2-3 týždne po poklese produkcie vajec v RZGA nám umožňujú vylúčiť EDS-76 ako jednu z hlavných príčin zníženej produktivity vajec.
Diagnostické štúdie pre EDS-76 sú najspoľahlivejšie, ak vyšetrujeme párové krvné séra získané z kurčiat pred vypuknutím choroby (pokles produkcie vajec), počas a po obnovení produkcie vajec, približne odobraté od nosníc vo veku 160- 180, 200-140 dní, po 300 dňoch veku a na konci prevádzky vrstiev z dôvodu veku.
Imunofluorescenčná reakcia (metóda priamej fluorescenčnej protilátky, MFA) sa používa na identifikáciu vírusu izolovaného z kultúry vtáčích buniek alebo embryí. Farbenie prípravkov sérom značeným FITC (konjugát protilátok s fluoresceín izokyanátom) špecifickým pre vírus ECC-76 a ich štúdium v MFA sa uskutočňuje podľa všeobecne uznávanej metódy.
Keď je vírus izolovaný v infikovaných vyvíjajúcich sa vtáčích embryách, na identifikáciu patogénu v MFA sa použijú prípravky z chorioalantoickej membrány. Detekcia špecifických granulárnych intranukleárnych inklúzií antigénu vírusu ECC-76 v infikovaných bunkách indikuje identifikáciu izolovaného patogénu.
Metóda enzýmovej imunoanalýzy (ELISA) je založená na detekcii komplexu antigén-protilátka v dôsledku interakcie špecifických protilátok s protidruhovým peroxidázovým konjugátom schopným spôsobiť rozklad substrátu za vzniku farebného produktu enzymatickej reakcie. Na nastavenie reakcie sa používa „Súprava na diagnostiku EDS-76 pomocou enzýmovej imunoanalýzy“ (VNIVIP), pozostávajúca z imunošpecifických a nešpecifických zložiek. Štúdium vzoriek testovacích sér kurčiat sa môže uskutočniť dvoma spôsobmi: bez triturácie séra as trituráciou. Ak sa štúdium vzoriek testovaného krvného séra vykonáva bez triturácie, umožňuje to vykonať kvalitatívne hodnotenie výsledkov v reakcii ELISA podľa princípu - pozitívna reakcia (špecifické protilátky proti vírusu EDS-76 boli zistené) alebo negatívna reakcia (žiadne špecifické protilátky). Ak bola štúdia vykonaná s trituráciou, potom sa sérový titer berie ako jeho maximálne riedenie, pri ktorom stále existujú rozdiely vo farbe obsahu jamiek so vzorkami testovaných sér v porovnaní s jamkami negatívnej kontroly ( negatívne sérum). Odporúča sa vyšetriť párové krvné séra získané od kurčiat pred prepuknutím ochorenia (pokles produkcie vajec) v období ochorenia a po obnovení produkcie vajec.
Elektrónová mikroskopická diagnostika EDS-76 sa vykonáva skúmaním materiálu obsahujúceho vírus pomocou všeobecne uznávanej metódy negatívneho farbenia, ktorá pri koncentrácii vírusu v materiáli 106/ml umožňuje prípravu preparátov na prezeranie v elektrónovom mikroskope. do 30 minút. Pri nižšom obsahu vírusu sa koncentruje niektorou zo všeobecne uznávaných metód, alebo sa používa metóda imunitnej elektrónovej mikroskopie s použitím kuracieho krvného séra homologického s vírusom EDS-76, ktoré pri miernom predĺžení doby spracovania materiálu, umožňuje súčasnú sérologickú identifikáciu vírusu.
Biotest na 5 vtákoch vo veku 120-130 dní. Testovaný materiál sa podáva intranazálne alebo intramuskulárne v objeme 0,3 až 0,5 ml každému z piatich vtákov. Rovnaký počet kurčiat sa ponechá v neinfikovanej kontrolnej skupine. Doba pozorovania je 30 dní. Za pozitívny test sa považuje prítomnosť antihemaglutinínu na vírus ECC-76 v krvnom sére infikovaných kurčiat v titri 1:16 a viac, ako aj výrazné odchýlky v produktivite vajec a kvalite znesených vajec. Pitva infikovaného vtáka odhalí abnormality vo vývoji orgánov reprodukčného traktu. V prípade potreby vykonajte histologické a elektrónové mikroskopické štúdie.
Liečba a prevencia. Prevencia EDS-76 je založená na dôslednom dodržiavaní zoohygienických požiadaviek, všeobecných veterinárnych a hygienických pravidiel, podmienok chovu a kŕmenia vtákov, v kombinácii so špecifickou prevenciou chorôb založenou na použití vakcíny.
Rodičovský kŕdeľ je potrebné doplniť na úkor potomstva získaného z chovov hydiny, ktoré sú bezpečné podľa EDS-76 alebo z tých, kde sa vykonáva špecifická prevencia chorôb. Je veľmi nežiaduce držať vtáky rôzneho veku a kurčatá rôznych krížení v jednej miestnosti. Vzhľadom na možnosť infekcie kurčiat vírusom EDS-76 z kačíc a husí je potrebné prísne územné oddelenie fariem kačíc a husí od priestorov obývaných kurčatami a ekonomické kontakty medzi nimi by sa mali obmedziť na minimum.
Ak existuje možnosť komplikácií ECD-76 s podmienečne patogénnou mikroflórou, odporúča sa podávať vtákom antibiotiká a nitrofuránové prípravky počas 5-7 dní. U chorých a podozrivých vtákov sa zvyšuje množstvo podávaných vitamínov A, D3, E, B. Množstvo vápnika v potrave sa zvyšuje 2-3 krát a pridáva sa až 0,3 % hydrogénuhličitanu sodného (sóda bikarbóna). krmivo.
Na špecifickú profylaxiu EDS-76 sa používa inaktivovaná vakcína, ktorá sa podáva vtákom intramuskulárne alebo subkutánne vo veku 90-120 dní, najlepšie najneskôr 30 dní pred začiatkom znášky. Imunita sa vytvára po 14 dňoch, maximum dosiahne do 30. dňa. Existujú 1-, 2-, 3- a 4- a viacvalentné vakcíny, v rôznych kombináciách, ktoré umožňujú súčasne vakcinovať vtáky proti EDS-76, pseudomoru hydiny, infekčnej bronchitíde, Gumborovi chorobe, syndrómu "veľkej hlavy" - pneumovírusovej infekcii, reovírusová infekcia, respiračná mykoplazmóza, používaná v závislosti od epizootickej situácie v hydinárskom priemysle. Po 21-28 dňoch je potrebné určiť postvakcinovaciu imunitu a v prípade potreby vtáka urýchlene preočkovať.
Egg drop syndrome-76 (anglicky - Egg drop Syndrome-76; odlievanie vajec, adenovírusová infekcia kurčiat, EDS-76) - vírusové ochorenie nosníc, charakterizované zmäkčením, absenciou alebo depigmentáciou škrupiny vajec, porušením proteínová štruktúra, prudký, ale krátky pokles produkcie vajec.
Historické informácie, rozdelenie, stupeň nebezpečenstva a poškodenia. Táto choroba sa prvýkrát objavila v roku 1976 v Holandsku, odtiaľ názov EDS-76. Hypotéza pôvodu tejto choroby, ktorú navrhol McFerren, je taká, že pôvodcom EDS-76 je kačací adenovírus, ktorý u svojich prirodzených hostiteľov nespôsobuje patológiu. Predtým, ako sa prvýkrát objavilo ohnisko u kurčiat, bola široko používaná vakcína proti Marekovej chorobe, pripravená v bunkových kultúrach z vyvíjajúcich sa kačacích embryí. Pravdepodobne boli kačacie bunky kontaminované adenovírusom, ktorý sa rýchlo adaptoval na nového hostiteľa a prejavil svoje patogénne vlastnosti.
EDS-76 sa rýchlo rozšíril v krajinách západnej Európy s rozvinutým priemyselným chovom hydiny. V súčasnosti je choroba registrovaná vo väčšine európskych krajín, v USA, Argentíne, Indii, Iráne, Japonsku a Austrálii. SSYA-76 bol zaznamenaný v rôznych regiónoch Ruskej federácie (Moskva, Nižný Novgorod, Sverdlovsk, Čeľabinsk, Kaluga a ďalšie regióny).
Ekonomické škody spôsobené chorobou sú spôsobené stratami spojenými s poklesom produkcie vajec (produkcia vajec chovných sliepok je znížená o 15 %). Strata produktivity v dôsledku choroby je v priemere 12 vajec na sliepku. V Anglicku stojí Egg Drop Syndrome-76 2,4 milióna libier ročne. Podiel vajec s defektmi škrupiny môže byť 38...40%, úroveň liahnivosti a životaschopnosti kurčiat v prvých dňoch života sú prudko znížené.
Pôvodca ochorenia. Čeľaď Adenoviridae sa delí na dva rody: adenovírusy cicavcov (Mastadenovirus) a vtáky (Aviadenovirus).
Pôvodca SSJ-76 patrí do rodu Aviadenovirus. Ide o vírus obsahujúci DNA, ktorý nemá vonkajší obal. Priemer viriónu je 75...80 nm. Elektrónové mikroskopické vyšetrenie rezov infikovaných buniek
Ukázalo sa, že vírusové častice as nimi spojené inklúzne telieska sú charakteristické pre adenovírusy.
Virulencia patogénu sa stráca pri zahrievaní počas 30 minút na 60 °C. Hemaglutinín je relatívne tepelne stabilný a vydrží zahrievanie po dobu 30 minút pri 70 °C. Vtáčie adenovírusy sú ľahko prístupné inaktivačnému pôsobeniu ultrafialového žiarenia a fotodynamickej inaktivácii. V porovnaní s vírusom ND sú 15-krát citlivejšie na ultrafialové ožiarenie a 10-krát citlivejšie na fotodynamickú expozíciu. Zároveň sú odolné voči 0,25% roztoku trypsínu, 2% roztoku fenolu, 50% roztoku etylalkoholu, dobre znášajú opakované cykly zmrazovania a rozmrazovania, zostávajú na pH 6,0...9,0. Z dezinfekčných prostriedkov je najúčinnejší 1% roztok formaldehydu.
Epizootológia. V prírodných podmienkach sú zdrojom patogénu domáce a divé kačice všetkých plemien, medzi ktorými je vírus rozšírený. Okrem toho môžu byť nosiče vírusov bez klinických prejavov ochorenia rôzne druhy domáce a voľne žijúce vtáky.
Štúdie ukázali, že hlavná cesta prenosu patogénu a šírenia choroby je transovariálna. Množstvo výskumníkov potvrdzuje horizontálny prenos EDS-76 a pripisuje mu veľký význam pri šírení choroby. Vyskytli sa prípady šírenia patogénu spermiami kohútov počas umelej inseminácie kurčiat.
V prirodzených podmienkach po chorobe zostávajú kurčatá nosičmi vírusu pomerne dlho. U vonkajšej hydiny sa choroba šíri do 10 ... 15 dní. Za týchto podmienok sa patogén prenáša kontaktom, prostredníctvom obslužného personálu, ošetrovacích predmetov, prepravy atď.
Epizootologickým znakom EDS-76 je prítomnosť nosiča vírusu, ktorý spôsobuje rozvoj ochorenia po dosiahnutí puberty. Dôvodom aktivácie vírusu je stresujúci účinok na telo spojený s nástupom ovipozície.
EDS-76 postihuje kurčatá hlavne na samom začiatku obdobia intenzívneho kladenia vajíčok, teda vo veku 27...32 týždňov. Zistilo sa, že u približne 42% infikovaných vtákov sa prvé príznaky choroby objavia vo veku 27 týždňov, u 28% - vo veku 30 týždňov. Zistilo sa, že vtáky staršie ako 40 týždňov netrpia EDS-76 a neobsahujú protilátky proti tomuto vírusu v krvi.
Ďalším neobvyklým rysom choroby je prísne určitý čas reaktivácia patogénu potom, čo kontaminovaný vták dosiahne úplnú pohlavnú dospelosť. U vtákov mnohých rodičovských kŕdľov nebolo možné vo veku 20 týždňov detegovať protilátky proti vírusu ECD-76 v krvi, zatiaľ čo vo veku 30 týždňov boli nielen protilátky, ale aj typické príznaky ochorenia ECD-76. zaznamenané.
Patogenéza. Patogenéza ECC-76 nie je dobre známa. Predpokladá sa, že po infekcii vtáka nastupuje štádium virémie. Patogén migruje s krvou a dostáva sa k citlivým epitelovým bunkám sliznice čreva a prípadne k epitelu vajcovodu. Ďalší vývoj Infekčný proces do značnej miery závisí od veku infikovaného vtáka. Ak sa infekcia vyskytla v období pred štádiom intenzívnej ovipozície, vírus sa aktívne reprodukuje v citlivých bunkách a vylučuje sa výkalmi a vajíčkami. V prípade, že je prenos vírusu
Položené transovariálne, to znamená od rodičov k potomkom, potom v prvých dňoch života slúžia kurčatá ako zdroj infekčného agens, ktorý infikuje intaktné hospodárske zvieratá. U infikovaných vtákov je infekcia latentná až do začiatku kladenia vajíčok. Počas tohto obdobia nie je zvyčajne možné izolovať vírus od akéhokoľvek patologického materiálu. U kurčiat vo veku 150 ... 180 dní sa patogén aktivuje, začne sa aktívne množiť v epiteliálnom tkanive a uvoľňuje sa do vonkajšieho prostredia.
Priebeh a klinický prejav. Klinické príznaky ochorenia u kurčiat nie sú vždy charakteristické. Opisujú sa ojedinelé prípady vyčerpania, strapatého peria, anémie, hnačky a depresie počas kladenia vajíčok. Okrem toho je cyanóza náušníc a hrebeňa zaznamenaná u 10 ... 70% chorých vtákov. Chuť do jedla sa nemení alebo sa mierne zvyšuje; znížená motorická aktivita.
Hlavnými charakteristickými znakmi ochorenia sú zníženie produkcie vajec o 15 ... 30%, ako aj prítomnosť vajec s tenkou škrupinou alebo bez škrupiny, deformácia vajec a zmena farby škrupiny, ako aj vápno vklady na ňom. Po objavení sa týchto príznakov v kŕdli sliepok sa pozoruje prudký pokles produkcie vajec. Depigmentácia škrupiny vajec môže začať aj po znížení produkcie vajec. Ako už bolo uvedené, produkcia vajec začína klesať u vtákov vo veku 28 ... 30 týždňov (najvyššie obdobie znášky) a pokračuje 6 ... 12 týždňov. Stupeň poklesu produktivity vajec v procese choroby v rôznych stádach samozrejme závisí od užitočnosti kŕmenia vtákov, dodržiavania technológie chovu a vlastností plemena. Pre kurčatá vaječných plemien je charakteristická zmena štruktúry proteínu: stáva sa vodnatým a zakaleným.
patologické znaky. Patologické zmeny sú charakterizované edémom a infiltráciou tkanív maternice a vajcovodu, malou katarálnou enteritídou. V niektorých prípadoch pri pitve mŕtvych tiel nedochádza k žiadnym zmenám. Histologické vyšetrenie odhalilo degeneráciu kalcifikujúcich žliaz a ich mononukleárnu infiltráciu, lymfoidnú hyperpláziu rôzneho stupňa v pečeni, slezine a iných orgánoch, ako aj atrofiu žliaz maternice, infiltráciu heterofilov, lymfocytov a plazmatických buniek, sprevádzanú rozsiahlym edémom.
Diagnostika a diferenciálna diagnostika. Diagnóza EDS-76 je stanovená na základe epidemiologických údajov, klinických príznakov, patologických zmien a laboratórnych výsledkov.
Patologický materiál z uhynutých alebo násilne usmrtených vtákov sa odoberá najneskôr do 2 hodín po klinickej smrti alebo porážke. Na izoláciu vírusu sa používajú segmenty čriev chorých vtákov, kloakálne výtery a krvné leukocyty.
Vírus ECC-76 je izolovaný z patologického materiálu v kačacích embryách alebo bunkovej kultúre kačacích fibroblastov. Na izoláciu vírusu sú potrebné aspoň tri po sebe idúce pasáže. Na identifikáciu vírusu sa RDP a RN vykonajú na rovnakých bunkových kultúrach. RIF a ELISA sa používajú ako expresná diagnostická metóda.
Na určenie príčiny ochorenia sa použili aj metódy včasnej a retrospektívnej diagnostiky. RPHA je vysoko špecifická a citlivá metóda na stanovenie obsahu protilátok proti vírusu ECC-76. Párové krvné séra odobraté podozrivému
552 mys pri chorobe vtákov v rôznom veku sa vyšetruje s odstupom 2 týždňov.
EDS-76 je potrebné odlíšiť od kurčiat infekčnej bronchitídy (IBV), otravy pesticídmi, fungicídmi, mykotoxínmi a rôzne porušenia nenákazlivá etiológia, spôsobujúca pokles produkcie vajec (tabuľka 8.3).
8.3. Diferenciálna diagnostika SSYA-76
Imunita, špecifická profylaxia. Uzdravené kurčatá získavajú intenzívnu dlhodobú imunitu a už neochorejú.
Pri skúmaní pasívnej imunity sa zistilo, že jednodňové kurčatá vyliahnuté z vajec znesených sliepkami od 7. do 11. dňa po infekcii vírusom EDS-76 si vytvárajú špecifické protilátky, ktoré do 2-3 týždňov vymiznú.
Očkovanie poskytuje úplnú ochranu pred chorobami a zlepšuje kvalitu vajec. Imunita nastáva 10 dní po očkovaní a trvá až 1 rok.
Intervet (Holandsko) vyrába inaktivovanú bivakcínu proti Newcastleovej chorobe a EDS-76 a trivalentnú vakcínu proti EDS-76, Newcastleovej chorobe a Gumborovej chorobe. Tieto vakcíny sú účinné a široko používané v rôznych krajinách sveta vrátane Ruska. V Rusku inaktivovanú vakcínu proti EDS-76 vyrába ARRIAH.
Na vyhodnotenie vakcinácie je potrebná imunologická kontrola vakcinovaných vtákov.
Prevencia. Aby sa predišlo EDS-76, je potrebné: 1) prísne dodržiavať súčasné veterinárne a hygienické predpisy pre hydinové farmy a požiadavky na ich dizajn, vrátane prijatia opatrení na ochranu farmy pred zavlečením patogénov infekčných chorôb ; 2) doplniť rodičovské a priemyselné kŕdle vtákov o násadové vajcia a jednodňové mláďatá z hydinových fariem, ktoré sú bezpečné podľa EDS-76; 3) umiestniť vtáky rôznych vekových skupín do územne izolovaných zón; 4) nepovoliť spoločnú údržbu stád kurčiat, kačíc a husí v hydinárni; 5) vykonať dôkladné čistenie a dezinfekciu nádob na mäso a vajcia; 6) vakcinovať vtáky proti EDS-76, ak sa v krvnom sére kurčiat v RZGA alebo ELISA zistia protilátky alebo keď prídu do kontaktu s farmou, ktorá je pre chorobu nepriaznivá.
Liečba. Nevyvinuté.
Kontrolné opatrenia. Po potvrdení diagnózy syndróm vypadnutia vajíčka-76 sa rozhodne o vyhlásení farmy (farmy) resp lokalite nepriaznivé a zavádzajú sa obmedzenia.
Podľa podmienok obmedzení je zakázané: 1) pohyb vtákov v rámci chovu (farmy, pobočky) počas obdobia choroby; 2) odstránenie vtákov všetkých vekových skupín z nefunkčného hospodárstva (pobočky, farmy) a ich predaj obyvateľstvu; 3) vývoz násadových vajec na iné farmy; 4) použitie vajec získaných od sliepok z nefunkčných hydinární na inkubáciu v rámci farmy; 5) odber spermií z kohútov a umelá inseminácia sliepok z rodičovského kŕdľa počas klinických prejavov choroby; 6) odvoz krmív, zariadení a zásob z nevyhovujúcich priemyselných priestorov az územia znevýhodneného hospodárstva (farma, pobočka); 7) vstup na územie nefunkčnej farmy a výstup z nej obslužným personálom bez úplnej dezinfekcie, výmeny oblečenia a obuvi; 8) vstup a výstup z územia nefunkčnej ekonomiky Vozidlo bez dezinfekcie.
V zmysle obmedzenia je povolené: 1) používať vajcia z bezchorobných kŕdľov vtákov (hydinární), u ktorých sa v krvnom sére pri RPGA alebo ELISA nezistili protilátky proti vírusu EDS-76, napr. inkubácia na farmárske účely; 2) vyviezť vajcia z nefunkčných hydinární po dezinfekcii v dezinfikovaných nádobách na predaj v obchodnej siete a siete Stravovanie Mestá; 3) v prípade absencie bitúnkov na farme odvezte vtáky do podnikov na spracovanie hydiny v časovom rámci dohodnutom s veterinárnymi orgánmi regiónu (územie, republika v rámci Ruskej federácie), a keď sa vytvoria podmienky, ktoré vylučujú šírenie choroby .
Na aerosólovú dezinfekciu vzduchu, povrchov priemyselných priestorov a zariadení v prítomnosti vtákov v nefunkčných hydinárňach sa používa jódtrietylénglykol, kyselina mliečna, para chlórterpentínu, chlórnan sodný alebo stabilizovaný roztok peroxidu vodíka podľa aktuálny pokyn na aerosólovú dezinfekciu priestorov pre chov hydiny v prítomnosti vtákov.
V období problémov farmy (farmy, oddelenia) podľa SSYA-76 vykonávajú dôkladné mechanické čistenie, aktuálnu a konečnú dezinfekciu nefunkčných hydinární, liahní, hospodárskych priestorov, inventára a vybavenia, výrobných priestorov, dopravných prostriedkov a iných predmetov spôsobom a v lehotách ustanovených aktuálnymi pokynmi na veterinárnu dezinfekciu zariadení na chov hospodárskych zvierat, ako aj deratizáciu a deratizáciu. Na mokrú dezinfekciu priestorov bez výskytu vtákov sa používa horúci roztok hydroxidu sodného, roztok formaldehydu, vyčírený roztok bielidla, suspenzia čerstvo haseného vápna (hydroxid vápenatý) dvojitým bielením alebo horúci roztok sódy.
Obmedzenia týkajúce sa EDS-76 na farme (farma, oddelenie) sú odstránené 2 mesiace po poslednom prípade zistenia chorých vtákov (zníženie produktivity vajec, odlievanie vajec, prítomnosť deformovaných a depigmentovaných vajec).
V bývalej nepriaznivej podľa farmy EDS-76 sú všetky vnímavé hospodárske zvieratá očkované minimálne 3 roky. O otázke zastavenia imunizácie vtákov rozhoduje komisia za účasti zástupcov vyšších veterinárnych orgánov.
Kontrolné otázky a úlohy. 1. Popíšte epizootologické údaje, zdroje infekčného agens. 2. Popíšte hlavné klinické príznaky ESS-76. 3. Aké abnormality v tvorbe vajíčok spôsobené vírusom EDS-76 sú u vtákov najčastejšie? 4. Prečo je potrebné očkovať kurčatá proti EDS-76 vo veku 120...130 dní?
