Страница 1

страница 2

страница 3

страница 4

страница 5

МЕЖДУДЪРЖАВЕН СТАНДАРТ

Дата на въвеждане 01/01/74

Този стандарт се прилага за питейна вода и определя колориметричен метод за определяне на полифосфати.

Методът се основава на хидролиза на полифосфати в кисела среда, при която те се превръщат в разтворени ортофосфати, определени по колориметричен метод под формата на фосфомолибденов комплекс, оцветен в синьо. В отделна проба се определят ортофосфатите, които първоначално са били във водата, чието съдържание се изважда от резултата, получен при определяне на полифосфатите. Чувствителността на метода е 0,01 mg/dm 3 .

1. МЕТОДИ ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ

1.2. Обемът на водната проба за определяне съдържанието на полифосфат трябва да бъде най-малко 500 cm 3 .

1.3. Водни проби събрани в добре излужени бутилки с шлифовани запушалки.

1.4. Ако анализът не е извършен в деня на вземане на пробите, водата се консервира чрез добавяне на 2 - 4 cm 3 хлороформ на 1 dm 3 вода.

* GOST R 51232-98 е в сила на територията на Руската федерация.

** GOST R 51593-2000 е в сила на територията на Руската федерация.

2. ОБОРУДВАНЕ, МАТЕРИАЛИ, РЕАКТИВИ

Фотоелектричен колориметър, кювети с дебелина на работния слой 2 - 3 cm.

Термостат с терморегулатор.

Електрическа фурна.

Хартиен филтър (синя лента).

Измервателна лабораторна посуда в съответствие с GOST 1770, GOST 29227 и GOST 29169 с вместимост: мерителни колби 50, 100 и 1000 cm 3, мерителни пипети 1 - 2 cm 3 с деления 0,01 cm 3, 5 - 10 cm 3 с деления 0,1 cm 3 ; пипети с размери 5, 10, 20, 50 и 100 cm 3 без деления.

Лабораторни стъклени чаши съгласно GOST 25336.

Амониево-молибдатна киселина съгласно GOST 3765.

Калиев фосфат монозаместен съгласно GOST 4198.

Калаен дихлорид съгласно TU 6-09-5384.

Сулфаминова киселина.

Всички прибори трябва да се третират с гореща солна киселина и да се измият добре с дестилирана вода.

Всички реагенти трябва да бъдат с аналитичен клас.

3. ПОДГОТОВКА ЗА АНАЛИЗ

3.1 . Приготвяне на основен стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат.

0.7165 g KH2PO 4, х. часа, предварително изсушен в термостат в продължение на 2 часа при 105 °C, разтваря се в мерителна колба от 1000 cm 3 с дестилирана вода и се регулира обемът на разтвора до марката, добавят се 2 cm 3 хлороформ. 1 cm 3 разтвор съдържа 0,5 mg

3.2 . Приготвяне на първия работен стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат.

10 cm 3 от основния разтвор се довежда до 1 dm 3 с дестилирана вода, 1 cm 3 от разтвора съдържа 0,005 mg .

3.3 . Приготвяне на втори работен стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат.

50 cm 3 I работен разтвор се довежда до 250 cm 3 с дестилирана вода. 1 cm 3 разтвор съдържа 0,001 mg.

Необходимо е да се използва прясно приготвен разтвор.

3.4 . Получаване на амониев молибдат (реагент I, кисел разтвор)

25 g (NH 4) 6 Mo 7 O 24 4H 2 O се разтварят в 600 cm 3 дестилирана вода. Към този разтвор внимателно, докато се охлажда, добавете 337 cm 3 концентрирана 98% сярна киселина. След охлаждане разтворът се довежда до 1 dm 3 с дестилирана вода. Разтворът се съхранява в бутилка от тъмно стъкло с шлифована запушалка. Реактивът може да се използва 48 часа след приготвянето му.

3.5 . Получаване на амониев молибдат (реактив II, леко кисел разтвор)

10 g (NH 4) 6 Mo 7 O 24 · 4H 2 O се разтварят в 400 cm 3 дестилирана вода и се добавят 7 cm 3 концентрирана 98% сярна киселина. Разтворът се съхранява в пластмасова бутилка на тъмно място. Стабилен около 3 месеца. Реактивът може да се използва 48 часа след приготвянето му.

3.6 . Приготвяне на 37% разтвор на сярна киселина

337 cm 3 концентрирана 98% сярна киселина се смесват внимателно, добавяйки малки порции към 600 cm 3 дестилирана вода. След охлаждане разтворът се довежда до 1 dm 3 с дестилирана вода.

3.7 . Приготвяне на основен разтвор на калаен хлорид

1,95 g кристален неизветрен SnCl2 2H20 се разтваря в 50 cm 3 13,6% солна киселина (18,4 cm 37% свободна от арсен HCI, регулирана до 50 cm 3 с дестилирана вода). Суспензията се смесва добре и се съхранява в бутилка, покрита отвътре със слой парафин. Суспензията се разбърква добре преди употреба. Суспензията може да се използва веднага след приготвяне.

3.8 . Приготвяне на работен разтвор на калаен хлорид

2,5 cm 3 от основния разтвор (суспензия) се довежда до 10 cm 3 с дестилирана вода.

Необходимо е да се използва прясно приготвен разтвор. Разтворът е стабилен за около 4 часа.

4. АНАЛИЗ

4.1. Желязото в концентрация над 1 mg/dm 3, разтворимите силикати над 25 mg/dm 3 и нитритите пречат на определянето. Влиянието на желязото и силикатите се елиминира чрез подходящо разреждане на изпитваната вода. Ефектът на нитритите в концентрация до 25 mg/dm 3 се елиминира чрез добавяне на 0,1 g сулфаминова киселина NH 2 SO 2 OH към пробата, която се добавя преди добавяне на амониев молибдат към пробата.

4.2 . Определяне на ортофосфати

Към 50 cm 3 от тестовата вода (без разреждане може да се определи не повече от 0,4 mg/dm 3), филтрирана през хартиен филтър със синя лента, добавете същите реактиви и в същата последователност, както в разтворите на пробите. Оптичната плътност на разтвора се определя с електрофотоколориметър. Концентрацията на ортофосфатите се определя според калибровъчната крива.

4.3 . Определяне на полифосфати

Към 100 cm 3 от тестовата вода, филтрирана през дебел хартиен филтър, или към по-малък обем, доведен до 100 cm 3 с дестилирана вода, се добавят 2 cm 3 37% разтвор на сярна киселина и се вари в продължение на 30 минути. Обемът на водата, която се тества, се поддържа чрез добавяне на дестилирана вода в диапазона от 50 - 90 cm 3 . След охлаждане на разтвора, прехвърлете го в мерителна колба от 100 cm3 и регулирайте обема до марката с дестилирана вода. Добавете 1 cm 3 слабо кисел разтвор на молибденова киселина (реагент II), разбъркайте и след 5 минути добавете 0,1 cm 3 работен разтвор на калаен дихлорид, след което разбъркайте отново. След 10 - 15 минути измерете интензитета на цвета с електрофотоколориметър.

4.4 . Изграждане на калибровъчна графика

Пипетирайте 0,0 в мерителни колби с вместимост 50 cm 3; 0,5; 1.0; 2.0; 5,0; 10,0; 20,0 cm 3 работен стандартен разтвор на калиев фосфат (1 cm 3 - 0,001 mg) и доведете обема на разтвора до марката с дестилирана вода. Съдържанието на полифосфати в пробните разтвори ще бъде съответно: 0,0; 0,01; 0,02; 0,04; 0,10; 0,20; 0,40 mg в 1 dm3 вода. Добавете точно 1 cm 3 амониев молибдат (реактив I, киселинен разтвор) във всяка колба, разбъркайте и след 5 минути добавете 0,1 cm 3 работен разтвор на калаен дихлорид с помощта на микропипета и разбъркайте. Интензитетът на цвета се измерва след 10 - 15 минути с фотоелектроколориметър, като се използва червен филтър (l = 690 - 720 nm) и кювети с дебелина на слоя 2 - 3 см. От получената се изважда оптичната плътност на контролната проба. оптични плътности и резултатите се изобразяват.

5. ОБРАБОТКА НА РЕЗУЛТАТИТЕ

Където ° С- съдържание на ортофосфати, установено от калибровъчната графика, mg/cm 3 ;

50 - довеждане на обема на изследваната вода до 50 cm 3;

V- обем на пробната вода, взета за определяне, cm3.

Където СЪС 1 - съдържанието на полифосфат, намерено от калибровъчната графика, mg/dm 3 ;

100 - довеждане на обема на изследваната вода до 100 cm 3;

V- обем на пробната вода, взета за определяне, cm3.

Допустимото несъответствие между многократни определяния на полифосфати е 0,01 mg/dm 3, ако съдържанието им не надвишава 0,07 mg/dm 3, с по-високо съдържание - 15% отн.

ИНФОРМАЦИОННИ ДАННИ

1. ОДОБРЕНО И ВЛИЗАНО В СИЛА с постановление на Държавния комитет по стандартизация на Министерския съвет на СССР от 28 декември 1972 г. № 2356

2. ПРЕДСТАВЕН ЗА ПЪРВИ ПЪТ

3. РЕФЕРЕНТНИ НОРМАТИВНИ И ТЕХНИЧЕСКИ ДОКУМЕНТИ

Пия вода. Метод за определяне съдържанието на полифосфат

Дата на въвеждане 01.01.74

Този стандарт се прилага за питейна вода и определя колориметричен метод за определяне на полифосфати.

. МЕТОДИ ЗА ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ

** GOST R 51593-2000 е в сила на територията на Руската федерация.

2. ОБОРУДВАНЕ, МАТЕРИАЛИ, РЕАКТИВИ

Фотоелектричен колориметър, кювети с дебелина на работния слой 2 - 3 cm.

Термостат с терморегулатор.

Електрическа фурна.

Хартиен филтър (синя лента).

Измервателна лабораторна посуда в съответствие с GOST 1770, GOST 29227 и GOST 29169 с капацитет: мерителни колби 50, 100 и 1000 cm 3, измервателни пипети 1 - 2 cm 3 с деления 0,01 cm 3, 5 - 10 cm 3 с деления 0,1 cm 3 ; пипети с размери 5, 10, 20, 50 и 100 cm 3 без деления.

Лабораторни стъклени чаши съгласно GOST 25336.

Амониево-молибдатна киселина съгласно GOST 3765.

Калиев фосфат монозаместен съгласно GOST 4198.

Калаен дихлорид съгласно TU 6-09-5384.

Сулфаминова киселина.

Дестилирана вода съгласно GOST 6709.

Всички прибори трябва да се третират с гореща солна киселина и да се измият добре с дестилирана вода.

Всички реагенти трябва да бъдат с аналитичен клас.

. ПОДГОТОВКА ЗА АНАЛИЗ

3.1 . Приготвяне на основен стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат.

0 .7165 g KH 2 PO 4 , Х. часа, предварително изсушен в термостат в продължение на 2 часа при 105 °C, разтваря се в мерителна колба от 1000 cm 3 с дестилирана вода и се регулира обемът на разтвора до марката, добавят се 2 cm 3 хлороформ. 1 cm 3 разтвор съдържа 0,5 mg

3.2 . Приготвяне на първия работен стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат.

10 cm 3 от основния разтвор се довежда до 1 dm 3 с дестилирана вода, 1 cm 3 разтвор съдържа 0,005 mg.

3.3 . Приготвяне на втори работен стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат.

50 cm 3 I работният разтвор се довежда до 250 cm 3 с дестилирана вода. 1 cm 3 разтвор съдържа 0,001 mg.

Необходимо е да се използва прясно приготвен разтвор.

3.4 . Получаване на амониев молибдат (реагент I, кисел разтвор)

25 g (NH4)6Mo7 O 24 · 4H 2 O се разтваря в 600 cm 3 дестилирана вода. Към този разтвор внимателно, докато се охлажда, добавете 337 cm 3 концентрирана 98% сярна киселина. След охлаждане разтворът се довежда до 1 dm 3 с дестилирана вода. Разтворът се съхранява в бутилка от тъмно стъкло с шлифована запушалка. Реактивът може да се използва 48 часа след приготвянето му.

3.5 . Получаване на амониев молибдат (реактив II, леко кисел разтвор)

10 g (NH4 ) 6 Mo 7 O 24 · 4H 2 O се разтваря в 400 cm 3 дестилирана вода и се добавят 7 cm 3 концентрирана 98% сярна киселина. Разтворът се съхранява в пластмасова бутилка на тъмно място. Стабилен около 3 месеца. Реактивът може да се използва 48 часа след приготвянето му.

3.6 . Приготвяне на 37% разтвор на сярна киселина

337 cm 3 концентрирана 98% сярна киселина се смесва внимателно чрез добавяне на малки порции към 600 cm 3 дестилирана вода. След охлаждане разтворът се довежда до 1 dm 3 с дестилирана вода.

3.7 . Приготвяне на основен разтвор на калаен хлорид

1 .95 g кристален неизветрен SnCl 2 · 2H 2 O се разтваря в 50 cm 3 13,6% солна киселина (18,4 cm 3 37% свободна от арсен НС1, регулирана до 50 cm 3 с дестилирана вода). Суспензията се смесва добре и се съхранява в бутилка, покрита отвътре със слой парафин. Суспензията се разбърква добре преди употреба. Суспензията може да се използва веднага след приготвяне.

3.8 . Приготвяне на работен разтвор на калаен хлорид

2 .5 cm 3 от основния разтвор (суспензия) се довежда до 10 cm 3 с дестилирана вода.

Необходимо е да се използва прясно приготвен разтвор. Разтворът е стабилен за около 4 часа.

. ПРОВЕЖДАНЕ НА АНАЛИЗ

4.1 . Желязото в концентрация над 1 mg/dm 3, разтворимите силикати над 25 mg/dm 3 и нитритите пречат на определянето. Влиянието на желязото и силикатите се елиминира чрез подходящо разреждане на изпитваната вода. Ефектът на нитритите в концентрации до 25 mg/dm 3 се елиминира чрез добавяне на 0,1 g сулфаминова киселина NH към пробата 2 SO 2 OH, който се добавя преди добавянето на амониев молибдат към пробата.

4.2 . Определяне на ортофосфати

Към 50 cm 3 тестова вода (без разреждане може да се определи не повече от 0,4 mg/dm 3), филтриран през хартиен филтър със синя лента, добавете същите реактиви и в същата последователност, както в пробните разтвори. Оптичната плътност на разтвора се определя с електрофотоколориметър. Концентрацията на ортофосфатите се определя според калибровъчната крива.

4.3 . Определяне на полифосфати

4.4 . Изграждане на калибровъчна графика

Пипетирайте 0,0 в мерителни колби с вместимост 50 cm 3; 0,5; 1.0; 2.0; 5,0; 10,0; 20,0 cm 3 работен стандартен разтвор на калиев фосфат (1 cm 3 - 0,001 mg) и доведете обема на разтвора до марката с дестилирана вода. Съдържанието на полифосфати в пробните разтвори ще бъде съответно: 0,0; 0,01; 0,02; 0,04; 0,10; 0,20; 0,40 мгв 1 dm 3 вода. Добавете точно 1 cm 3 амониев молибдат (реактив I, киселинен разтвор) във всяка колба, разбъркайте и след 5 минути добавете 0,1 cm 3 работен разтвор на калаен дихлорид с помощта на микропипета и разбъркайте. Интензитетът на цвета се измерва след 10 - 15 минути с фотоелектроколориметър с помощта на червен филтър (л = 690 - 720 nm) и кювети с дебелина на слоя 2 - 3 см. От получените оптични плътности се изважда оптичната плътност на контролната проба и резултатите се нанасят.

. ОБРАБОТКА НА РЕЗУЛТАТИТЕ

5.1 . Съдържание на неорганични разтворени ортофосфати (х), mg/dm 3, определени по формулата

Където ° С- съдържание на ортофосфати, установено от калибровъчната графика, mg/cm 3 ;

50 - довеждане на обема на изследваната вода до 50 cm 3;

V - обем на пробната вода, взета за определяне, cm3.

5.2 . Съдържание на хидролизируеми полифосфати (х 1 ), mg/dm 3, определени по формулата

Където СЪС 1 - съдържанието на полифосфат, намерено от калибровъчната графика, mg/dm 3 ;

100 - довеждане на обема на изследваната вода до 100 cm 3;

V - обем на пробната вода, взета за определяне, cm3.

По време на хидролизата на кондензирани фосфати (полифосфати) частично се извършва и хидролиза на органични фосфати. При разлагането на органичните фосфати полифосфатите също се хидролизират количествено. Поради тази причина се извършва общо определяне на всички разтворени фосфати, резултатите от което, без съдържанието на ортофосфати, характеризират общото количество разтворени, кондензирани и органични фосфати. [...]

Напредък на решимостта. Към 50 ml от пробата, филтрирана в деня на вземане (на мястото на вземане на пробите или в лабораторията) през мембранен филтър № 1 или през плътен хартиен филтър (или до по-малък обем на пробата, но разредена до 50 ml с дестил. вода), добавете 2 ml от смесения разтвор и за кратко време - 0,5 ml разтвор на аскорбинова киселина (както беше споменато по-горе, при наличие на някои смущаващи вещества, реагентите се изсипват в обратен ред). Сместа се разбърква. В същото време се извършва празна проба с 50 ml дестилирана вода. Ако анализираната проба съдържа полифосфати или органични фосфорни съединения, измерете оптичната плътност на разтвора за период от време от 5 до 15 минути. Ако няма лесно хидролизирани съединения, този период от време може да се увеличи до 60 минути.[...]

Методът се основава на хидролиза на полифосфати в кисела среда, при която те се превръщат в разтворени ортофосфати, определени по колориметричен метод под формата на фосфорно-молибденов комплекс, оцветен в синьо. В отделна проба се определят ортофосфатите, които първоначално са били във водата, чието съдържание се изважда от резултата, получен при определяне на полифосфатите. Чувствителността на метода е 0,01 mg/dm3.[...]

В използвания по-рано метод, определянето на ортофосфатите се извършва по молибдатния метод с използване на аскорбинова киселина като редуциращ агент. Процесът на редукция протича при нагряване за 15-20 минути, което води до хидролиза на полифосфати и фосфорсъдържащи органични съединения. [...]

Използването на ултравиолетово облъчване на естествената морска вода води до пълно разграждане на органично свързания фосфор и в същото време не засяга полифосфатите, които са представени в неорганични и органични форми. Тази техника се препоръчва за определяне на органичен фосфор в морска вода. При горното облъчване на естествени (т.е. без предварително подкисляване и нагряване) проби от земни повърхностни води, резултатите от определянето на получените ортофосфати се оказаха подценени. В пресни води определянето на общия фосфор чрез ултравиолетово облъчване е възможно, ако се извършва в леко кисела среда.[...]

Същността на метода. Извършва се киселинна хидролиза на полифосфати и естери на фосфорна киселина, в резултат на което тези съединения се превръщат в разтворими неорганични ортофосфати, последните се определят чрез добавяне на молибдат и аскорбинова киселина. Резултатът от определянето включва и съдържанието на тези ортофосфати, които първоначално са били в пробата; то трябва да се извади от резултата.[...]

Целта на тази работа е да се определи фосфорният резерв на планктонните популации чрез степента на натрупване на полифосфати в сестон и увеличаването на съдържанието на общ фосфор в него с добавяне на PO4-. Определянето на полифосфатите се извършва чрез киселинна хидролиза на тези съединения до ортофосфати при 100 °C. Методът не е специфичен; Резултатите могат да бъдат повлияни от частично хидролизирани лабилни органични съединения. Но тъй като реакцията на организмите към добавянето на PO “p засяга главно фазата на образуване на лабилни полифосфати, може да се предположи, че резултатите, получени по този метод след ежедневна експозиция, ще отразяват промяна в съдържанието на тази конкретна фракция.

Методът се основава на хидролиза на полифосфати в кисела среда. Има преход на полифосфати в разтворени ортофосфати, които се определят колориметрично под формата на фосфорно-молибденов комплекс, оцветен в синьо. В отделна проба се откриват първоначално съдържащи се във вода ортофосфати, чието количество се изважда от резултата, получен при определяне на фосфатите. Водните проби се вземат в добре излужени бутилки с шлифовани запушалки.

Подготовката на анализа се състои от следните стъпки:

1) приготвяне на основния стандартен разтвор на монозаместен калиев фосфат (0,7165 g от лекарството, предварително изсушено в
термостат за 2 часа при 105 0 C, разтворете в 1-литрова мерителна колба
дестилирана вода и доведете до марката чрез добавяне на 2 ml хлороформ) -
1 ml разтвор съдържа 0,5 mg фосфатен йон;

2) приготвяне на първия работен стандартен състав на монозаместен калиев фосфат - 10 ml от основния разтвор се довеждат до 1 литър с дестилирана вода, 1 ml разтвор съдържа 0,005 mg фосфатен йон;

3) приготвяне на втория работен стандартен състав на монозаместен калиев фосфат - 50 ml от първия разтвор се довежда до 250 ml
дестилирана вода. 1 ml разтвор съдържа 0,001 mg фосфатен йон;
използвайте прясно получен разтвор;

4) приготвяне на амониев молибдат (реактив 1, кисел разтвор) - 25 g от лекарството се разтварят в 600 ml дестилирана вода. Към това
Към разтвора, внимателно охлаждане, добавете 337 ml концентриран 98%
сярна киселина. След това добавете дестилирана вода до 1 литър. Решение
съхранявайте в бутилка от тъмно стъкло с шлифована запушалка, използвайте я
48 часа след приготвяне;

5) получаване на амониев молибдат (реагент 2, слабо кисел
разтвор) - 10 g от лекарството се разтварят в 400 ml дестилирана вода.
Към този разтвор, докато се охлажда внимателно, се добавят 7 ml концентрирана 98% сярна киселина. След това добавете дестилирана вода до 1 литър. Разтворът се съхранява в тъмна стъклена бутилка с шлифована запушалка и се използва 48 часа след приготвяне;

6) приготвяне на 37% разтвор на сярна киселина - 33,7 ml концентрирана 98% сярна киселина се смесват внимателно без добавяне
на големи порции към 60 мл дестилирана вода. След охлаждане
разтворът се довежда до 100 ml;

7) приготвяне на основен разтвор на калаен диоксид - 1,95 g кристален, неизветрял препарат се разтваря в 50 ml 13,6% солна киселина (18,4 ml 37% свободна от арсен киселина, регулирана до
50 ml дестилирана вода). Суспензията се разбърква старателно, използва се веднага след получаване или се съхранява в бутилка, покрита отвътре
слой от парафин;

8) приготвяне на работен разтвор на калаен дихлорид - 2,5 ml от основния разтвор се довежда до 10 ml с дестилирана вода, използвайте
пресен разтвор, стабилността му е около 4 часа.

На определянето на полифосфатите пречи желязото с концентрация над 1 mg/l, разтворимите силикати - над 25 mg/l и нитритите. Влиянието на желязото се елиминира чрез подходящо разреждане с изпитваната вода. Ефектът на нитритите в концентрация до 25 mg/l се елиминира чрез добавяне на 0,1 g сулфаминова киселина към пробата (добавя се преди амониев молибдат).

Метод за определяне на ортофосфати. Същите реактиви като в пробните разтвори се добавят към 50 ml от тестовата вода, прекарана през плътен хартиен филтър („синя лента“). Оптичната плътност на разтвора се определя с помощта на FEC, а концентрацията на ортофосфатите се определя съгласно калибровъчната крива.

Метод за определяне на полифосфати. Към 100 ml от изпитваната вода, прекарана през дебел хартиен филтър, или към по-малък обем, доведен до 10 ml с дестилирана вода, се добавят 2 ml 37% разтвор на сярна киселина и се вари 30 минути. Обемът на тестваната вода се поддържа чрез добавяне на 50-90 ml дестилирана вода. След охлаждане разтворът се прехвърля в мерителна колба от 100 ml и обемът се довежда до марката. Добавете 1 ml слабо кисел разтвор на молибдатна киселина (реактив 2); разбъркайте и след 5 минути добавете 0,1 ml работен разтвор на калаен хлорид и разбъркайте отново. След 10-15 минути интензитетът на цвета се измерва на FEC.

Изграждане на калибровъчна графика: пипетирайте 0 в мерителни колби от 50 ml; 0,5; 1; 2; 5, 10 и 20 ml работен стандартен разтвор на калиев фосфат (1 mg - 0,001 mg фосфатен йон) и регулирайте обема до марката с дестилирана вода.

Съдържанието на полифосфати в пробните разтвори ще бъде съответно: 0; 0,01; 0,02; 0,04; 0,1; 0,2 и 0,4 mg фосфатен йон в 1 литър вода. Добавете точно 1 ml амониев молибдат (реактив 1) във всяка колба и след 5 минути добавете 0,1 ml работен разтвор на калаен дихлорид с пипета и разбъркайте отново. Интензитетът на цвета се измерва след 10-15 минути на FEC, с червен филтър и кювети с дебелина на слоя 2-3 cm.

Оптичната плътност на контролната проба се изважда от получените оптични плътности и резултатите се изобразяват.