Iš visų OM mikrokomponentų, tiriant katagenetinės transformacijos laipsnį, geriausias orientaciniu požiūriu yra vitrinitas. Faktas yra tas, kad patikimai diagnostikai reikalingas mikrokomponentas, kuris transformacijos procese turi turėti natūralų savybių pasikeitimą ir tuo pačiu turi būti plačiai paplitęs OM. Vitrinit atitinka visus aukščiau išvardintus reikalavimus, skirtingai nuo kitų anglių ir DOM mikrokomponentų. Kurios arba susilieja su visa organine anglių mase jau vidurinėse katagenezės stadijose (leuptinitas), arba silpnai ir netolygiai reaguoja į aplinkos parametrų pokyčius (fuzinitas). Ir tik vitrinitas palaipsniui ir natūraliai keičia savo savybes ir yra labai lengvai diagnozuojamas.

Remiantis vitrinito atspindžiu, dauguma svarstyklių yra sukonstruotos katagenezės laipsniui nustatyti. Be jo, naudojami ir kiti DOM mikrokomponentai, tačiau mažesniu mastu. Metodas pagrįstas blizgesio padidėjimo modeliu katagenezės proceso metu. Tai galima lengvai pamatyti vizualiai, jei atsižvelgsite į anglies blizgesio pasikeitimą jų kaitos metu. Nereikia specialios įrangos, kad būtų galima pastebėti, kad, pavyzdžiui, antracito blizgesys yra daug didesnis nei rusvosios anglies blizgesys. Atspindėjimas yra glaudžiai susijęs su vidine medžiagos struktūra, būtent su dalelių įpakavimo medžiagoje laipsniu. Būtent nuo to ir priklauso. Žinoma, katagenezės laipsnio tyrimas pagal atspindėjimą atliekamas naudojant speciali įranga Pavyzdžiui, POOS-I įrenginį sudaro poliarizuojantis mikroskopas, optinis priedas, fotodaugintuvo vamzdelis (PMT) ir įrašymo įrenginys. Tyrimo metu lyginamos foto srovės, kurias sukelia šviesa, atsispindėjusi nuo mėginio paviršiaus ir atskaitos.

Taigi vitrinitas, tiksliau, jo atspindėjimas, buvo laikomas tyrimo etalonu. Jis matuojamas naudojant įvairius fotometrus ir etalonus ore ir panardinamoje aplinkoje su griežtai statmenu šviesos kritimu ant gerai poliruoto mėginio paviršiaus. Matavimai atliekami tik siaurame bangų ilgių diapazone: nuo 525 iki 552 nm. Šis apribojimas yra dėl techninės charakteristikos prietaisas. 546,1 nm bangos ilgis laikomas standartiniu, tačiau nedideli svyravimai apie šią vertę praktiškai neturi jokios pastebimos įtakos matavimo vertei. Mėginys fiksuojamas ant mikroskopo stovo ir sustabdomas taip, kad jo paviršius būtų statmenas optinio tvirtinimo ašiai. Kaip minėta pirmiau, mes matuojame atspindėtos šviesos intensyvumą pakaitomis iš mėginio ir atskaitos, naudodami fotodaugiklį. Pagal apibrėžimą atspindėjimas yra gebėjimas atspindėti dalį šviesos, krintančios ant paviršiaus. Jei tai išversime į skaitinę kalbą, tai yra atspindėtos šviesos ir krintančios šviesos santykis.

Kuris gali būti parašytas taip:

Kur I1 yra atspindėtos šviesos intensyvumas, o I2 yra krintančios šviesos intensyvumas. Praktikoje, atliekant matavimus, naudojama formulė

Čia R yra norimas atspindžio indeksas, d – prietaiso rodmenys matuojant tiriamą medžiagą, o R1 – atitinkamai standarto atspindžio indeksas, o d1 – prietaiso rodmenys matuojant etaloną. Jei imtuvo įrenginyje nustatote nulinę standarto reikšmę, formulė supaprastinama iki R=d.

Be vitrinito, matavimams naudojami ir kiti OM mikrokomponentai. Kai kurie iš jų turi atspindžio anizotropijos savybę. Paprastai naudojami trys matavimo parametrai: Rmax Rmin Rcp. Vitrinito anizotropijos padidėjimas katagenezės metu daugiausia susijęs su laipsniško aromatinių huminių micelių išdėstymo procesu, susijusiu su slėgio padidėjimu didėjant panardinimo gyliui. Anizotropinio mėginio matavimai iš esmės nesiskiria nuo homogeninio mėginio matavimų, tačiau atliekami keli matavimai. Šiuo atveju mikroskopo pakopa sukasi 360? 90? intervalais. Visada aptinkamos dvi padėtys su didžiausiu atspindžiu ir dvi su minimaliu. Kampas tarp kiekvieno iš jų yra 180?. Atliekami kelių uolienų fragmentų matavimai ir vėliau apskaičiuojama vidutinė vertė. Kaip didžiausių ir minimalių matavimų vidutinių verčių aritmetinis vidurkis:

Galite iš karto nustatyti vidutinę vertę pasirinkę 45 kampą? nuo didžiausios arba minimalios reikšmės, tačiau šis matavimas galioja tik tiriant silpnai transformuotą OB.

Atliekant tyrimus iškyla keletas su technologijomis susijusių problemų. Pavyzdžiui, jei turime uolieną su mažu bendru OM kiekiu, tada reikia specialiai apdoroti mėginį ir paversti jį koncentruotų poliruotų briketų pavidalu. Tačiau koncentratų gavimo procese pradinė organinė medžiaga yra apdorojama cheminiu būdu, o tai turi įtakos optinėms medžiagos savybėms. Be to, prarandama informacija apie uolienos organinės medžiagos struktūrą. Matavimų iškraipymus gali sukelti ir tai, kad vaisto paruošimo proceso technologija nėra standartizuota, o mėginio paruošimas dažniausiai nustatomas vizualiai. Problema ta pati fizines savybes uolienų, pvz., stiprios mineralizacijos ar anglies trapumo, šiuo atveju būtina ištirti gauto paviršiaus ploto atspindį. Jei plotas parinktas teisingai, aplinkiniai defektai matavimams praktiškai neturi įtakos. Tačiau iš esmės kiekybiniai klaidų dydžiai praktiškai neturi įtakos nustatant katagenezės stadiją.

Mėginiai tiriami, dažniausiai įprastomis oro sąlygomis, tai lengva ir greita. Bet jei reikia atlikti išsamų tyrimą dideliu padidinimu, naudojamos panardinimo priemonės, dažniausiai kedro aliejus. Abu matavimai yra teisingi ir kiekvienas iš jų naudojamas, tačiau kiekvienas savo konkrečiu atveju. Matavimo panardinimo aplinkoje pranašumai yra tai, kad jie leidžia tirti mažų matmenų daleles, be to, padidėja ryškumas, todėl galima išsamiau diagnozuoti katagenezės laipsnį.

Papildomas sunkumas atliekant tyrimus yra OM mikrokomponentų diagnozė, nes jie dažniausiai nustatomi skleidžiamoje šviesoje. Nors atspindys yra akivaizdus atspindėtame. Štai kodėl. Paprastai tyrimo procese derinami du metodai. Tai reiškia, kad perduodama ir atspindėta šviesa pakaitomis naudojama tam pačiam CDOM fragmentui tirti. Tam dažniausiai naudojamos dvipusės poliruotos sekcijos. Juose, apžiūrėjus ir nustačius mikrokomponentę skleidžiamoje šviesoje, perjungiamas apšvietimas ir atliekami matavimai atspindintoje šviesoje.

Vitrinitas gali būti naudojamas ne tik organinės medžiagos virsmo laipsniui nustatyti, bet ir jo ryšiui su uoliena nustatyti. Singenetiniame vitrinite skeveldros dažniausiai būna pailgos, dalelės išsidėsčiusios lygiagrečiai patalynės plokštumoms ir dažniausiai turi ląstelinę struktūrą. Jei kalbame su apvalios, apvalios formos vitrinito dalelėmis, greičiausiai tai yra persodinta medžiaga.

Vitrinito Ro% atspindžio matavimas yra vienas iš labiausiai paplitusių metodų vertinant OM brendimo laipsnį nuosėdose. Vitrinito atspindžio koeficientas matuojamas kaip atspindėtų ir krintančių šviesos pluoštų intensyvumo santykis. Pagal fizikinius šviesos atspindžio ir lūžio dėsnius,

Intensyvumo dalis Ro monochromatinės šviesos pluošto, kuris paprastai atsispindi nuo Plokščias paviršius vitrinito gabalas, kurio lūžio rodiklis n, panardintas į aliejų, kurio lūžio rodiklis n o (arba į orą, kurio lūžio rodiklis n a), yra lygus:

Lūžio rodiklius n ir no lemia vitrinito mėginio integralinė temperatūros istorija, t.y. funkcija T(t). Metodas remiasi idėja, kad koalifikacijos proceso metu vitrinitas keičia savo atspindį nuo Ro = 0,25% durpių stadijoje iki Ro = 4,0% antracito stadijoje (Lopatin, Yemets, 1987). Iki šiol sukauptas didžiulis faktinės medžiagos kiekis leidžia nustatyti tam tikrus brandinimo etapus pagal išmatuotą Ro %. Šiuo atveju galimi skirtingų tipų OM Ro% verčių skirtumai, taip pat priklausomai nuo priemaišų kiekio OM. Taigi Ro = 0,50% apytiksliai atitinka pagrindinio didelio sieros turinčių kerogenų alyvos susidarymo etapo pradžią, o Ro = 0,55 - 0,60% - tą patį etapą I ir II tipų kerogenams (žr. toliau), o Ro = 0,65 – 0,70 % – III tipo kerogenams (Gibbons ir kt., 1983; Waples 1985). Vienas iš tariamų Ro% reikšmių atitikimo pagrindiniams OM brandinimo etapams ir temperatūros ir laiko indekso (TTI) apskaičiuotų verčių variantų, aptariamas toliau, yra pateiktas 1-7a lentelė, taip pat toliau ryžių. 1-7. Katagenezės etapų atitikimas Ro reikšmėms, pateiktoms lentelėje, yra pagrįstas koreliacija tarp apskaičiuotų temperatūros ir laiko indeksų (TTI) ir Ro% reikšmių, išmatuotų skirtinguose pasaulio baseinuose, ir yra apytikslis. Tačiau jis plačiai naudojamas literatūroje ir išsamiau aptariamas 7-5-1 skyriuje. Kad būtų lengviau orientuotis įvairiose OM katagenezės skalėse, 1-7b lentelėje taip pat pateikiama verčių atitikimo skalė.

1-7a lentelė. Ro% ir TVI verčių atitikimas OM katagenezės etapams(Vapsas, 1985 m.)

vitrinito %Ro atspindėjimas į OM brandos stadijas, priimtas Rusijos naftos geologijoje.

1-7b lentelė. Ro% reikšmių atitikimas OM katagenezės etapams, priimtiems Rusijos naftos geologijoje(Parparova ir kt., 1981)

Diagenezė: DG3, DG2 ir DG1 ------ Ro< 0.25%

Protokatogenezė: PC1 (0,25 £ Ro 0,30 %)

PC2 ((0,30 £ Ro 0,42 %)

PC2 ((0,42 £ Ro £ 0,53 %)

Mezokatogenezė: MK1 (0,53 £ Ro £ 0,65 %)

MK2 ((0,65 £ Ro £ 0,85 %)

MK3 ((0,85 £ Ro £ 1,15 %)

MK4 ((1,15 £ Ro 1,55 %)

MK5 ((1,55 £ Ro £ 2,05 %)

Apokatagenezė: AK1 (2,05 £ Ro £ 2,50 %)

AK2 ((2,50 £ Ro £ 3,50 %)

AK3 ((3,50 £ Ro £ 5,00 %)

AK4 ((Ro > 5,00 %)

Trumpai pakalbėkime apie kai kurias problemas, susijusias su %Ro matavimų naudojimu OM katagenezės laipsniui įvertinti. Jie pirmiausia siejami su sunkumais atskirti vitrinito maceralus nuo nuosėdinių uolienų OM dėl didelės jų įvairovės. Naudoti vitrinito atspindį paleotemperatūrinėms sąlygoms kontroliuoti galima, paprastai kalbant, tik remiantis vitrinitu iš anglies siūlių ir mažesniu patikimumu – iš kontinentinio („sausumos“) pradinio OM moliuose, kuriuose organinės anglies kiekis ne didesnis kaip 0,5 %. Tačiau net ir šiose žemyninėse (sausumos) serijose reikia būti atsargiems, nes uolienose, pvz., smiltainiuose, pagrindinė OM dalis gali būti perdirbta ir pakeista (Durand ir kt., 1986). Taip pat būtina atsižvelgti į tai, kad bet kuriuo atveju, kai Ro > 2%, atspindėjimas taip pat priklausys nuo slėgio. Taip pat reikia būti atsargiems plečiant vitrinito sąvoką, įtraukiant jūrines ir ežerines uolienų serijas, nes tokiose uolienose matuojamos dalelės, kurių atspindys retai būna aukštesniųjų augalų vitrinitai ir daugeliu atvejų

Ryžiai. 1-7. Vitrinito atspindžio, Ro % ir karbonizacijos laipsnio koreliacija su kitais brandos rodikliais ir su naftos ir dujų susidarymo bei skilimo zonų padėtimi Viršuje: iš (Kalkreuth ir Mc Mechan, 1984), apačioje iš (Tissot ir kt., 1987) ).

yra bituminoidai iš planktono ir yra painiojami su vitrinitu (Waples, 1985; Durand ir kt., 1986). Jų termofizinės savybės skiriasi nuo vitrinito. Panaši problema egzistuoja Kambro-Ordoviko ir senesnių amžių kontinentinėms (sausumos) uolienoms. Juose negali būti vitrinito, nes tada dar nebuvo aukštesnių augalų. Visose raudonos spalvos dariniuose OM yra oksiduotas. Kalkakmenyje vitrinitai išsaugomi rečiau ir, jei yra, jų atspindys gali skirtis nuo įprasto tokio pat karbonizacijos laipsnio vitrinito (Buntebarth ir Stegena, 1986).

Tam tikros šio OM katagenezės vertinimo metodo klaidos atsiras dėl reikšmingų išmatuotų Ro verčių sklaidos, taip pat dėl to, kad baseino atkarpoje visada bus horizontų, kuriuose vitrinito išskirti sunku arba iš viso neįmanoma. . Pavyzdžiui, esant žemam brandos lygiui, vitrinito maceralų išskyrimas yra didelė problema, todėl Ro matavimų patikimumas mažesnėms nei 0,3–0,4% vertėms yra labai mažas (Waples ir kt., 1992). Vitrinito atspindžio priklausomybė nuo pradinės vitrinito cheminės sudėties bus reikšminga (Durand ir kt., 1986). Tai paaiškina faktą, kad net tame pačiame baseine dažnai stebimi dideli Ro% verčių svyravimai (Tissot ir kt., 1987). Siekiant atsižvelgti į vitrinito cheminės sudėties svyravimus, minimalūs Ro % matavimai atliekami teisingo vitrinito mėginiams, standartine procedūra išskirtiems iš kontinentinės kilmės organinių medžiagų. Kuriant universalias skales, skirtas koreliuoti Ro% reikšmes su OM konversijos laipsniais, nerekomenduojama naudoti lygiaverčių vitrinito tipų I ir II OM tipuose (Tissot ir kt., 1987).

Ir vis dėlto, pagrįstai įvertinus pateiktas pastabas, OM brandos lygio įvertinimo ir per jį nuosėdinių sluoksnių nusėdimo paleotemperatūros sąlygų kontrolės metodas, matuojant vitrinito atspindį, šiuo metu yra vienas patikimiausių ir plačiausiai paplitusių metodų. naftos ir dujų baseinų analizės praktikoje.

7.3 %Ro matavimų ir kitų metodų naudojimas siekiant įvertinti maksimalią uolienų temperatūrą baseino nusėdimo istorijoje

Iš pradžių vitrinito atspindžio matavimai buvo naudojami siekiant įvertinti maksimalias temperatūras Tmax formacijų panardinimo istorijoje. Panašiais tikslais geologiniuose tyrimuose buvo ir yra naudojami keli metodai, tokie kaip (Yalcin ir kt., 1997): 1) Tmax įvertinimas, pagrįstas OM brandos lygiu (karbonizacijos laipsnis, vitrinito atspindėjimas; 2) ) įvertinimai, pagrįsti mineraloginiais pokyčiais molio mineralų diagenezės ir ilito kristalizacijos metu; 3) metodai, pagrįsti skysčių inkliuzų analize, pavyzdžiui, skysčio homogenizacijos temperatūra; 4) geotermometrai, pagrįsti specifinėmis cheminėmis reakcijomis, pavyzdžiui, apibūdinantys stabilių izotopų pusiausvyrą (Hoefs, 1987) arba SiO 2 -Na-K-Ca sistemos pusiausvyros būsenas (Ellis ir Mahon, 1977); 5) Fizzion-track analizė (radioaktyviųjų elementų dalijimosi pėdsakų pasiskirstymo apatite analizė; Green et al., 1989; 1995); 6) remiantis tokių radiometrinių sistemų, kaip K-Ar, Rb-Sr ir U, radiometrinių amžiaus nustatymo deriniu, kurie užsidaro skirtingos temperatūros(Buntebarch ir Stegena, 1986). Kadangi paleotemperatūros įverčiai vis dar plačiai paplitę geologinėje literatūroje, trumpai apibūdinsime kiekvieną iš šių metodų. Pradėkime pristatymą nuo didžiausių uolienų temperatūrų įvertinimų, pagrįstų vitrinito atspindžio vertėmis.

Iš karto atkreipkime dėmesį, kad nuosėdinių darinių (Tmax) nusėdimo istorijoje maksimalių temperatūrų įvertinimo metodų kūrimas atsirado dėl to, kad praėjusio amžiaus 70-80-aisiais daugelis tyrinėtojų temperatūrą laikė pagrindine ir Tiesą sakant, vienintelis veiksnys, lemiantis nuosėdų OM brandos raidą. Laiko įtaka OM brendimo procesui buvo nepaisoma. Buvo manoma, kad išmatuotos (arba apskaičiuotos) vitrinito atspindžio % Ro vertės turėtų atspindėti didžiausias uolienų temperatūras jų nusėdimo istorijoje. Remiantis šiais požiūriais, buvo pasiūlytos įvairios koreliacijos tarp Tmax verčių ir vitrinito uolienų atspindžio ore %R a ir aliejuje %Ro. Pavyzdžiui, Ammosovo ir kt. (1980) ir Kurčikovo (1992) darbuose T max reikšmes siūloma įvertinti iš išmatuotų %R a verčių iš santykio.

10 × R a (%) = 67,2 × (7–1)

Uolienų anglies sluoksnių pavyzdžiams iš santykio

10 × R a (%) = 67,2 × (7–2)

Dėl smiltainių ir aleuritų ir pagal Eq.

10 × R a (%) = 67,2 × (7–3)

Moliui ir purvo akmenims. Pateiktose išraiškose Tmax išreiškiamas °C. Price (1983) taip pat manė, kad vieno ar net kelių milijonų metų laikas neturi pastebimos įtakos OM brendimo procesui ir tuo remdamasis pasiūlė santykį, panašų į (7-1) - (7-3), T max susiejimas su vitrinito atspindžiu aliejuje (% Ro):

T max (°C) = 302,97 × log 10 Ro (%) + 187,33 (7–4)

Keletą panašių santykių yra aptaręs K. Barkeris (Barker ir Pawlevicz, 1986; Barker, 1988, 1993). Pirmasis yra (Barker ir Pawlevicz, 1986):

ln Ro (%) = 0,0078 × T maks. (°C) – 1,2 (5)

buvo pagrįstas 600 Tmax matavimų 35 šuliniuose skirtinguose baseinuose visame pasaulyje. Pasak autorių, jis galioja temperatūrų diapazone 25 £ T max £ 325°C ir vitrinito atspindys 0,2% £ Ro £ 4,0%. K. Barker (Barker, 1988) pasiūlė ryšį, apibūdinantį situacijas, kai uolienų įkaitimas yra pastovus panardinant į baseiną:

T max (°C) = 104 × ln Ro (%) + 148. (7–6),

ir remiantis kinetiniu vitrinito brendimo modeliu (Burnham ir Sweeney, 1989). M. Johnsonas ir kt. (Johnsson ir kt., 1993), analizuodami šią formulę, pastebi, kad ji gana gerai apibūdina situaciją, kai šildymo greičiai V = 0,1 – 1 °C/mln. metų, bet normoms V = 10 – 100 °C/mln. metų neįvertina Tmax verčių Ro regione< 0.5% и переоценивает их при Ro >2 %. Savo vėlesniame darbe Barker (1993) pasiūlė kitą koreliacijos tarp Tmax ir %Ro versiją, kurioje nėra apribojimų uolienų kaitinimo greičiui:

T max (°C) = [ ln (Ro (%) / 0,356) ] / 0,00753 (7–7)

Taigi literatūroje siūloma gana daug koreliacinių ryšių T max - %Ro. Įjungta ryžių. 2-7 jie lyginami vienas su kitu, remiantis Tmax įverčių rezultatais, kai vertės yra 0,4% £ Ro £ 4,0%.

Ryžiai. 2-7. Ryšiai, siejantys maksimalią temperatūrą Tmax uolienų nusėdimo istorijoje su išmatuotomis vitrinito atspindžio vertėmis aliejuje %Ro, remiantis įvairiais literatūriniais šaltiniais: 1 (anglims), 2 (smiltainiams ir aleurio akmenims), 3 ( moliams ir purvo akmenims) – ( Ammosov et al., 1980; Kurchikov, 1992); 4 - (Kaina, 1983); 5 - (Barker ir Pawlevicz, 1986); 6 - (Barker ir Pawlevicz, 1986); 7 – (Barkeris, 1993); 8 - pagal skystų inkliuzų homogenizacijos temperatūrą (Tobin ir Claxton, 2000).

Iš šio skaičiaus akivaizdus reikšmingas Tmax verčių, atitinkančių fiksuotas Ro reikšmes, sklaida, kuri siekia 60–100 °C, kai terminas Ro ³ 0,7%. Šis sklaida aiškiai rodo, kad vien temperatūros vertė (netgi didžiausia) negali nustatyti OM brandos uolienose ir kad temperatūros poveikio laikas vaidina svarbų vaidmenį OM brendimui. Gali būti, kad tam tikrais Ro intervalais ir ypatingomis sedimentacijos sąlygomis (pvz., tomis, kurios užtikrina pastovų uolienų įkaitimo greitį), kai kurie iš pateiktų ryšių gerai apibūdina situaciją, tačiau, kaip rodo tyrimai (žr. toliau), tas pats proc. Ro vertes galima pasiekti, pavyzdžiui, esant žemesnei temperatūrai, bet ilgesniam uolienų laikymo laikui (žr. toliau). Dėl šios priežasties visada yra baseinas ir darinys su atitinkamu brandos ir temperatūrų intervalu, dėl kurių įvertinimai iš santykių (7-1) – (7-7) sukels pastebimų klaidų. Ši aplinkybė lėmė tai, kad per pastaruosius 10-15 metų rašytinių santykių populiarumas pastebimai sumažėjo.

Kitas įprastas uolienų paleotemperatūrų įvertinimo baseinuose metodas yra Tmax nustatymas analizuojant skysčių, sugaunamų uolienų matricos diagenezės metu, sudėtį. Metodas gali būti naudojamas, jei tenkinamos šios sąlygos (Burruss 1989): 1) inkliuzas yra vienfazis skystis, 2) šio skysčio tūris nekinta jį sulaikius uolienoje, 3) taip pat jo sudėtis. išlieka nepakitęs, 4) iš anksto žinomas slėgio poveikis skysčio sudėčiai, 5 ) taip pat žinomas skysčio surinkimo laikas ir mechanizmas. Šios sąlygos rodo, kad taikant metodą reikia būti atsargiems (Burruss, 1989). Pirma, norint nustatyti santykinį skysčio inkliuzo susidarymo laiką, reikia atlikti išsamius petrografinius tyrimus. Antra, norint išsamiai apibūdinti pagrindinių uolienų istoriją, būtina išsamiai išanalizuoti vietovės tektoninę raidą ir baseino nusėdimo istoriją. Taip pat būtina atlikti įstrigusio skysčio fazės elgsenos ir cheminės sudėties analizę. Tačiau net ir po to išlieka dvi svarbios problemos – viena susijusi su prielaida, kad skysčio cheminė sudėtis lieka nepakitusi po to, kai jį sulaiko uolienų matrica (yra įtikinamų įrodymų, kad taip yra ne visada), o kita susijusi su nustatant slėgio, kuris egzistavo skysčio sulaikymo laikotarpiu, dydį ir tipą – nesvarbu, ar jis buvo litostatinis, ar hidrostatinis (Burruss 1989). Jei visos aukščiau išvardintos problemos yra išspręstos, uolienos temperatūra skysčio gaudymo metu nustatoma pagal atitinkamą tiriamos medžiagos skystųjų ir kietųjų fazių pusiausvyros P-T diagramą. Kurdami šį metodą, Tobinas ir Claxtonas (2000) pasiūlė koreliaciją tarp skystų inkliuzų homogenizacijos temperatūros T hom ir vitrinito atspindėjimo Ro% (2-7 pav.):

Ro% = 1,9532 ´ log T hom – 2,9428 (7–8)

Jie nustatė, kad naudojant „idealią“ matavimų seriją, santykis (7–8) yra patenkinamas koreliacijos koeficientu 0,973 ir duomenų sklaida mažesne nei 0,12% Ro. Jei naudojama visa pasaulio duomenų serija, tada formos santykis:

Ro = 2,1113 × log T hom – 3,2640 (7–9)

veiks su 0,81 koreliacijos koeficientu, o didžiausia duomenų dispersija mažesnė nei 0,32 % Ro (Tobin ir Claxton, 2000). Homogenizacijos temperatūra T hom dažnai naudojama kaip maksimalios uolienų temperatūros T max įvertinimas panardinant į baseiną. Tačiau pav. 2-7 parodyta, kad kreivė, sudaryta naudojant (7-9) formulę, labai skiriasi nuo T max įverčių naudojant (7-1) – (7-7) formules, kerta likusias Fig. 2-7. Ji aiškiai neįvertina Ro temperatūros< 1.5% и даёт нереально высокие значения при Ro >2% (Th = 540, 930 ir 1600 °C, kai Ro = 2,5, 3 ir 3,5%).

3-7 pav. Anadarko baseino dujų lauko d 13 C izotopų santykio kitimas su gyliu (JAV; Price, 1995).

Daugelyje darbų (Rooney ir kt., 1995; Price, 1995 ir kt.) angliavandenilių susidarymo temperatūrai įvertinti siūloma naudoti anglies izotopinės sudėties pokyčius OM katagenezės metu. (3-7 pav.). II tipo OM dujų susidarymo eksperimentų rezultatai (Delavero ir Val Verde baseinų šaltinių uolienos vakarų Teksaso valstijoje) esant pastoviam uolienų įkaitimo greičiui 1°C/min (kairėje ryžių. 4-7; Rooney ir kt., 1995) rodo pastebimus dujų izotopinės sudėties pokyčius

Ryžiai. 4-7. Dujų susidarymo temperatūra ir d13C izotopų santykis metanui (d13C1), etanui (d13C2) ir propanui (d13C3), kurį generuoja II tipo kerogenas iš Delavero ir Val Verde baseinų šaltinių uolienų vakarų Teksase, kai uolienų įkaitimo greitis 1°C/min. (paveikslėlis kairėje, po Rooney ir kt., 1995) ir d 13 C izotopų santykis metanui, susidariusiam skirtingose temperatūrose uolienų mėginių hidroidinės pirolizės su OM metu įvairių tipų(dešinysis paveikslas, po Price, 1995).

su temperatūra ir taip patvirtina esminę galimybę panaudoti šią priklausomybę apskaičiuojant šio tipo OM dujų susidarymo temperatūrą. Tą patį rodo ir uolienų mėginių su įvairių tipų OM hidroidinės pirolizės rezultatai, parodyti kairiajame paveikslėlyje. 4-7. Jie taip pat aiškiai parodo metano d 13 C izotopų santykio pokytį, susidariusį skirtingose temperatūrose (Price, 1995). Tačiau šie eksperimentai taip pat rodo itin didelį d 13 C pokyčių jautrumą OM sudėties ir tipo pokyčiams, dėl kurių metodą galima naudoti tik išsamiai išanalizavus OM sudėtį ir gavus atitinkamą. priklausomybės konkrečiai analizuojamos medžiagos rūšiai. Didelis d13C verčių svyravimas su gyliu, parodytu Fig. 3-7 tipinei nuosėdinio baseino atkarpai, daugiausia dėl pjūvio makro ir mikro sluoksnių uolienų OM sudėties ir tipo skirtumų. Ši sklaida labai apriboja temperatūros įvertinimų, pagrįstų izotopų santykiais dujose iš tikrų nuosėdų sekcijų, patikimumą.

Smektito pavertimo ilitu molio mineraluose procesas taip pat kartais naudojamas paleotemperatūrinėms sąlygoms baseinuose kontroliuoti. Tačiau ryžių. 5-7 rodo, kad procesui būdingi temperatūrų diapazonai yra gana platūs. Šis temperatūros diapazonas nestebina, nes laboratoriniai tyrimai parodyta, kad smektito virsmo ilitu procesą lemia 6-osios eilės kinetinė reakcija (Pytte ir Reynolds, 1989), todėl laikas turi įtakos šių perėjimų greičiui kartu su temperatūra. Šios reakcijos bus išsamiau aptartos paskutinėje šio skyriaus dalyje, čia pažymime, kad pagrįsti smektito virsmo į ilitą temperatūros įverčiai galimi tik izoterminiam mineralų virsmo variantui, tačiau net ir tada paklaida. metodas bus pastebimas.

5-7 pav. Molio mineralų transformacija, pagrįsta 10 Šiaurės jūros šulinių mėginių analize (Dypvik, 1983). Skirtingo lygio smektito ir ilito sluoksnių nykimo procesai mišraus sluoksnio smektito-ilito molio mineraluose yra susieti su vitrinito temperatūromis ir atspindžiu.

Puslapis 1

2 puslapis

3 puslapis

4 puslapis

5 puslapis

6 puslapis

7 puslapis

8 puslapis

9 puslapis

10 psl

11 psl

12 psl

13 psl

14 puslapis

15 psl

16 puslapis

17 puslapis

18 puslapis

19 puslapis

FEDERALINĖ TECHNINIO REGLAMENTAVIMO IR METROLOGIJOS AGENTŪRA

NACIONALINIS

STANDARTAS

RUSŲ

FEDERACIJA

MEDICINOS PRODUKTAI DIAGNOSTIKAI

IN VITRO

Gamintojo pateikta informacija su in vitro diagnostiniais reagentais, naudojamais biologiniam dažymui

In vitro diagnostikos medicinos prietaisai – informacija, kurią gamintojas pateikia su in vitro diagnostiniais reagentais, skirtais dažymui biologijoje (IDT)

Oficialus leidinys

Standartinform

Pratarmė

Standartizacijos tikslai ir principai in Rusijos Federacijaįdiegta Federalinis įstatymas 2002 m. gruodžio 27 d. Nr. 184-FZ „Dėl techninio reglamento“ ir Rusijos Federacijos nacionalinių standartų taikymo taisyklės - GOST R 1.0-2004 „Standartizavimas Rusijos Federacijoje. Pagrindinės nuostatos“

Standartinė informacija

1 PARENGĖ Valstybės biudžeto visuomenės sveikatos ir sveikatos priežiūros valdymo instituto Klinikinės ir laboratorinės diagnostikos tyrimų laboratorija švietimo įstaiga aukštesnė profesinis išsilavinimas Pirmasis Maskvos valstybinis medicinos universitetas pavadintas. I.M. Sechenov“ Rusijos Federacijos sveikatos apsaugos ministerijos, remiantis autentišku 4 dalyje nurodyto tarptautinio standarto vertimu į rusų kalbą.

2 PRISTATO Techninis standartizacijos komitetas TC 380 „Klinikiniai laboratoriniai tyrimai ir medicinos prietaisai in vitro diagnostikai“

3 PATVIRTINTA IR ĮSIgaliojo įsakymu Federalinė agentūra dėl techninio reglamento ir metrologijos 2013-10-25 Nr.1201-st.

4 Šis standartas yra identiškas tarptautiniam standartui ISO 19001:2002 „In vitro diagnostikos medicinos prietaisai. Gamintojo pateikta informacija su in vitro diagnostiniais reagentais, skirtais dažymui biologijoje“ (ISO 19001:2002 „/l vitro diagnostikos medicinos prietaisai – gamintojo pateikta informacija su in vitro diagnostiniais reagentais, skirtais dažymui biologijoje“).

Šio standarto pavadinimas buvo pakeistas, palyginti su nurodyto tarptautinio standarto pavadinimu, kad jis atitiktų GOST R 1.5 (3.5 poskyris).

5 PRISTATYTA PIRMĄ KARTĄ

Šio standarto taikymo taisyklės nustatytos GOST R 1.0-2012 (8 skirsnis). Informacija apie šio standarto pakeitimus skelbiama kasmet skelbiamoje informacijos rodyklėje „Nacionaliniai standartai“, o pakeitimų ir pataisų tekstai – kas mėnesį skelbiamoje informacijos rodyklėje „Nacionaliniai standartai“. Šio standarto peržiūros (pakeitimo) ar panaikinimo atveju atitinkamas pranešimas bus paskelbtas kas mėnesį skelbiamoje informacijos rodyklėje „Nacionaliniai standartai“. Taip pat skelbiama atitinkama informacija, pranešimai ir tekstai informacinė sistema bendram naudojimui - oficialioje Federalinės techninio reguliavimo ir metrologijos agentūros svetainėje internete (gost.ru)

Šio standarto negalima visiškai ar iš dalies atkurti, dauginti ar platinti kaip oficialų leidinį be Federalinės techninio reguliavimo ir metrologijos agentūros leidimo.

A.4.2.3.3 Dažymo procedūra

A.4.2.3.3.1 Deparafinuoti ir rehidratuoti audinių dalis; pakeisti antigeną (žr. aukščiau pateiktą dažymo procedūrą)

A.4.2.3.3.2 Inkubuoti su vandenilio peroksidu, kurio masės dalis yra 3 %, distiliuotame vandenyje 5

A.4.2.3.3.3 Nuplaukite distiliuotu vandeniu ir padėkite į TBS 5 minutėms.

A.4.2.3.3.4 Inkubuokite su monokloniniu pelės anti-žmogaus estrogeno receptoriumi, optimaliai atskiestu TBS (žr. A.4.2.3), 20–30 minučių.

A.4.2.3.3.5 Nuplaukite TBS ir padėkite į TBS vonią 5 minutėms.

A.4.2.3.3.6 Inkubuokite su biotinilinto ožkos antikūno prieš pelę/triušią imunoglobulinu darbiniu tirpalu 20–30 minučių.

A.4.2.3.3.7 Nuplaukite TBS ir padėkite į TBS vonią 5 minutėms.

A.4.2.3.3.8 Inkubuokite su StreptAvidin-biotino/krienų peroksidazės komplekso darbiniu tirpalu 20–30 minučių.

A.4.2.3.3.9 Nuplaukite su TBS ir padėkite į TBS vonią 5 minutėms.

A.4.2.3.3.10 Inkubuokite su DAB tirpalu 5–15 minučių (dirbdami su DAB naudokite pirštines).

A.4.2.3.3.11 Nuplaukite distiliuotu vandeniu.

A.4.2.3.3.12 Atlikite kontrastinį dažymą hematoksilino tirpalu 30 s.

A.4.2.3.3.13 5 minutes skalauti vandeniu iš čiaupo.

A.4.2.3.3.14 Skalaukite distiliuotu vandeniu 5 minutes.

A.4.2.3.3.15 Dehidratuoti etanoliu, kurio tūrinė dalis yra 50 %, 3 minutes, po to 3 minutes, kai tūrio dalis yra 70 %, ir galiausiai 3 minutes, kai tūrinė dalis yra 99 %.

A.4.2.3.3.16 Nuplaukite du kartus keisdami ksileną po 5 minutes. A.4.2.3.3.17 Ekstrahuoti į sintetinę hidrofobinę dervą.

A.4.2.3.4 Siūlomi skiedimai

Optimalų dažymą galima gauti skiedžiant antikūną TBS pH = 7,6, sumaišytą pagal tūrį nuo (1 + 50) iki (1 + 75) µl, kai tiriamas formaldehidu fiksuotas žmogaus krūties vėžio parafino pjūvis. Antikūnas gali būti atskiestas TBS, sumaišytas nuo (1 + 50) iki (1 + 100) µl, naudoti APAAP technologijoje ir avidino-biotino metoduose tiriant acetonu fiksuotas šaldyto krūties vėžio audinio dalis.

A.4.2.3.5 Tikėtini rezultatai

Antikūnas intensyviai žymi ląstelių branduolius, kuriuose, kaip žinoma, yra didelis skaičius estrogenų receptoriai, pavyzdžiui, gimdos epitelio ir miometriumo ląstelės bei normalios ir hiperplastinės pieno liaukų epitelio ląstelės. Dažymas daugiausia lokalizuotas branduoliuose be citoplazminio dažymo. Tačiau kriostato sekcijos, kuriose yra nedidelis arba neaptinkamas estrogenų receptorių kiekis (pvz., žarnyno epitelis, širdies raumens ląstelės, smegenų ląstelės ir jungiamasis audinys), rodo neigiamus antikūno rezultatus. Antikūnas yra skirtas krūties karcinomos epitelio ląstelėms, kurios ekspresuoja estrogenų receptorius.

Audinio dažymas priklauso nuo audinio tvarkymo ir apdorojimo prieš dažymą. Netinkamas fiksavimas, užšaldymas, atšildymas, plovimas, džiovinimas, kaitinimas, pjaustymas arba užteršimas kitais audiniais ar skysčiais gali sukelti artefaktus arba klaidingai neigiamus rezultatus.

A.5 7 ląstelių demonstravimas srauto citometrija

ĮSPĖJIMAS – Reagento sudėtyje yra natrio azido (15 mmol/L). NaN 3 gali reaguoti su švinu arba variu, sudarydamas sprogius metalo azidus. Išimdami nuplaukite dideliu kiekiu vandens.

A.5.1 Monokloninės pelės anti-žmogaus G ląstelės

Toliau pateikta informacija taikoma monokloninėms pelėms, skirtoms prieš žmogaus 7 mazgus:

a) produkto tapatybė: monokloninis pelės anti-žmogaus 7-kletas, CD3;

b) klonas: UCHT;

c) imunogenas: žmogaus vaiko timocitai ir limfocitai iš paciento, sergančio Sezary liga;

d) antikūnų šaltinis: išgryninti pelių monokloniniai antikūnai;

e) specifiškumas: antikūnas reaguoja su T ląstelėmis užkrūčio liaukoje, kaulų čiulpuose, periferiniame limfoidiniame audinyje ir kraujyje. Dauguma T ląstelių navikų taip pat išreiškia CD3 antigeną, tačiau jo nėra ne T ląstelių limfoidiniuose navikuose. Remiantis normalių timocitų antigenų sintezės modeliu, anksčiausia aptikimo vieta naviko ląstelėse yra ląstelių citoplazma;

f) sudėtis:

0,05 mol/l Tris/HCl buferis, 15 mmol/l NaN 3, pH = 7,2, galvijų serumo albuminas, masės dalis 1

IgG izotipas: IgGI;

lg valymas: proteino A sefarozės kolonėlė;

Grynumas: masės dalis apie 95 %;

Konjuguota molekulė: fluoresceino izotiocianato izomeras 1 (FITC);

- (NR) santykis: £ 495 nm/£ 278 nm = 1,0 ± 0,1, atitinkantis FITC/baltymo molinį santykį maždaug 5;

e) tvarkymas ir laikymas: stabilus trejus metus po izoliavimo 2 °C–8 °C temperatūroje

A.5.2 Naudojimas pagal paskirtį

A.5.2.1 Bendroji dalis

Antikūnas skirtas naudoti srauto citometrijoje. Antikūnas gali būti naudojamas kokybiniam ir kiekybiniam T ląstelių aptikimui.

A.5.2.2 Medžiagos tipas (-ai).

Antikūnas gali būti naudojamas šviežių ir fiksuotų ląstelių suspensijoms, acetonu fiksuotoms kriostato sekcijoms ir ląstelių tepinėliams.

A.5.2.3 Antikūnų reaktyvumo tėkmės citometrijoje tyrimo procedūra

Išsami informacija apie gamintojo naudojamą metodiką yra tokia:

a) Surinkite veninį kraują į mėgintuvėlį, kuriame yra antikoaguliantų.

b) izoliuoti vienabranduolines ląsteles centrifuguojant atskyrimo terpėje; kitu atveju raudonieji kraujo kūneliai lizuojami po d punkte nurodytos inkubacijos pakopos.

c) Du kartus plaukite mononuklearines ląsteles RPMI 1640 arba fosfatu buferiniu fiziologiniu tirpalu (PBS) (0,1 mol/L fosfato, 0,15 mol/L NaCl, pH = 7,4).

d) Į 10 μl FITC konjuguotų monokloninių pelės anti-žmogaus T ląstelių, CD3 reagento, įpilkite ląstelių suspensijos, kurioje yra nuo 1 iki 10 e ląstelių (paprastai apie 100 ml), ir sumaišykite. Inkubuokite tamsoje 4 °C temperatūroje 30 min [dvigubo dažymo atveju tuo pačiu metu reikia pridėti R-fikoeritrino (RPE) konjuguoto antikūno].

f) du kartus plauti PBS + 2% galvijų serumo albumino; resuspenduokite ląsteles atitinkamame skystyje, kad galėtumėte analizuoti srauto citometru.

f) Kaip neigiamą kontrolę naudokite kitą FITC (fluoresceino izotiocianato) konjuguotą monokloninį antikūną.

e) Fiksuokite nusodintas ląsteles sumaišydami su 0,3 ml paraformaldehido, kurio masės dalis yra 1 % PBS. Laikant tamsoje 4°C temperatūroje, fiksuotos ląstelės gali būti laikomos iki dviejų savaičių.

h) Atlikite analizę srauto citometru.

A.5.2.4 Siūlomas skiedimas

Antikūnas turi būti naudojamas srauto citometrijai koncentruota forma (10 µl/gst). Norint naudoti kriostato pjūviuose ir ląstelių tepinėliuose, antikūnas turi būti sumaišytas su tinkamu skiedikliu (1 + 50) µl tūrio santykiu.

A.5.2.5 Tikėtini rezultatai

Antikūnas aptinka CD3 molekulę T ląstelių paviršiuje. Vertinant kriostato pjūvių ir ląstelių tepinėlių dažymą, reakcijos produktas turi būti lokalizuotas ant plazmos membranos.

Priedas TAIP (nuoroda)

Informacija apie etaloninių tarptautinių ir Europos regioninių standartų atitiktį Rusijos Federacijos nacionaliniams standartams

DA.1 lentelė

Referencinio tarptautinio standarto žymėjimas	laikymasis	Atitinkamo nacionalinio standarto pavadinimas ir pavadinimas




*Nėra atitinkamo nacionalinio standarto. Prieš patvirtinant, rekomenduojama
naudoti vertimą į rusų kalbą	šio tarptautinio standarto kalba. To vertimas
tarptautinis standartas yra federaliniame informacijos centras techninius reglamentus ir standartus.

RUSIJOS FEDERACIJOS NACIONALINIS STANDARTAS

MEDICINOS PRIETAISAI IN VITRO DIAGNOSTIKAI Gamintojo pateikta informacija su in vitro diagnostiniais reagentais, naudojamais dažymui biologijoje

In vitro diagnostikos medicinos prietaisai. Gamintojo pateikta informacija su in vitro diagnostiniais reagentais, skirtais dažymui biologijoje

Pristatymo data - 2014-08-01

1 naudojimo sritis

Šis standartas apibrėžia reikalavimus informacijai, kurią gamintojai teikia su reagentais, naudojamais dažymui biologijoje. Reikalavimai taikomi dažų, dažų, chromogeninių reagentų ir kitų biologijoje dažymui naudojamų reagentų gamintojams, tiekėjams ir prekybininkams. Šiame standarte nurodyti reikalavimai gamintojų teikiamai informacijai yra būtina sąlyga gauti palyginamus ir atkuriamus rezultatus visose biologijos dažymo srityse.

Šiame standarte naudojamos norminės nuorodos į šiuos tarptautinius ir Europos regioninius standartus:

ISO 31-8, Kiekiai ir vienetai. 8 dalis. Fizinė chemija ir molekulinė fizika (ISO 31-8, Kiekiai ir vienetai. 8 dalis. Fizinė chemija ir molekulinė fizika)

EH 375:2001, gamintojo pateikta informacija su profesionaliam naudojimui skirtais in vitro diagnostiniais reagentais

EH 376:2001, Gamintojo pateikta informacija su in vitro diagnostiniais reagentais savitikrai

Pastaba - naudojant šį standartą, patartina patikrinti etaloninių standartų galiojimą viešoje informacinėje sistemoje - oficialioje Federalinės techninio reguliavimo ir metrologijos agentūros svetainėje internete arba naudojant metinį informacijos indeksą „Nacionaliniai standartai“. , kuris buvo paskelbtas nuo einamųjų metų sausio 1 d., ir einamųjų metų mėnesinio informacijos rodyklės „Nacionaliniai standartai“ klausimais. Jei pakeičiamas nedatuotas pamatinis standartas, rekomenduojama naudoti dabartinę to standarto versiją, atsižvelgiant į visus tos versijos pakeitimus. Jei pakeičiamas datuotas pamatinis standartas, rekomenduojama naudoti to standarto versiją su pirmiau nurodytais patvirtinimo (priėmimo) metais. Jei po šio standarto patvirtinimo daromas nurodyto standarto, į kurį daroma nuoroda su data, pakeitimas, kuris turi įtakos nurodytai nuostatai, rekomenduojama tą nuostatą taikyti neatsižvelgiant į tą pakeitimą. Jei pamatinis standartas panaikinamas be pakeitimo, nuostatą, kurioje pateikiama nuoroda į jį, rekomenduojama taikyti toje dalyje, kuri neturi įtakos šiai nuorodai.

3 Terminai ir apibrėžimai

Šiame standarte vartojami šie terminai su atitinkamais apibrėžimais:

3.1 gamintojo pateikta informacija: visa spausdinta, rašytinė, grafinė ar kita informacija, pateikiama arba pridedama prie in vitro diagnostikos reagento.

3.2 Etiketė: bet kokia spausdinta, rašytinė ar grafinė informacija ant pakuotės.

Oficialus leidinys

3.3 In vitro diagnostinis reagentas: reagentas, naudojamas vienas arba kartu su kitais medicinos gaminiai in vitro diagnostika, gamintojo skirta žmogaus, gyvūninės ar augalinės kilmės medžiagų tyrimams in vitro, siekiant gauti informaciją, svarbią fiziologinei būklei, sveikatos būklei ar ligai ar įgimtai anomalijai nustatyti, diagnozuoti, stebėti ar gydyti.

3.4 dažymas: spalvos pridėjimas prie medžiagos reaguojant su dažais arba chromogeniniu reagentu.

3.5 dažiklis (dažiklis): spalvotas organinis junginys, kuris, ištirpęs tinkamame tirpiklyje, gali suteikti medžiagai spalvą.

Pastaba. Fizinė spalvos prigimtis yra selektyvi sugertis (ir (arba) emisija) matomoje elektromagnetinio spektro srityje tarp 400 ir 800 nm. Dažai – tai molekulės, turinčios dideles delokalizuotų elektronų sistemas (sujungtų elektronų sistemas). Dažiklio šviesos sugerties charakteristikos yra pavaizduotos sugerties spektru diagramos pavidalu, kuriame lyginamas šviesos sugertis ir bangos ilgis. Spektras ir bangos ilgis esant maksimaliai sugerčiai priklauso nuo dažo cheminės struktūros, tirpiklio ir spektrinio matavimo sąlygų.

3.6 dažai, dažai (beicas): vienos ar kelių dažiklių tam tikros koncentracijos tirpalas tam tikrame tirpiklyje, naudojamas dažymui.

PASTABA Dažai gali būti paruošti tiesiogiai ištirpinant dažiklį tirpiklyje arba skiedžiant paruoštą pradinį tirpalą tinkamomis medžiagomis.

3.6.1 pradinis beicų tirpalas: stabilus, apibrėžtas vieno ar kelių dažų tirpalas, kurio koncentracija didesnė nei naudojama dažymui.

PASTABA Stabilumas reiškia dažančiosios medžiagos savybių pastovumą net esant kitoms dažančioms medžiagoms.

3.7 chromogeninis reagentas: reagentas, kuris reaguoja su ląstelėse ir audiniuose esančiomis arba indukuotomis cheminėmis grupėmis, sudarydamas spalvotą junginį in situ.

Pavyzdys – tipiški chromogeniniai reagentai:

a) diazonio druska;

b) Šifo reagentas.

3.8 fluorochromas: reagentas, skleidžiantis matomą šviesą, kai yra apšvitintas trumpesnio bangos ilgio jaudinančia šviesa.

3.9 antikūnas (antikūnas): specifinis imunoglobulinas, kurį sudaro B limfocitai, reaguojant į imunogeninės medžiagos poveikį ir galintis prie jos prisijungti.

PASTABA Imunogeninės medžiagos molekulėje yra viena ar daugiau dalių su charakteristika cheminė sudėtis, epitopas.

3.9.1. polikloninis antikūnas: antikūnų, galinčių specifiškai reaguoti su specifine imunogenine medžiaga, mišinys.

3.9.2. Monokloninis antikūnas: antikūnas, galintis specifiškai reaguoti su vienu konkrečios imunogeninės medžiagos epitopu.

3.10 Nukleino rūgšties zondas: tam tikro ilgio viengrandis oligonukleotidas arba polinukleotidas, papildantis specifinę nukleorūgšties nukleotidų seką.

3.11 lektinas: neimunogeninės kilmės baltymas, turintis dvi ar daugiau surišimo vietų, atpažįstantis konkrečias sacharidų liekanas ir prie jų jungiantis.

4 Reikalavimai gamintojo pateiktai informacijai

4.1 Bendrieji reikalavimai

4.1.1 Gamintojo pateikta informacija apie reagentus, naudojamus dažymui biologijoje

Informacija, kurią gamintojas pateikia su reagentais, naudojamais biologiniam dažymui, turi atitikti ISO 31-8, ISO 1000, EN 375 ir EN 376. Ypatingas dėmesys Atkreipkite dėmesį į įspėjimus, pateiktus standarte EN 375. Be to, kai taikoma, 4.1.2, 4.1.3 ir 4.1.4 punktuose nurodyti reikalavimai turėtų būti taikomi įvairiems reagentams, naudojamiems dažymui biologijoje.

4.1.2 Produkto pavadinimas

Produkto pavadinime turi būti nurodytas CAS registracijos numeris ir dažo pavadinimas bei indekso numeris, jei taikoma.

1 pastaba – CAS registracijos numeriai yra cheminių medžiagų nuorodų tarnybos (CAS) registracijos numeriai. Tai yra cheminių medžiagų, kurioms Cheminių medžiagų nuorodų tarnyba priskyrė cheminių medžiagų indeksą, skaitmeniniai kodų numeriai.

2 pastaba – dažų indeksas suteikia 5 skaitmenų skaičių, C.I. numerį. ir specialiai sudarytas daugelio dažiklių pavadinimas.

4.1.3 Reagento aprašymas

Reagento aprašyme turi būti nurodyti atitinkami fiziniai ir cheminiai duomenys, kartu su kiekvienai partijai būdinga informacija. Duomenyse turi būti bent ši informacija:

a) molekulinė formulė, įskaitant priešjoną;

b) tiksliai nurodyta molinė masė (g/mol), su priešjonu arba be jo;

c) leistinos trukdančių medžiagų ribos;

Dažytiems organiniai junginiai duomenyse turi būti:

d) molinė absorbcija (vietoj jos gali būti nurodytas grynos dažiklio molekulės kiekis, bet ne viso dažiklio kiekis);

e) bangos ilgis arba bangų skaičius esant didžiausiai absorbcijai;

f) plonasluoksnės chromatografijos, didelio efektyvumo skysčių chromatografijos arba didelio efektyvumo plonasluoksnės chromatografijos duomenys.

4.1.4 Naudojimas pagal paskirtį

Turėtų būti pateiktas aprašymas, kuriame pateikiamos biologinio dažymo ir kiekybinių bei kokybinių procedūrų (jei taikoma) gairės. Informacija turėtų apimti informaciją apie šiuos dalykus:

a) biologinės medžiagos tipas (-ai), tvarkymas ir apdorojimas prieš dažymą, pavyzdžiui:

1) ar galima naudoti ląstelių ar audinių mėginius;

2) ar galima naudoti šaldytą ar chemiškai fiksuotą medžiagą;

3) audinių tvarkymo protokolas;

4) kokią fiksavimo priemonę galima naudoti;

b) išsami informacija apie atitinkamą reakcijos procedūrą, kurią gamintojas taiko dažų, dažų, chromogeninio reagento, fluorochromo, antikūnų, nukleorūgščių zondo arba lektino, naudojamo dažymui biologijoje, reaktyvumui tirti;

c) rezultatas (-ai), kurio (-ių) tikimasi iš reakcijos procedūros naudojant numatomą (-us) medžiagos tipą (-us), gamintojo numatytu būdu;

d) pastabos apie atitinkamą teigiamą arba neigiamą audinių kontrolę ir rezultato (-ų) aiškinimą;

4.2 Papildomi reikalavimai tam tikrų tipų reagentams

4.2.1 Fluorochromai

Nepriklausomai nuo naudojimo tipo, prie fluorochromų, siūlomų dažyti biologijoje, turi būti pateikta ši informacija:

a) selektyvumas, pavyzdžiui, apibūdinant tikslą (-us), kurį (-ius) galima įrodyti konkrečiomis sąlygomis; sužadinimo ir emisijos šviesos bangos ilgiai; su antikūnais susietiems fluorochromams – fluorochromo/baltymų (F/P) santykis.

4.2.2 Metalų druskos

Jei metalo turinčius junginius siūloma naudoti metalą sugeriantiems dažymo metodams biologijoje, turi būti pateikta ši papildoma informacija:

sisteminis pavadinimas; grynumas (be priemaišų).

4.2.3 Antikūnai

Kartu su antikūnais, siūlomais dažyti biologijoje, turi būti pateikta ši informacija:

a) antigeno (imunogeninės medžiagos), prieš kurį nukreiptas antikūnas, aprašymas ir, jei antigeną apibrėžia diferenciacijos sistemos klasteris – CD numeris. Aprašyme, jei reikia, turėtų būti nurodytas aptinkamos makromolekulės tipas, kurio dalis turi būti aptikta, ląstelių lokalizacija ir ląstelės arba audiniai, kuriuose ji randama, ir bet koks kryžminis reaktyvumas su kitais epitopais;

b) monokloniniams antikūnams – klonas, gamybos būdas (audinių kultūros supernatantas arba ascitinis skystis), imunoglobulino poklasis ir lengvosios grandinės tapatybė;

c) polikloniniams antikūnams – gyvūną šeimininką ir tai, ar naudojamas visas serumas arba imunoglobulino frakcija;

formos (tirpalo arba liofilizuotų miltelių) aprašymas, bendro baltymo ir specifinio antikūno kiekis, o tirpalo atveju – tirpiklio ar terpės pobūdis ir koncentracija;

f) jei taikoma, bet kokių molekulinių rišamųjų medžiagų arba pagalbinių medžiagų, pridėtų prie antikūno, aprašymas;

grynumo teiginys, gryninimo technika ir priemaišų aptikimo metodai (pvz., Western blotting, imunohistochemija);

4.2.4 Nukleino rūgščių zondai

Prie nukleorūgščių zondų, siūlomų dažyti biologijoje, turi būti pateikta ši informacija:

bazių seka ir tai, ar zondas yra vienos ar dvigubos spiralės; zondo molinė masė arba bazių skaičius ir, jei reikia, guanino ir citozino bazių porų frakcijų skaičius (procentais);

panaudotas žymeklis (radioaktyvus izotopas arba neradioaktyvioji molekulė), prisitvirtinimo prie zondo vieta (3" ir (arba) 5") ir zonde pažymėtos medžiagos procentinė dalis; aptinkamas geno taikinys (DNR arba RNR seka);

e) formos (liofilizuoti milteliai arba tirpalas) ir kiekio (pg arba pmol) arba koncentracijos (pg/ml arba pmol/ml), jei taikoma, ir, jei tai yra tirpalas, pobūdis ir koncentracija. tirpiklis arba terpė;

f) pareiškimas apie grynumą, gryninimo procedūras ir priemaišų aptikimo metodus, pvz., didelio efektyvumo skysčių chromatografiją;

A priedas (nuoroda)

Gamintojo pateiktos informacijos su dažniausiai naudojamais reagentais pavyzdžiai

naudojant biologinio dažymo metodus

A.1 Bendrosios nuostatos

Toliau pateiktoje informacijoje pateikiami procedūrų pavyzdžiai ir ji neturėtų būti traktuojama kaip vienintelis kelias atliktina procedūra. Gamintojas gali naudoti šias procedūras, kad patikrintų dažiklių reaktyvumą ir parodytų, kaip gamintojas gali pateikti informaciją, kad būtų laikomasi šio standarto.

A.2 Metilo žalieji dažai-pironinas Y A.2.1 Metilo žalieji dažai

Informacija apie metilo žalius dažus yra tokia:

a) produkto tapatybė:

Metilo žalia (sinonimai: dvigubai žalias SF, šviesiai žalias);

CAS registracijos numeris: 22383-16-0;

Pavadinimas ir spalvos indekso numeris: bazinė mėlyna 20, 42585;

b) sudėtis:

Molekulinė formulė, įskaitant priešjoną: C 2 bH33M 3 2 + 2BF4";

Molinė masė su (arba be) priešjono: 561,17 g mol" 1 (387,56 g

Metilžaliojo katijono masės dalis (turinys): 85%, nustatyta naudojant absorbcinę spektrometriją;

Leidžiamos trukdančių medžiagų ribos, pateiktos masės dalimis:

1) vanduo: mažiau nei 1 %;

2) neorganinės druskos: mažiau nei 0,1 %;

3) plovikliai: nėra;

4) spalvotos priemaišos, įskaitant violetinius kristalus: neaptinkamos plonasluoksnės chromatografijos būdu;

5) indiferentiniai junginiai: 14% tirpaus krakmolo;

d) plonasluoksnė chromatografija: yra tik vienas pagrindinis komponentas, atitinkantis

metilo žalia;

e) Naudojimas ir laikymas: Stabilus, kai laikomas kruopščiai uždarytame rudame butelyje kambario temperatūroje (nuo 18°C iki 28°C).

A.2.2 Etilo žalieji dažai

Informacija apie etilo žalią dažą yra tokia:

a) produkto tapatybė:

1) etilo žalia (sinonimas: metilo žalia);

2) CAS registracijos numeris: 7114-03-6;

3) dažų pavadinimas ir indekso numeris: pavadinimas neįtrauktas į dažų indeksą, 42590;

b) sudėtis:

1) molekulinė formulė, įskaitant priešjoną: C27H 3 5N 3 2+ 2 BF4";

2) molinė masė su (arba be) priešjono: 575,19 g mol" 1 (401,58 g mol" 1);

3) etilo žaliojo katijono masės dalis: 85%, nustatyta naudojant absorbcinę spektrometriją;

Vanduo: mažiau nei 1%;

Plovikliai: nėra;

c) dažiklio tirpalo didžiausios sugerties bangos ilgis: 633 nm;

d) plonasluoksnė chromatografija: yra tik vienas pagrindinis komponentas, ty etilo žalia;

A.2.3 Pironino Y dažai

Ši informacija taikoma dažikliui pironinui Y:

a) produkto tapatybė:

1) pironinas Y (sinonimai: pironinas Y, pironinas G, pironinas G);

2) CAS registracijos numeris: 92-32-0;

3) pavadinimas ir numeris dažų rodyklėje: pavadinimo dažų indekse nėra, 45005;

b) sudėtis:

1) molekulinė formulė, įskaitant priešjoną: Ci7HigN20 + SG;

2) molinė masė su priešjonu (arba be jo): 302,75 g mol" 1 (267,30 g mol" 1);

3) pironino Y katijono masės dalis: 80%, nustatyta naudojant absorbcinę spektrometriją;

4) leistinos trukdančių medžiagų ribos, pateiktos masės dalimis:

Vanduo: mažiau nei 1%;

Neorganinės druskos: mažiau nei 0,1 %;

Plovikliai: nėra;

Spalvotos priemaišos, įskaitant violetinius kristalus: neaptinkamos plonasluoksnės chromatografijos būdu;

Indiferentiniai junginiai: 19% tirpaus krakmolo;

c) dažiklio tirpalo didžiausios sugerties bangos ilgis: 550 nm;

d) plonasluoksnė chromatografija: yra tik vienas pagrindinis komponentas, kuris sutampa su pironinu Y;

e) Naudojimas ir laikymas: Stabilus, kai laikomas gerai uždarytame rudo stiklo butelyje kambario temperatūroje nuo 18°C iki 28°C.

A.2.4. Numatomas metilo žalio pironino Y dažymo metodo taikymas

A.2.4.1 Medžiagos tipas (-ai).

Metilo žalia-pironino dažai Y naudojami šviežiai šaldytoms, parafininėms ar plastikinėms audinių pjūviams dažyti. įvairių tipų.

A.2.4.2 Tvarkymas ir apdorojimas prieš dažymą Galimos fiksavimo priemonės:

Carnoy skystis [etanolis (99% tūrio) + chloroformas + acto rūgštis (99% tūrio), sumaišytas (60 + 30 + 10) ml] arba

Formaldehidas (masės dalis 3,6%), buferinis fosfatas (pH = 7,0); įprastas džiovinimas, valymas, mirkymas ir dengimas parafinu, įprastas pjūvio paruošimas naudojant mikrotomą.

A.2.4.3 Darbinis sprendimas

Paruoškite etilo žalios arba metilo žalios spalvos tirpalą iš 0,15 g gryno dažiklio masės, skaičiuojant kaip spalvotas katijonas (aukščiau pateiktuose pavyzdžiuose – 0,176 g) 90 ml karšto (temperatūra 50 °C). ) Distiliuotas vanduo.

10 ml 0,1 mol/l ftalato buferio (pH = 4,0) ištirpinkite kiekį, atitinkantį 0,03 g pironino Y masę, apskaičiuotą kaip spalvotą katijoną (0,038 g aukščiau pateiktame pavyzdyje). Paskutinį tirpalą sumaišykite su etilo žalios arba metilo žalios spalvos tirpalu.

A.2.4.4 Stabilumas

Darbinis tirpalas yra stabilus mažiausiai vieną savaitę, kai laikomas sandariai uždarytame rudo stiklo butelyje kambario temperatūroje nuo 18°C iki 28°C.

A.2.4.5 Dažymo procedūra A.2.4.5.1 Nuvalykite pjūvius vašku.

A.2.4.5.2 Sušlapinkite sekcijas.

A.2.4.5.3 Dažykite sekcijas 5 minutes kambario temperatūroje apie 22 °C darbinėje

sprendimas.

A.2.4.5.4 Sekcijas nuplaukite du kartus keisdami distiliuotą vandenį po 2–3 s.

A.2.4.5.5 Nukratykite vandens perteklių.

A.2.4.5.6 Suaktyvinti tris kartus pakeitus 1-butanolį.

A.2.4.5.7 Perkelkite tiesiai iš 1-butanolio į hidrofobinę sintetinę dervą.

A.2.4.6 Numatomas (-i) rezultatas (-ai)

Tikimasi šių rezultatų naudojant A.2.4.1 nurodytas medžiagas:

a) branduoliniam chromatinui: žalia (Karnovo fiksatorius) arba mėlyna (formaldehido fiksatorius); a) branduoliams ir citoplazmai, turintiems daug ribosomų: raudona (Karnovo fiksatorius) arba alyvinė raudona (formaldehido fiksatorius);

c) kremzlės matricai ir putliųjų ląstelių granulėms: oranžinė;

d) raumenims, kolagenui ir raudoniesiems kraujo kūneliams: nedažyti.

A.3 Feulgen-Schiff reakcija

A.3.1 Pararozanilino dažai

ĮSPĖJIMAS – R 40: galima rizika negrįžtamus padarinius.

S 36/37: Reikalingi apsauginiai drabužiai ir pirštinės.

Toliau pateikta informacija taikoma dažikliui pararosanilinas.

a) produkto tapatybė:

1) pararosanilinas (sinonimai: bazinis rubinas, parafuksinas, paramagenta, purpurinė 0);

2) CAS registracijos numeris: 569-61-9;

3) dažų pavadinimas ir indekso numeris: pagrindinis raudonas 9, 42500;

b) sudėtis:

1) molekulinė formulė, įskaitant priešjoną: Ci9Hi 8 N 3 + SG;

2) molinė masė su (ir be) antijono: 323,73 g mol" 1 (288,28 g mol" 1);

3) pararosanilino katijono masės dalis: 85%, nustatyta naudojant absorbcinę spektrometriją;

4) leistinos trukdančių medžiagų ribos, pateiktos masės dalimis:

Vanduo: mažiau nei 1%;

Neorganinės druskos: mažiau nei 0,1 %;

Plovikliai: nėra;

Spalvotos priemaišos: metilinti pararosanilino homologai gali būti nedideli kiekiai, nustatyti plonasluoksnės chromatografijos būdu, tačiau akridino nėra;

Indiferentiniai junginiai: 14% tirpaus krakmolo;

c) dažiklio tirpalo didžiausios sugerties bangos ilgis: 542 nm;

d) plonasluoksnė chromatografija: yra vienas pagrindinis komponentas, atitinkantis

pararosanilinas; metilinti pararosanilino homologai nedideliais kiekiais;

e) Naudojimas ir laikymas: Stabilus, kai laikomas kruopščiai uždarytame rudame butelyje kambario temperatūroje nuo 18°C iki 28°C.

A.3.2 Numatytas Feulgen-Schiff reakcijos naudojimas

A.3.2.1 Medžiagos tipas (-ai).

Feulgen-Schiff reakcija naudojama įvairių tipų audinių ar citologinės medžiagos (tepinėlio, audinių atspaudo, ląstelių kultūros, vienasluoksnio) parafino ar plastiko pjūviams:

A.3.2.2 Tvarkymas ir apdorojimas prieš dažymą

A.3.2.2.1 Galimos fiksavimo priemonės

Galimi fiksatoriai:

a) histologija: formaldehidas (masės dalis 3,6%), buferinis fosfatas (pH = 7,0);

b) citologija:

1) skysta fiksavimo medžiaga: etanolis (tūrio dalis 96%);

2) ore išdžiovinta medžiaga:

Formaldehidas (masės dalis 3,6%), buferinis fosfatas;

Metanolis + formaldehidas (masės dalis 37%) + acto rūgštis (masės dalis 100%), sumaišyti tūriais (85 +10 + 5) ml.

Buinos fiksatoriuje užfiksuota medžiaga šiai reakcijai netinkama.

Išsami informacija apie gamintojo chromogeninio reagento reaktyvumo bandymo procedūrą pateikta A.3.2.2.2–A.3.2.4.

A.3.2.2.2 Pararozanilino-Šifo reagentas

Ištirpinkite 0,5 g pararosanilino chlorido 15 ml 1 mol/l druskos rūgšties. Įpilama 85 ml vandeninio K 2 S 2 0 5 tirpalo (masės dalis 0,5 %). Palaukite 24 val.. 100 ml šio tirpalo suplakite su 0,3 g anglis 2 minutes ir filtruokite. Laikyti bespalvį skystį ne žemesnėje kaip 5 °C temperatūroje. Tirpalas yra stabilus mažiausiai 12 mėnesių sandariai uždarytoje talpyklėje.

A.3.2.2.3 Plovimo tirpalas

85 ml distiliuoto vandens ištirpinkite 0,5 g K 2 S 2 O s. Įpilama 15 ml 1 mol/l druskos rūgšties. Tirpalas yra paruoštas naudoti nedelsiant ir gali būti naudojamas per 12 valandų.

A.3.2.3 Dažymo procedūra

A.3.2.3.1 Parafino sekcijas nuvaškuokite ksilene 5 min., tada plaukite 2 min., pirmiausia 99 % tūrio etanolyje, o paskui 50 % tūrio etanolyje.

A.3.2.3.2. Drėgnos plastiko sekcijos, parafino pjūviai iš parafino ir citologinė medžiaga 2 minutes distiliuotame vandenyje.

A.3.2.3.3 Hidrolizuokite medžiagą 5 mol/l vandenilio chlorido rūgštyje 22 °C temperatūroje 30–60 minučių (tiksli hidrolizės trukmė priklauso nuo medžiagos tipo).

A.3.2.3.4 Skalaukite distiliuotu vandeniu 2 minutes.

A.3.2.3.5 Dažykite pararosanilino reagentu 1 valandą.

A.3.2.3.6 Nuplaukite tris kartus iš eilės keisdami plovimo tirpalą po 5 minutes.

A.3.2.3.7 Du kartus skalaukite distiliuotu vandeniu po 5 minutes.

A.3.2.3.8 Dehidratuoti 50 % tūrio etanolyje, po to 70 % ir galiausiai 99 % etanolyje kiekvieną kartą po 3 minutes.

A.3.2.3.9 Du kartus plaukite ksilene, kiekvieną kartą po 5 minutes.

A.3.2.3.10 Ekstrahuoti į sintetinę hidrofobinę dervą.

A.3.2.4 Tikėtini rezultatai

Tikimasi šių rezultatų naudojant A.3.2.1 nurodytas medžiagas:

Ląstelių branduoliams (DNR): raudona.

A.4 Imunocheminis estrogenų receptorių demonstravimas

ĮSPĖJIMAS – Reagentas, kurio sudėtyje yra natrio azido (15 mmol/L). NaN 3 gali reaguoti su švinu arba variu, sudarydamas sprogius metalo azidus. Išimdami nuplaukite dideliu kiekiu vandens.

A.4.1 Monokloninis pelės anti-žmogaus estrogeno receptorius

Toliau pateikta informacija taikoma monokloniniams pelės anti-žmogaus estrogeno receptoriams.

a) produkto tapatybė: monokloninis pelės anti-žmogaus estrogeno receptorius, klonas 1D5;

b) klonas: 1D5;

c) imunogenas: rekombinantinis žmogaus estrogeno receptoriaus baltymas;

d) antikūnų šaltinis: pelės monokloninis antikūnas, tiekiamas skystu pavidalu kaip audinių kultūros supernatantas;

e) specifiškumas: antikūnas reaguoja su receptoriaus L-galiniu domenu (A/B regionu). Imunoblotuojant jis reaguoja su 67 kDa polipeptidine grandine, gauta transformuojant Escherichia coli ir transfekuojant COS ląsteles plazmidiniais vektoriais, ekspresuojančiais estrogeno receptorių. Be to, antikūnas reaguoja su citozoliniais lutealinio endometriumo ekstraktais ir MCF-7 žmogaus krūties vėžio ląstelėmis;

f) kryžminis reaktyvumas: antikūnas reaguoja su žiurkės estrogeno receptoriais;

e) sudėtis: audinių kultūros supernatantas (RPMI 1640 terpė su veršelio vaisiaus serumu), dializuota prieš 0,05 mmol/L Tris/HCl, pH = 7,2, turinčio 15 mmol/L NaN3.

Ig koncentracija: 245 mg/l;

Ig izotipas: IgGI;

Šviesos grandinės tapatybė: kappa;

Bendra baltymų koncentracija: 14,9 g/l;

h) tvarkymas ir laikymas: stabilus iki trejų metų, kai laikymo temperatūra yra nuo 2 °C iki 8 °C.

A.4.2 Naudojimas pagal paskirtį

A.4.2.1 Bendroji dalis

Antikūnas naudojamas kokybiniam ir pusiau kiekybiniam estrogenų receptorių ekspresijos aptikimui (pvz., krūties vėžiui).

A.4.2.2 Medžiagos tipas (-ai).

Antikūnas gali būti dedamas ant formalinu fiksuotų parafino pjūvių, acetonu fiksuotų šaldytų pjūvių ir ląstelių tepinėlių. Be to, antikūnas gali būti naudojamas antikūnams aptikti naudojant fermentinį imunosorbentinį tyrimą (ELISA).

A.4.2.3 Dažymo procedūra imunohistochemijai

A.4.2.3.1 Bendroji dalis

Formalinu fiksuotų parafininių audinių pjūviams naudojamos įvairios jautrios dažymo technologijos, įskaitant imunoperoksidazės, APAAP (šarminės fosfatazės anti-šarminės fosfatazės) ir avidino-biotino metodus, tokius kaip LSAB (labeled StreptAvidin-Biotin) metodai. Antigeno pokyčiai, pvz., kaitinimas 10 mmol/L citratiniame buferyje, pH = 6,0, yra privalomi. Šio apdorojimo metu arba tolesnės imunohistocheminės dažymo procedūros metu stiklelių negalima išdžiūti. Ląstelių tepinėlių dažymui buvo pasiūlytas APAAP metodas.

Išsami informacija apie procedūrą, kurią gamintojas taiko formalinu fiksuotų parafininių audinių pjūviuose, kad ištirtų antikūnų reaktyvumą imunohistochemijos atžvilgiu, pateikta A.4.2.3.2–A.4.2.3.4.

A.4.2.3.2 Reagentai

A.4.2.3.2.1 Vandenilio peroksidas, 3 % masės dalis distiliuotame vandenyje.

A.4.2.3.2.2 Tris buferinis druskos tirpalas (TBS), susidedantis iš 0,05 mol/l Tris/HCl ir 0,15 mol/l NaCI, esant pH =

A.4.2.3.2.3 Pirminis antikūnas, sudarytas iš monokloninio pelės anti-žmogaus estrogeno receptoriaus, optimaliai atskiesto TBS (žr. A.4.2.3.4).

A.4.2.3.2.4 Biotinilintas ožkų anti-pelės/triušio imunoglobulino antikūnas, veikiantis

Šį tirpalą paruoškite likus ne mažiau kaip 30 minučių, bet ne anksčiau kaip 12 valandų prieš naudojimą, taip:

5 ml TBS, pH = 7,6;

50 µl biotinilinto, afinitetu izoliuoto ožkos anti-pelės/triušio imunoglobulino antikūno 0,01 mol/l fosfato buferiniame tirpale, 15 mmol/l N3, pakankamu kiekiu, kad galutinė koncentracija būtų 10-20 mg/ml.

A.4.2.3.2.5 StreptAvidino-biotino/krienų peroksidazės kompleksas (StreptABComplex/HRP), veikiantis

Paruoškite šį tirpalą taip:

5 ml TBS, pH = 7,6;

50 µl StreptAvidin (1 mg/l) 0,01 mol/l fosfatinio buferinio tirpalo, 15 mmol/l NaN 3;

50 μl biotinilinto krienų peroksidazės (0,25 mg/l) 0,01 mol/l fosfatiniame buferiniame tirpale, 15 mmol/l NaN 3;

A.4.2.3.2.6 Diaminbenzidino substrato (DAB) tirpalas

Ištirpinkite 6 mg 3,3"-diaminobenzidino tetrahidrochlorido 10 ml 0,05 mol/l TBS, pH = 7,6. Įpilkite 0,1 ml vandenilio peroksido, kurio masės dalis yra 3% distiliuotame vandenyje. Jei atsiranda nuosėdų, filtruokite.

A.4.2.3.2.7 Hematoksilinas

750 ml distiliuoto vandens ištirpinkite 1 g hematoksilino, 50 g aliuminio kalio sulfato, 0,1 g natrio jodato ir 1,0 g citrinos rūgšties. Skiedžiama distiliuotu vandeniu iki 1000 ml.

Vitrinito atspindys apskaičiuojamas tiek ore R a, tiek panardinant į aliejų R o . r. Pagal R o vertę. r akmens anglių klasė vertinama pramoninėje-genetinėje klasifikacijoje (GOST 25543-88).

Fig. 2.1 parodytas ryšys tarp apskaičiuotos parametro reikšmės ir vitrinito atspindžio rodiklio ore R a.

Tarp ir R a yra glaudi koreliacija: poros koreliacijos koeficientas r = 0,996, determinacijos koeficientas 0,992.

2.1 pav. Ryšys tarp anglies parametro ir rodiklio

vitrinito atspindžiai ore R a (šviesūs ir tamsūs taškai -

įvairių šaltinių)

Pateikta priklausomybė apibūdinama lygtimi:

Ra = 1,17 - 2,01. (2.6)

Tarp apskaičiuotos vertės ir vitrinito atspindžio indekso panardinant į aliejų R o. r ryšys yra netiesinis. Tyrimo rezultatai parodė, kad tarp vitrinito struktūrinio parametro (Vt) ir liptinito (L) bei inertinito (I) rodiklių yra tiesioginis ryšys.

Kuzbaso anglims santykis tarp R o rodiklių. r ir taip:

R o. r = 5,493 - 1,3797 + 0,09689 2. (2.7)

2.2 paveiksle parodytas ryšys tarp vitrinito atspindžio rodiklių panardinant į aliejų R o. r (op) ir apskaičiuojamas pagal (2.7) lygtį R o . r (apskaičiuota).

2.2 pav. Koreliacija tarp patyrusių R o. r (op) ir apskaičiuotas R o . r (apskaičiuota)

Kuzbaso anglių vitrinito atspindžio indekso vertės

Parodyta pav. 2.2 grafinė priklausomybė apibūdinama šiais statistiniais rodikliais: r = 0,990; R2 = 0,9801.

Taigi parametras vienareikšmiškai apibūdina metamorfizmo laipsnį kietosios anglies.

2.3. Faktinis anglies tankis d r

Ar svarbiausia fizinės savybės TGI. Naudota

skaičiuojant kuro poringumą, jų apdorojimo procesus ir aparatus ir kt.

Faktinis anglies tankis d r apskaičiuojamas pagal adityvumą, atsižvelgiant į anglies, vandenilio, azoto, deguonies ir sieros molių skaičių, taip pat į mineralinius komponentus pagal lygtį:

d = V o d + ΣV Mi d Mi + 0,021, (2,8)

čia V o ir V – organinių medžiagų ir atskirų mineralinių priemaišų tūrinis kiekis anglyje vieneto dalimis, %;

d ir d Mi – akmens anglių ir mineralinių priemaišų organinės masės faktinių tankių reikšmės;

0,021 yra pataisos koeficientas.

Anglies organinės masės tankis apskaičiuojamas 100 g jos masės d 100;

d 100 = 100 / V 100 , (2.9)

kur vertė V 100 yra organinės masės tūrinis kiekis anglise, vieneto dalys. Nustatyta pagal lygtį:

V 100 = n C + H n H + N n N + O n O + S n S , (2.10)

kur n C o , n H o , n N o , n O o ir n S o yra anglies, vandenilio, azoto ir sieros molių skaičius 100 g masinio naikinimo ginklų;

H, N, O ir S yra empiriniai koeficientai, nustatyti eksperimentiniu būdu įvairioms anglims.

Anglies vitrinito V 100 skaičiavimo lygtis, kai anglies kiekis OMU yra nuo 70,5 % iki 95,0 %, turi tokią formą

V 100 = 5,35 C o + 5,32 H o + 81,61 N o + 4,06 O o + 119,20 S o (2,11)

2.3 paveiksle pavaizduotas grafinis anglies vitrinito tankio apskaičiuotųjų ir faktinių verčių ryšys, t.y. d = (d)

Tarp apskaičiuotų ir eksperimentinių tikrojo vitrinito tankio verčių yra glaudus ryšys. Šiuo atveju daugkartinės koreliacijos koeficientas yra 0,998, o determinacijos koeficientas yra 0,9960.

2.3 pav. Skaičiuojamojo ir eksperimentinio palyginimas

vitrinito tikrojo tankio vertės

Lakiųjų medžiagų išsiskyrimas

Apskaičiuota naudojant lygtį:

V daf = V x Vt + V x L + V x I (2.12)

čia x Vt , x L ir x I yra vitrinito, liptinito ir inertinito dalis anglies sudėtyje (x Vt + x L + x I = 1);

V , V ir V – lakiųjų medžiagų išsiskyrimo iš vitrinito, liptinito ir inertinito priklausomybė nuo parametro:

V = 63,608 + (2,389–0,6527 Vt) Vt, (2,7)

V = 109,344–8,439 L, (2,8)

V = 20,23 exp [ (0,4478 – 0,1218 L) (L – 10,26)], (2,9)

kur Vt, L ir I yra vitrinito, liptinito ir inertinito parametrų reikšmės pagal jų elementinę sudėtį.

2.4 paveiksle parodytas ryšys tarp apskaičiuotos lakiųjų medžiagų išeigos sausoje, be pelenų būsenoje ir nustatytos pagal GOST. Poros koreliacijos koeficientas yra r = 0,986, o determinacijos koeficientas yra R 2 = 0,972.

2.4 pav. Eksperimentinių V daf (op) ir apskaičiuotų V daf (calc) reikšmių palyginimas

lakiųjų medžiagų išsiskyrimo iš petrografiškai nevienalyčių anglių mažinimas

Kuznecko baseinas

Ryšys tarp parametro ir lakiųjų medžiagų išsiskyrimo iš anglies telkinių Pietų Afrikoje, JAV ir Australijoje parodytas Fig. 2.5.

2.5 pav. Lakiųjų medžiagų išeigos V daf priklausomybė nuo struktūrinės ir cheminės

vitrinito anglies parametrai:

1 – Kuznecko anglies baseinas;

2 – Pietų Afrikos, JAV ir Australijos anglies telkiniai.

Kaip matyti iš paveikslo duomenų, ryšys su lakiųjų medžiagų išmetimu iš šių šalių yra labai glaudus. Poros koreliacijos koeficientas yra 0,969, determinacijos koeficientas yra 0,939. Taigi šis parametras leidžia labai patikimai numatyti lakiųjų medžiagų išsiskyrimą iš anglies telkinių visame pasaulyje.

Degimo šiluma Q

Svarbiausia savybė TGI kaip energetinis kuras parodo galimą šilumos kiekį, kuris išsiskiria deginant 1 kg kietojo ar skystojo arba 1 m 3 dujinio kuro.

Yra didesnės (Q S) ir mažesnės (Q i) kuro degimo kaloringumo vertės.

Didesnis šilumingumas nustatomas kolorimetru, atsižvelgiant į vandens garų kondensacijos šilumą, susidariusią deginant kurą.

Šilumingumo skaičiavimas kietojo kuro pagamintas pagal D. I. Mendelejevo formulę, remiantis elementų sudėties duomenimis:

Q = 4,184 [81C daf +300H daf +26 (S - O daf)], (2,16)

kur Q yra žemesnė šilumingumas, kJ/kg;

4,184 – perskaičiavimo koeficientas iš kcal į mJ.

TGI tyrimų rezultatų duomenys parodė, kad, atsižvelgiant į neidentiškas anglies susidarymo sąlygas anglies baseinuose, C daf, H daf, S ir O daf koeficientų reikšmė skirsis ir skaičiavimo formulė. degimo šiluma turi tokią formą:

Q = 4,184, (2,17)

čia q C, q H, q SO yra įvairių anglies telkinių eksperimentiniu būdu nustatyti koeficientai.

Lentelėje 2.1 parodytos regresinės lygtys, skirtos apskaičiuoti anglies iš įvairių Rusijos Federacijos TGI telkinių žemesnę šiluminę vertę.

2.1 lentelė – Anglies bombos žemesnio šilumingumo skaičiavimo lygtys

įvairiuose Rusijos Federacijos baseinuose

Lentelėje pateiktos poros koreliacijos koeficiento reikšmės tarp degimo karščių, apskaičiuotų pagal lygtis ir nustatytos iš bombos, rodo jų glaudų ryšį. Šiuo atveju determinacijos koeficientas svyruoja nuo 0,9804 iki 0,9880.

Fusainizuotų komponentų skaičius ∑OK lemia akmens anglių kategoriją ir leidžia kartu su kitais rodikliais įvertinti anglies naudojimą koksavimo technologijoje.

Parametras ∑OK yra inertinito I ir dalies (2/3) semivitrinito S v anglyje suma:

∑Gerai = I+ 2/3 S v. (2.18)

Tyrimo rezultatai rodo, kad liesų komponentų kiekis anglyse labiausiai koreliuoja su bendra parametrų ir H/C įtaka. ∑OK apskaičiavimo lygtis yra tokia:

∑Gerai = b 0 + b 1 + b 2 (H/C) + b 3 (H/C) + b 4 (H/C) 2 + b 5 2 . (2.19)

Įvairių rūšių anglies ir krūvio iš Kuznecko baseino santykio ∑OK porinis koreliacijos koeficientas svyruoja nuo 0,891 iki 0,956.

Nustatyta, kad yra didesnė koreliacija tarp apskaičiuotų ∑OC verčių pagal lygtis ir tų, kurios buvo eksperimentiškai nustatytos vidutiniškai metamorfuotoms anglims. Ryšys tarp ∑OK ir didesnio metamorfizmo laipsnio anglių mažėja.

PRISTATO Rusijos Gosstandart

2. PRIIMTA Tarpvalstybinės standartizacijos, metrologijos ir sertifikavimo tarybos (1994 m. spalio 21 d. protokolas Nr. 6-94)

Valstybės pavadinimas	Nacionalinės standartizacijos institucijos pavadinimas
Azerbaidžano Respublika	Azgosstandart
Armėnijos Respublika	Armgosstandartas
Baltarusijos Respublika	Belgosstandartas
Gruzijos Respublika	Gruzstandart
Kazachstano Respublika	Kazachstano Respublikos Gosstandartas
Kirgizijos Respublika	Kirgizijos standartas
Moldovos Respublika	Moldovos standartas
Rusijos Federacija	Rusijos Gosstandartas
Uzbekistano Respublika	Uzgosstandartas
	Ukrainos valstybinis standartas

3. Šis standartas yra visas autentiškas ISO 7404-5-85 „Bituminės ir antracitinės anglys. Petrografinės analizės metodai. 5 dalis. Vitrinito atspindžio rodiklių mikroskopinio nustatymo metodas“ ir pateikiami papildomi reikalavimai, atspindintys šalies ūkio poreikius.

4. PAKEITIMAS GOST 12113-83

Įvedimo data 1996-01-01

Šis standartas taikomas rudosioms anglims, bituminėms anglims, antracitinėms anglims, anglių mišiniams, kietoms disperguotoms organinėms medžiagoms ir anglies turinčioms medžiagoms ir nustato atspindžio rodiklių nustatymo metodą.

Vitrinito atspindžio indeksas naudojamas anglies metamorfizmo laipsniui apibūdinti ieškant ir žvalgant, kasant ir klasifikuojant, nustatyti kietų disperguotų organinių medžiagų termogenetinę transformaciją nuosėdinėse uolienose, taip pat nustatyti anglies mišinių sudėtį sodrinimo metu. ir koksavimas.

Kursyvu paryškinti papildomi reikalavimai, atspindintys šalies ūkio poreikius.

1. TIKSLAS IR TAIKYMO SRITIS

Šis standartas apibrėžia mažiausio, didžiausio ir savavališko atspindžio nustatymo metodą naudojant imersinį alyvos mikroskopą. ir ore ant poliruotų paviršių poliruoti briketai ir šlifuoti pavyzdžiai anglies vitrinito komponentas.

GOST 12112-78 Rudos anglys. Petrografinės sudėties nustatymo metodas

GOST 9414.2-93 Akmens anglys ir antracitas. Petrografinės analizės metodai. 2 dalis. Anglies mėginių paruošimo būdas

3. METODO ESMĖ

Metodo esmė – išmatuoti ir palyginti elektros sroves, kylančias fotodaugiklio vamzdyje (PMT), veikiant šviesos srautui, atsispindinčiam nuo tiriamojo mėginio ir standartinių mėginių (etalonų) poliruotų paviršių, kurių atspindžio koeficientas yra nustatytas. indeksas.

4. MĖGINIŲ ĖMIMAS IR MĖGINIŲ PARUOŠIMAS

4.1. Mėginių ėmimas poliruotiems briketams ruošti atliekamas pagal GOST 10742.

4.2. Poliruoti briketai gaminami pagal GOST 9414.2.

Iš mėginių, skirtų atspindžio rodikliams matuoti su reflektogramų konstrukcija, padaromi du poliruoti briketai, kurių skersmuo ne mažesnis kaip 20 mm.

4.3. Norint paruošti poliruotus briketus iš uolienų su kietų disperguotų organinių medžiagų intarpais, susmulkinta uoliena pirmiausiai sodrinama, pavyzdžiui, flotuojant, cheminiu būdu skaidant neorganinę uolienų dalį ir kt.

4.4. Poliruotiems anglies pavyzdžiams paruošti imami pavyzdžiai iš pagrindinių darinį formuojančių litotipų, kurių dydis ne mažesnis kaip 30×30×30 mm. Imant mėginius iš gręžinių šerdies, leidžiama imti 20×20×20 mm matmenų mėginius.

4.5. Norint paruošti poliruotus pavyzdžius iš uolienų su kietų disperguotų organinių medžiagų intarpais, parenkami mėginiai, kuriuose mikroskopiškai matomi kietos organinės medžiagos intarpai arba galima daryti prielaidą, kad jie yra pagal nuosėdų tipą. Mėginių dydis priklauso nuo mėginių ėmimo galimybės (natūralios atodangos, kasyklos, gręžinių šerdys).

4.6. Poliruotų mėginių paruošimas susideda iš trijų operacijų: impregnavimo, siekiant suteikti mėginiams tvirtumo ir tvirtumo vėlesniam šlifavimui ir poliravimui.

4.6.1. Kaip impregnavimo priemonės naudojamos sintetinės dervos, karnaubo vaškas, kanifolija su ksilenu ir kt.

Kai kurių tipų anglims ir uolienoms, kuriose yra kietų dispersinių organinių medžiagų, pakanka panardinti mėginį į impregnavimo priemonę.

Jei mėginys yra pakankamai tvirtas, paviršius, statmenas sluoksniavimo plokštumai, lengvai nušlifuojamas.

Silpnai sutankintų smėlingų-molingų uolienų, kuriose yra nedidelių išsibarsčiusių organinių intarpų, mėginiai džiovinami krosnyje 70 °C temperatūroje 48 valandas prieš mirkant kanifolijoje ir ksilene.

Mėginiai surišami viela, prie kurios galo pritvirtinama etiketė su pasu, ir vienu sluoksniu dedami į porcelianinį puodelį, į jį pilama kanifolija, susmulkinta į 3–7 mm dydžio grūdelius, ir užpildoma. ksilenu (3 cm 3 1 g kanifolijos), kad mėginiai būtų visiškai padengti tirpalu.

Impregnavimas atliekamas traukos gaubte, kaitinant ant uždaros plytelės 50 - 60 minučių, kol ksilenas visiškai išgaruos. Tada mėginiai išimami iš lėkštelės ir atšaldomi iki kambario temperatūros.

4.6.2. Dvi viena kitai lygiagrečias impregnuoto mėginio plokštumas, statmenas sluoksniui, nušlifuoti ir vieną iš jų nupoliruoti.

Šlifavimas ir poliravimas atliekamas pagal GOST R 50177.2 ir GOST 12113.

4.7. Tiriant poliruotus briketus ir poliruotus bandinius, kurie buvo saugomi ilgą laiką, taip pat anksčiau išmatuotus mėginius, prieš matuojant atspindžio rodiklį, juos reikia nušlifuoti 1,5 - 2 mm ir perpoliruoti.

5. MEDŽIAGOS IR REAGENTAI

5.1. Kalibravimo standartai

5.1.1. Atspindėjimo standartai, kurie yra poliruoto paviršiaus pavyzdžiai, atitinka šiuos reikalavimus:

a) yra izotropiniai arba sudaro pagrindinį vienaašių mineralų skerspjūvį;

b) patvarus ir atsparus korozijai;

c) ilgą laiką išlaikyti pastovų atspindžio koeficientą;

e) turi mažą absorbcijos greitį.

5.1.2. Standartai turi būti didesni nei 5 mm storio arba formos trikampė prizmė (30/60°) kad į objektyvą nepatektų daugiau šviesos, nei atsispindi nuo jo viršutinio (darbinio) paviršiaus.

Poliruotas kraštas naudojamas kaip darbinis paviršius atspindžio indeksui nustatyti. Standarto pagrindas ir šonai padengtas nepermatomu juodu laku arba dedamas į patvarų nepermatomą rėmą.

Sijos takas pleišto formos standartiniame, įterptame į juodą dervą, su fotometriniai matavimai Atspindžio rodiklis parodytas 1 paveiksle.

5.1.3. Atliekant matavimus, naudojami bent trys standartai, kurių atspindžio indeksai yra artimi tiriamų mėginių atspindžio indeksų matavimo sričiai arba sutampa su ja. Norint išmatuoti 1,0 % anglies atspindžio koeficientą, reikia naudoti standartus, kurių atspindžio koeficientas yra maždaug 0,6; 1,0; 1,6 proc.

Paprastai naudojamų standartų vidutiniai lūžio ir atspindžio rodikliai pateikti 1 lentelėje.

5.1.4. Tikrosios etalonų atspindžio indekso vertės nustatomos specialiose optinėse laboratorijose arba apskaičiuojamas pagal lūžio rodiklį.

Žinodami lūžio rodiklį n ir absorbcijos greitis? (jei reikšminga) standarto, kai bangos ilgis 546 nm, atspindžio koeficientas gali būti apskaičiuotas ( R) procentais pagal formulę

Jei lūžio rodiklis nežinomas arba įtariama, kad paviršiaus savybės gali tiksliai neatitikti vardinių pagrindinių savybių, atspindžio koeficientas nustatomas kruopščiai lyginant su žinomo atspindžio standartu.

5.1.5. Nulinis standartas naudojamas fotodaugiklio vamzdžio tamsiosios srovės ir išsklaidytos šviesos įtakai mikroskopo optinėje sistemoje pašalinti. K8 optinis stiklas gali būti naudojamas kaip nulinis standartas arba poliruotas briketas, pagamintas iš anglies, kurio dalelių dydis mažesnis nei 0,06 mm ir kurio centre yra 5 mm skersmens ir gylio įdubimas, užpildytas imersine alyva.

1 pav. Spindulio kelias pleišto formos standarte, įterptame į juodą dervą,
atliekant fotometrinius atspindžio indekso matavimus

1 lentelė

Vidutiniai atspindintys lūžio rodikliai dažniausiai naudojamiems standartams

5.1.6. Valydami standartus, reikia pasirūpinti, kad nepažeistumėte poliruoto paviršiaus. Priešingu atveju būtina iš naujo poliruoti jo darbinį paviršių.

5.2. Panardinimo alyva, atitinkanti šiuos reikalavimus:

nerūdijantis;

neišsausėja;

kurių lūžio rodiklis esant 546 nm bangos ilgiui 1,5180 ± 0,0004 esant 23 °C temperatūrai;

su temperatūros koeficientu dn/dt mažiau nei 0,005 K -1 .

Aliejuje neturi būti toksiškų komponentų, jos lūžio rodiklis turi būti tikrinamas kasmet.

5.3. Rektifikuotas alkoholis,

5.4. Sugerianti vata, audinys optikai.

5.5. Skaidrės ir plastilinas tiriamiems pavyzdžiams tvirtinti.

6. ĮRANGA

6.1. Monokuliaras arba binokuliarinis poliarizuojantis mikroskopas su fotometru indikatoriui matuoti atspindėtoje šviesoje. Mikroskopo optinės dalys, naudojamos atspindžiui matuoti, parodytos 2 paveiksle. Komponentai ne visada išdėstyti nurodyta seka.

6.1.1. Šviesos šaltinis A. Galima naudoti bet kokį šviesos šaltinį su stabilia spinduliuote; Rekomenduojama 100 W kvarcinė halogeninė lempa.

6.1.2. Poliarizatorius D- poliarizuojantis filtras arba prizmė.

6.1.3. Diafragma šviesai reguliuoti, susidedanti iš dviejų kintamų diafragmų, iš kurių viena sufokusuoja šviesą į galinę objektyvo židinio plokštumą (šviestuvas) IN), kitas yra ant mėginio paviršiaus (lauko diafragma E). Turi būti įmanoma centruoti mikroskopo sistemos optinės ašies atžvilgiu.

6.1.4. Vertikalus apšvietimas - Berek prizmė, padengtas paprasto stiklo plokštė arba Smith apšvietimas (veidrodžio ir stiklo plokštės derinys Z). Vertikalių šviestuvų tipai parodyti 3 pav.

6.1.6. Okuliaras L - du okuliarai, iš kurių vienas turi kryželį, kurio mastelį galima keisti taip, kad bendras objektyvo, okuliarų ir kai kuriais atvejais vamzdelio padidinimas būtų nuo 250° iki 750°. Gali prireikti trečiojo okuliaro Mšviesos kelyje į fotodaugiklio vamzdelį.

A- lempa; B- kolekcionuojantis objektyvas; IN- apšvietimo apertūra; G- terminis filtras;
D- poliarizatorius; E- lauko diafragma; IR- lauko diafragmos fokusavimo lęšis;
Z- vertikalus šviestuvas; IR- objektyvas; R - pavyzdys; KAM- stalas; L- okuliarai;
M - trečiasis okuliaras; N- matavimo diafragma, APIE- 546 nm trukdžių filtras;
P- fotodaugiklis

2 paveikslas – optinės mikroskopo dalys, naudojamos atspindžiui matuoti

6.1.7. Mikroskopo vamzdis su šiais priedais:

a) matavimo diafragma N, kuri leidžia reguliuoti šviesos srautą, atsispindintį į fotodaugiklį nuo mėginio paviršiaus R, plotas mažesnis nei 80 mikronų 2. Diafragma turi būti centre su okuliaro kryželiu;

b) įtaisai, skirti okuliarams optiškai izoliuoti, kad matavimų metu nepatektų šviesos perteklius;

c) būtinas juodinimas, kad sugertų išsklaidytą šviesą.

Pastaba. Imantis atsargumo priemonių, dalis šviesos srauto gali būti nukreipta į okuliarą arba televizijos kamerą, kad būtų galima nuolat stebėti matuojant atspindžio indeksą.

6.1.8. Filtras APIE kurių didžiausia perdavimo juosta (546 ± 5) nm ir pusė perdavimo juostos pločio mažesnė nei 30 nm. Filtras turi būti šviesos srauto kelyje tiesiai prieš fotodaugiklio vamzdelį.

A- siūlas; B- kolekcionuojantis objektyvas; IN - šviestuvo apertūra (kaitinamojo siūlelio atspindžio padėtis);
G- lauko diafragma; D- lauko diafragmos fokusavimo lęšis; E- Bereko prizmė;
IR- atvirkštinė lęšio židinio plokštuma (kaitinamojo siūlelio vaizdo padėtis ir iliuminatoriaus diafragma);
Z- objektyvas; IR- mėginio paviršius (regėjimo lauko vaizdo padėtis);

A- vertikalus šviestuvas su Berek prizme; b- apšvietimas su stiklo plokšte; V- Smito apšvietimas

3 paveikslas – vertikalių šviestuvų diagrama

6.1.9. Fotodaugiklis P, pritvirtintas ant mikroskopo sumontuotame antgalyje ir leidžiantis šviesos srautui pro matavimo angą ir filtrą patekti į fotodaugiklio langą.

Fotodaugintuvo vamzdis turi būti tokio tipo, kuris rekomenduojamas mažo intensyvumo šviesos srautams matuoti, turi būti pakankamai jautrus esant 546 nm ir mažos tamsios srovės. Jo charakteristika matavimo diapazone turi būti tiesinė, o signalas turi būti stabilus 2 valandas.Paprastai naudojamas tiesioginis 50 mm skersmens daugiklis, kurio gale yra optinis įėjimas, turintis 11 diodų.

6.1.10. Mikroskopo stadija KAM, galintis suktis 360° statmenai optinei ašiai, kurią galima centruoti reguliuojant sceną ar objektyvą. Besisukantis stalas yra prijungtas prie mėginio vairuotojo, kuris užtikrina mėginio judėjimą 0,5 mm žingsniu kryptimis X Ir Y, įrengtas įrenginys, leidžiantis šiek tiek reguliuoti judesius abiem kryptimis 10 mikronų ribose.

6.2. DC stabilizatorius šviesos šaltiniui. Charakteristikos turi atitikti šias sąlygas:

1) lempos galia turi būti 90 - 95% normos;

2) lempos galios svyravimai turi būti mažesni nei 0,02%, kai maitinimo šaltinis keičiasi 10%;

3) pulsacija esant pilnai apkrovai mažesnė nei 0,07 %;

4) temperatūros koeficientas mažesnis nei 0,05 % K -1.

6.3. Nuolatinės srovės įtampos stabilizatorius fotodaugintuvui.

Charakteristikos turi atitikti šias sąlygas:

1) įtampos svyravimai išėjime turi būti ne mažesni kaip 0,05 %, kai srovės šaltinio įtampa pasikeičia 10 %;

2) bangavimas esant pilnai apkrovai mažesnis nei 0,07 %;

3) temperatūros koeficientas mažesnis nei 0,05 % K -1 ;

4) apkrovos pokytis nuo nulio iki visiško išėjimo įtampos neturėtų pakeisti daugiau nei 0,1%.

Pastaba - Jei matavimo laikotarpiu maitinimo įtampa nukrenta 90%, tarp maitinimo šaltinio ir abiejų stabilizatorių reikia sumontuoti autotransformatorių.

6.4. Rodyklės įtaisas (ekranas), sudarytas iš vieno iš šių įrenginių:

1) galvanometras, kurio minimalus jautrumas 10 -10 A/mm;

2) registratorius;

3) skaitmeninis voltmetras arba skaitmeninis indikatorius.

Prietaisas turi būti sureguliuotas taip, kad visos skalės atsako trukmė būtų mažesnė nei 1 s, o skiriamoji geba būtų 0,005 % atspindžio. Prietaise turi būti įtaisas, skirtas pašalinti mažą teigiamą potencialą, atsirandantį fotodaugintuvo iškrovos metu ir dėl tamsios srovės.

Pastabos

1. Skaitmeninis voltmetras arba indikatorius turi aiškiai atskirti didžiausio atspindžio reikšmes, kai pavyzdys sukasi ant scenos. Atskiros atspindžio vertės gali būti saugomos elektroninėje įrangoje arba įrašytos į magnetinę juostelę tolesniam apdorojimui.

2. Norėdami sustiprinti fotodaugiklio signalą, kai jis tiekiamas į indikatoriaus įrenginį, galite naudoti stiprintuvą su mažu triukšmo lygiu.

6.5. Įrenginys kad bandinio arba standarto poliruotas paviršius būtų lygiagrečiai stikleliui (paspaudimas).

7. MATAVIMAI

7.1. Įrangos paruošimas (7.1.3 ir 7.1.4, raidės skliausteliuose nurodo 2 pav.).

7.1.1. Pradinės operacijos

Įsitikinkite, kad kambario temperatūra yra (23 ± 3) °C.

Apima srovės, šviesos ir kitos elektros įrangos šaltinius. Nustatykite gamintojo rekomenduojamą įtampą šiam fotodaugintuvui. Norėdami stabilizuoti įrangą, prieš pradėdami matavimus palaukite 30 minučių.

7.1.2. Mikroskopo reguliavimas atspindžio matavimui.

Jei matuojamas savavališkas atspindžio koeficientas, poliarizatorius pašalinamas. Jei matuojamas didžiausias atspindžio koeficientas, poliarizatorius nustatomas į nulinę padėtį, kai naudojama stiklo plokštė arba Smitho apšvietimas, arba 45° kampu, kai naudojama Berek prizmė. Jei naudojamas poliarizuojantis filtras, jis patikrinamas ir pakeičiamas, jei pastebimai pakinta spalva.

7.1.3. Apšvietimas

Lašelis imersinės alyvos užlašinamas ant poliruoto briketo paviršiaus, sumontuoto ant stiklelio, išlyginamas ir dedamas ant mikroskopo scenos.

Patikrinkite, ar mikroskopas tinkamai sureguliuotas Köhler apšvietimui. Sureguliuokite apšviestą lauką naudodami lauko diafragmą ( E), kad jo skersmuo būtų maždaug 1/3 viso lauko. Šviestuvo diafragma ( IN) yra sureguliuoti taip, kad sumažintų akinimą, pernelyg nesumažinant šviesos srauto. Vėliau sureguliuotos diafragmos dydis nesikeičia.

7.1.4. Optinės sistemos reguliavimas. Lauko diafragmos vaizdas yra centre ir sufokusuotas. Centruokite objektyvą ( IR), bet atsižvelgiant į objekto pakopos sukimosi ašį ir reguliuoti matavimo diafragmos centrą ( N), kad jis sutaptų arba su siūlų kryželiu, arba su tam tikru optinės sistemos regėjimo lauko tašku. Jei matavimo diafragmos vaizdo mėginyje nematyti, pasirinkite lauką, kuriame yra nedidelis blizgus intarpas, pvz., pirito kristalas, ir sulygiuokite jį su kryželiu. Sureguliuokite matavimo diafragmos centravimą ( N), kol fotodaugiklio vamzdelis duos didžiausią signalą.

7.2. Patikimumo patikra ir įrangos kalibravimas

7.2.1. Įrangos stabilumas.

Didžiausią atspindžio koeficientą turintis standartas dedamas po mikroskopu ir sufokusuojamas imersinėje alyvoje. Fotodaugintuvo įtampa reguliuojama tol, kol rodmenys ekrane sutampa su atskaitos atspindžio koeficientu (pavyzdžiui, 173 mV atitinka 173 %). Signalas turi būti pastovus, rodmenų pokyčiai per 15 minučių neturi viršyti 0,02%.

7.2.2. Rodmenų pokyčiai sukant atspindžio etaloną scenoje.

Ant scenos padėkite etaloną, kurio alyvos atspindžio koeficientas yra 1,65–2,0%, ir sufokusuokite jį panardinamoje alyvoje. Lėtai pasukite lentelę, kad maksimalus rodiklių pokytis būtų mažesnis nei 2% paimto standarto atspindžio. Jei nuokrypis didesnis už šią vertę, būtina patikrinti standarto horizontalią padėtį ir užtikrinti, kad ji būtų griežtai statmena optinei ašiai ir sukasi toje pačioje plokštumoje. Jei po to svyravimai netampa mažesni nei 2%, gamintojas turi patikrinti scenos mechaninį stabilumą ir mikroskopo geometriją.

7.2.4. Fotodaugiklio signalo tiesiškumas

Išmatuokite kitų etalonų atspindžio koeficientą esant ta pačiai pastoviai įtampai ir tokiam pačiam šviesos diafragmos nustatymui, kad patikrintumėte, ar matavimo sistema turi tiesinį ryšį išmatuotose ribose, o standartai atitinka jų apskaičiuotas vertes. Pasukite kiekvieną etaloną taip, kad rodmenys būtų kuo arčiau apskaičiuotos vertės. Jei kurio nors iš standartų vertė skiriasi nuo apskaičiuoto atspindžio daugiau nei 0,02%, etaloną reikia išvalyti ir standartizacijos procesą pakartoti. Standartas turi būti poliruojamas dar kartą, kol atspindžio koeficientas skirsis nuo apskaičiuotos vertės daugiau nei 0,02%.

Jei standartų atspindys nesukuria tiesinės diagramos, patikrinkite fotodaugiklio signalo tiesiškumą naudodami kitų šaltinių standartus. Jei jie neduoda linijinė diagrama, dar kartą patikrinkite signalo tiesiškumą, naudodami kelis neutralaus tankio kalibravimo filtrus, kad sumažintumėte šviesos srautą iki žinomos vertės. Jei patvirtinama, kad fotodaugiklio signalas yra netiesinis, pakeiskite fotodaugiklio vamzdelį ir atlikite tolesnį bandymą, kol bus gautas signalo tiesiškumas.

7.2.5. Įrangos kalibravimas

Nustačius įrangos patikimumą, būtina užtikrinti, kad indikatorius rodytų teisingus bandomos anglies nulinio standarto ir trijų atspindžio standartų rodmenis, kaip nurodyta 7.2.1 - 7.2.4 punktuose. Kiekvieno ekrane rodomo standarto atspindžio koeficientas nuo apskaičiuotos vertės neturėtų skirtis daugiau nei 0,02%.

7.3. Vitrinito atspindžio indekso matavimas

7.3.1. Bendrosios nuostatos

Didžiausio ir mažiausio atspindžio matavimo metodas pateiktas 7.3.2 punkte, o savavališkas – 7.3.3 punkte. Šiuose poskyriuose terminas vitrinitas reiškia vieną ar daugiau vitrinito grupės submaceralų.

Kaip nurodyta 1 skirsnyje, nuo submaceralų, su kuriais atliekami matavimai, pasirinkimas lemia rezultatą, todėl svarbu nuspręsti, kurių submaceralų atspindžio matavimus reikia atlikti, ir į juos atkreipti dėmesį pranešant apie rezultatus.

7.3.2. Didžiausio ir mažiausio vitrinito atspindžio aliejuje matavimas.

Sumontuokite poliarizatorių ir patikrinkite įrangą pagal 7.1 ir 7.2 punktus.

Iš karto po įrangos kalibravimo ant mechaninio stalo (paruošimo vadovo) dedamas išlygintas poliruotas preparatas, pagamintas iš tiriamojo mėginio, kuris leidžia atlikti matavimus pradedant nuo vieno kampo. Mėginio paviršius užtepamas imersine alyva ir atliekamas fokusavimas. Šiek tiek judinkite mėginį stikleliu, kol kryželis bus nukreiptas į atitinkamą vitrinito paviršių. Paviršius, ant kurio atliekami matavimai, neturi turėti įtrūkimų, poliravimo defektų, mineralinių intarpų ar reljefo ir turi būti tam tikru atstumu nuo maceralo ribų.

Praleiskite šviesą per fotodaugiklio vamzdelį ir pasukite stalą 360° ne didesniu kaip 10 min -1 greičiu. Užrašykite aukščiausią ir mažiausią atspindžio indekso reikšmes, kurios pastebimos sukant sceną.

Pastaba: Pasukus bandinį 360°, idealiu atveju galima gauti du identiškus didžiausius ir mažiausius rodmenis. Jei du rodmenys labai skiriasi, reikia nustatyti priežastį ir ištaisyti klaidą. Kartais klaidą gali sukelti alyvoje esantys oro burbuliukai, patekę į matuojamą zoną. Tokiu atveju į rodmenis neatsižvelgiama ir oro burbuliukai pašalinami nuleidus arba pakeliant mikroskopo pakopą (priklausomai nuo konstrukcijos). Objektyvo lęšio priekinis paviršius nuvalomas optine šluoste, ant mėginio paviršiaus vėl užlašinamas lašelis aliejaus ir atliekamas fokusavimas.

Mėginys perkeliamas ta kryptimi X(žingsnio ilgis 0,5 mm) ir atlikite matavimus, kai kryželis atsitrenks į tinkamą vitrinito paviršių. Siekiant užtikrinti, kad matavimai būtų atliekami atitinkamoje vitrinito vietoje, mėginys gali būti perkeltas slankikliu iki 10 µm atstumu. Kelio pabaigoje pavyzdys pereina į kitą eilutę: atstumas tarp linijų yra ne mažesnis kaip 0,5 mm. Atstumas tarp linijų parenkamas toks, kad matavimai būtų tolygiai paskirstyti sekcijos paviršiuje. Toliau matuokite atspindžio koeficientą naudodami šią bandymo procedūrą.

Kas 60 minučių dar kartą patikrinkite įrangos kalibravimą pagal standartą, kuris yra arčiausiai didžiausio atspindžio koeficiento (7.2.5). Jei standarto atspindžio koeficientas skiriasi nuo teorinės vertės daugiau nei 0,01%, paskutinius rodmenis išmeskite ir atlikite juos dar kartą, perkalibravus įrangą pagal visus standartus.

Atspindžio matavimai atliekami tol, kol gaunamas reikiamas matavimų skaičius. Jei poliruotas briketas ruošiamas iš vieno sluoksnio anglies, atliekama nuo 40 iki 100 ir daugiau matavimų (žr. lentelę 3 ). Didėjant vitrinito anizotropijos laipsniui, matavimų skaičius didėja. Kiekviename išmatuotame grūde didžiausios ir mažiausios rodmenų vertės nustatomos sukant mikroskopo pakopą. Vidutinis maksimalus ir minimalus atspindys apskaičiuojamas kaip didžiausių ir minimalių ataskaitų aritmetinis vidurkis.

Jei naudojamas mėginys yra anglių mišinys, atliekama 500 matavimų.

Priklausomai nuo tiriamo mėginio anizotropijos laipsnio ir tyrimo tikslų, kiekviename poliruotame mėginyje reikia išmatuoti 10 ar daugiau vitrinito pjūvių.

Prieš pradedant matavimus, poliruotas bandinys padėtas taip, kad sluoksniavimo plokštuma būtų statmena krintančiam mikroskopo optinės sistemos pluoštui. Kiekviename išmatuotame taške randama didžiausio rodmens padėtis, o tada rodmenys registruojami kas 90° pasukant mikroskopo pakopą, kai ji sukasi 360°.

Maksimalus ir minimalus atspindys (R 0, maks ir R 0, min) apskaičiuojamas atitinkamai kaip didžiausios ir mažiausios imčių aritmetinis vidurkis.

7.3.3. Savavališko vitrinito atspindžio indekso matavimas imersinėje alyvoje (R 0, r)

Taikoma 7.3.2 punkte aprašyta procedūra, bet be poliarizatoriaus ir mėginio sukimo. Atlikite kalibravimą, kaip aprašyta 7.2.5

Vitrinito atspindžio koeficientas matuojamas tol, kol užregistruojamas reikiamas matavimų skaičius.

Ant kiekvieno šlifavimo briketo reikia atlikti nuo 40 iki 100 ar daugiau matavimų (lentelė 3 ) priklausomai nuo tiriamo mėginio homogeniškumo ir anizotropijos laipsnio.

Matavimų skaičius didėja didėjant huminito ir vitrinito grupės sudėties heterogeniškumui, taip pat esant ryškiai kietųjų anglių ir antracitų anizotropijai.

Mėginių, kuriuose yra kietos dispersinės organinės medžiagos, matavimų skaičius priklauso nuo šių intarpų pobūdžio ir dydžio ir gali būti žymiai mažesnis.

Norint iš reflektogramų nustatyti anglies mišinių sudėtį, būtina atlikti ne mažiau kaip 500 dviejų tiriamo anglies mėginio matavimų. Jei į įkrovą įtrauktų įvairaus metamorfizmo laipsnio anglių dalyvavimo vienareikšmiškai nustatyti nepavyksta, atliekama dar 100 matavimų ir toliau, kol jų pakaks. Apriboti matavimų skaičių - 1000.

Ant kiekvieno poliruoto mėginio atliekama iki 20 matavimų dviem viena kitai statmenomis kryptimis. Norėdami tai padaryti, šlifavimo bandinys sumontuotas taip, kad sluoksniavimo plokštuma būtų statmena krintančiam mikroskopo optinės sistemos pluoštui. Matavimų sritys parenkamos taip, kad jos būtų tolygiai išdėstytos visame tiriamo poliruoto bandinio vitrinito paviršiuje.

Savavališkas atspindžio indeksas (R 0, r ) apskaičiuojamas kaip visų matavimų aritmetinis vidurkis.

7.3.4. Oro atspindžio matavimai.

Maksimalių, minimalių ir savavališkų atspindžio indeksų apibrėžimai (Ra, maks., R a, min Ir R a, r) galima atlikti išankstiniam metamorfizmo etapų įvertinimui.

Matavimai ore atliekami panašiai kaip matavimai imersinėje alyvoje esant žemesnėms diafragmos diafragmos vertėms, apšvietimo įtampai ir PMT darbinei įtampai.

Ant tiriamo poliruoto briketo reikia atlikti 20 - 30 matavimų, ant poliruoto bandinio - 10 ar daugiau.

8. REZULTATŲ APDOROJIMAS

8.1. Rezultatai gali būti išreikšti kaip viena reikšmė arba kaip skaičių serija 0,05 % atspindžio intervalais (1/2 V-žingsnis) arba 0,10 % atspindžio indekso intervalais ( V- žingsnis). Vidutinis atspindžio koeficientas ir standartinis nuokrypis apskaičiuojami taip:

1) Jei žinomi atskiri rodmenys, vidutinis atspindys ir standartinis nuokrypis apskaičiuojami atitinkamai pagal (1) ir (2) formules:

(2)

Kur ?R- vidutinis maksimalus, vidutinis minimumas arba vidutinis savavališkas atspindžio rodiklis, %.

Ri- atskira indikacija (matavimas);

n- matavimų skaičius;

Standartinis nuokrypis.

2) Jei rezultatai pateikiami kaip matavimų serija 1/2 V- žingsnis arba V-žingsnis, naudokite šias lygtis:

Kur Rt- vidutinė vertė 1/2 V- žingsnis arba V- žingsnis;

X- atspindžio indikatoriaus matavimų skaičius 1/2 V- žingsnis arba V- žingsnis.

Registruojami vitrinito submaceralai, su kuriais susijusios vertės ?R nepriklausomai nuo to, koks atspindžio indikatorius buvo išmatuotas, maksimalus, minimumas arba savavališkas, ir matavimo taškų skaičius. Vitrinito procentas kiekvienam 1/2 V- žingsnis arba V-žingsnis gali būti pavaizduotas reflektogramos pavidalu. Rezultatų išreiškimo pavyzdys pateiktas 2 lentelėje, atitinkama reflektograma – 4 paveiksle.

Pastaba - V-step atspindžio indekso diapazonas yra 0,1, o 1/2 - 0,05%. Kad būtų išvengta persidengimo atspindžio verčių, išreikštų antrojo skaičiaus po kablelio tikslumu, verčių intervalai pateikiami, pavyzdžiui, taip:

V-žingsnis - 0,60 - 0,69; 0,70 - 0,79 ir kt. (įskaitant).

1 / 2 V- aukštis: 0,60 - 0,64; 0,65 - 0,69 ir kt. (įskaitant).

Vidutinė serijos reikšmė (0,60 - 0,69) yra 0,645.

Vidutinė serijos reikšmė (0,60 - 0,64) yra 0,62.

8.2. Jei reikia, savavališkas atspindžio indeksas (R 0, r ) apskaičiuojami iš vidutinių didžiausių ir mažiausių atspindžio indeksų verčių, naudojant formules:

šlifavimo medžiagai R 0, r = 2 / 3 R 0, maks. + 1/3 R 0, min

poliruotiems briketams

Didumas užima tarpinę padėtį tarp R 0, maks ir R 0, min Ir siejamas su grūdelių orientacija poliruotame brikete.

8.3. Kaip papildomas parametras, atspindžio anizotropijos indeksas (AR) apskaičiuojamas pagal formules:

8.4. Matavimo rezultatų apdorojimas įprastoje ir poliarizuotoje šviesoje ore, naudojant poliruotus briketus ir poliruotus bandinius, atliekamas panašiai kaip matavimo rezultatų apdorojimas imersinėje alyvoje (8.1 ).

4 paveikslas – atspindžio diagrama, sudaryta iš 2 lentelės rezultatų

2 lentelė

Išmatuotas atspindys yra savavališkas

Submaceralinis vitrinitas telokolinitas ir desmokolinitas

Atspindėjimo indeksas	Stebėjimų skaičius	Stebėjimų procentas

Bendras matavimų skaičius n = 500

Vidutinis atspindys ?R 0, r = 1,32 %

Standartinis nuokrypis? = 0,20 %

9. TIKSLUMAS

9.1. Konvergencija

Maksimalių vidutinių verčių apibrėžimų konvergencija, minimumas arba savavališkas atspindys – tai vertė, pagal kurią du atskiri rodmenys, kuriuos tas pats operatorius atliko tą patį matavimų skaičių, naudojant tą pačią įrangą pasitikėjimo tikimybė 95 %.

Konvergencija apskaičiuojama pagal formulę

kur? t- teorinis standartinis nuokrypis.

Konvergencija priklauso nuo daugelio veiksnių, įskaitant:

1) ribotas kalibravimo tikslumas naudojant atspindžio standartus (6.2.5);

2) leistinas kalibravimo poslinkis matavimų metu (6.3.2);

3) atliktų matavimų skaičius ir vienos anglies siūlės vitrinito atspindžio verčių diapazonas.

Bendras šių veiksnių poveikis gali būti išreikštas standartiniu vidutinio atspindžio nuokrypiu iki 0,02 % vienos atskiros anglies mėginiui iš vienos siūlės. Tai atitinka iki 0,06 % konvergenciją.

9.2. Atkuriamumas

Maksimalių, minimalių arba savavališkų rodiklių vidutinių verčių atkuriamumas yra vertė, pagal kurią dviejų skirtingų operatorių dviejų skirtingų preparatų, pagamintų iš to paties mėginio, matavimų, atliktų tuo pačiu skaičiumi, vertės. ir naudojant skirtingą įrangą skiriasi, patikimumo lygis yra 95%.

Atkuriamumas apskaičiuojamas pagal formulę

kur? 0 yra tikrasis standartinis nuokrypis.

Jei operatoriai yra tinkamai apmokyti atpažinti vitrinitą ar susijusius submaceralus ir patikimai žinomas standarto atspindys, skirtingų operatorių skirtingose laboratorijose atliktų vidutinių atspindžio rodiklių standartiniai nuokrypiai yra 0,03%. Taigi atkuriamumas yra 0,08 %

9.3. Leistini skirtumai tarp dviejų apibrėžimų atspindžio rodiklių vidutinių verčių rezultatų yra nurodyti lentelėje 3 .

3 lentelė

atspindžio indeksas, %	Leistini skirtumai % abs.		Matavimų skaičius
atspindžio indeksas, %	vienoje laboratorijoje	įvairiose laboratorijose	Matavimų skaičius
Iki 1,0 įsk.